Лимфоузлы гистология: Биопсия сигнального лимфатического узла

Содержание

Процедура исследования «сторожевых» лимфатических узлов для определения метастазирования в подмышечную область – информация о «клинике Хелена»

Исследование подмышечных «сторожевых» лимфатических узлов (их еще называют сентильными лимфоузлами) на наличие раковых клеток является в Финляндии обязательной составной частью хирургического лечения рака молочной железы. Проверяя статус «сторожевых» лимфатических узлов, мы имеем возможность сохранить лимфатические узлы подмышечной области в тех случаях, когда в них нет метастазов.

Исследование «сторожевых» лимфоузлов является частью современного лечения рака груди, поскольку оно помогает определить фактическую распространенность рака в организме. Усовершенствованный метод биопсии «сторожевого» лимфоузла предоставляет важную информацию для планирования дальнейшего лечения.

Что такое «сторожевые» лимфатические узлы?

«Сторожевыми» называют лимфатические узлы, которые раковые клетки первыми встречают на своем пути от опухоли дальше по лимфатическим протокам. В случае с раком молочной железы «сторожевые» лимфоузлы обычно располагаются в подмышке.

«Сторожевые» лимфатические узлы при раке груди

Исследование «сторожевых» лимфатических узлов уже давно является в Финляндии важной частью диагностики рака молочной железы. Такое исследование позволяет понять степень распространения раковых клеток в организме, что определяет тактику дальнейшего лечения.

На определенном этапе развития опухоли злокачественные клетки могут начать распространяться в организме по лимфатическим протокам. В случае опухоли в груди злокачественные клетки попадают из молочной железы в подмышечную область – именно там на их пути встречаются первые лимфатические узлы, которые называют «сторожевыми» (или сентильными, или сигнальными). Они долгое время способны сдерживать дальнейшее распространение раковых клеток в организме.

Исследование «сторожевых» лимфоузлов

С помощью исследования «сторожевых» лимфоузлов мы получаем важную информацию о распространенности рака за пределами опухоли. Сначала проводится процедура радиоизотопного картирования лимфатических узлов (лимфосцинтиграфия), для которой радиоизотоп технеций вводят в ткань молочной железы в области опухоли.

На картировании отмечают места накопления радиоизотопа – это и есть «сторожевые» лимфоузлы. Затем во время операции хирург находит их с помощью гамма-детектора. В качестве вспомогательного метода хирург может использовать специальный синий краситель.

Подготовка изотопа технеция для проведения процедуры исследования «сторожевых» лимфоузлов.

Биопсия «сторожевого» лимфатического узла

Результаты биопсии «сторожевого» лимфатического узла помогают определить степень распространенности рака и то, какая комбинация методов лечения будет оптимальна для пациента: требуются ли хирургическое вмешательство, лучевая терапия и химиотерапия.

«Сторожевые» лимфатические узлы удаляют во время операции и отправляют на патогистологическое исследование. Раньше для изучения «сторожевых» лимфатических узлов непосредственно во время операции применяли метод замороженных срезов.

Сейчас удаленные «сторожевые» лимфатические узлы отправляют на тщательное послеоперационное патогистологическое исследование.

Если по результатам исследования обнаруживается, что рак распространился дальше, чем предполагалось, может потребоваться новая операция по расширенному удалению подмышечных лимфатических узлов. Однако необходимость повторной операции возникает очень редко.

Удаление «сторожевых» лимфатических узлов

Если гистологическое исследование подтверждает, что «сторожевые» лимфатические узлы не содержат метастазов, то удаления остальных подмышечных лимфатических узлов не требуется. При наличии метастазов в «сторожевых» лимфатических узлах в подмышечной впадине проводят расширенное удаление лимфоузлов (удаляют лимфоузлы I и II уровней). Впоследствии на область подмышки добавляют лучевую терапию, что позволяет справиться с распространением опухолевых клеток.

Новейшие исследования показали, что при единичных небольших метастазах в «сторожевых» лимфатических узлах для последующего лечения достаточно только лучевой терапии, а расширенного удаления подмышечных лимфатических узлов не требуется.

Быстрый доступ к обследованию и лечению

Если вы обнаружили у себя один из перечисленных выше симптомов в груди или вам был поставлен диагноз рака молочной железы, у вас есть возможность получить консультацию доктора Хелены Пуонти быстро и без направления.

Почему пациенты выбирают «Клинику Хелена»:
  • Знания и опыт мирового уровня в лечении рака молочной железы по современным стандартам.
  • Разработанный доктором Хеленой Пуонти метод реконструкции «чувствительная грудь» доступен только в «Клинике Хелена»
  • Наша работа всецело направлена на то, чтобы помочь нашим пациенткам полностью выздороветь

Наши врачи

Биопсия лимфатического узла в Москве | Биопсия лимфоузлов

Что это такое
Биопсия – это метод забора клеток или тканей из организма, позволяющий получить образцы для дальнейшего исследования под микроскопом (цитологического, гистологического и иммуногистохимического анализа).

Биопсию выполняют наши онкологи по предварительной записи.

Виды биопсии лимфоузлов, которые мы делаем
Тонкоигольная биопсия (пункционная) – она часто требуется при раке молочной железы, чтобы понять, поражены ли лимфоузлы. Или чтобы определить, является ли проявлением рака узел, который мы видим на КТ или УЗИ.

Трепан-биопсия, core-биопсия. Их делают специальной толстой иглой (трепан). Благодаря строению иглы во время процедуры врачам удаётся взять столбик ткани, достаточный для проведения гистологического исследования.

В некоторых случаях биопсии может быть недостаточно для того, чтобы выяснить, что происходит, тогда

удаляют весь лимфоузел. Для этой манипуляции мы направляем пациентов в центры, которым доверяем.

Что происходит дальше
Жидкость или клетки отправляются в лабораторию на цитологическое исследование. Образцы тканей мы помещаем в формалин и отвозим на гистологическое исследование. 

В лаборатории образцы тканей подготавливают специальным образом и заливают парафином для длительного хранения.

То, что получается в результате, называется гистологическими блоками. Чтобы исследовать ткань под микроскопом, из блоков вырезают очень тонкую пластинку, окрашивают специальными красителями, и помещают на стекло. То, что получается в итоге, называют гистологическим стеклом.

Блоки и стекла мы всегда забираем из лабораторий и передаем вам.

С какими лабораториями мы работаем
Мы сотрудничаем с разными центрами, выбор в каждом конкретном случае зависит от специфики заболевания. Главный критерий для нас – качество исследований, потому что на основании этих данных мы выбираем тактику дальнейших действий.

Биопсия сторожевого лимфоузла при раке молочной железы

В подавляющем большинстве случаев лимфа из молочных желез оттекает в подмышечные (аксиллярные) лимфатические узлы.

Для того чтобы найти сторожевой лимфоузел при раке молочной железы, в молочную железу (либо в саму опухоль, либо подкожно – под сосок) вводится радиофармпрепарат, который представляет собой множество мелких частиц размером с клетку. Эти частицы помечены радиоактивным изотопом, который позволяет их увидеть при помощи гамма-детекторов. Частицы ведут себя так же, как клетки, оторвавшиеся от опухоли, которые попадают в межклеточное пространство, то есть они уносятся вместе с лимфой и застревают в лимфоузлах. Таким образом, большая часть этих частиц застрянет в первом лимфоузле на пути лимфооттока, то есть в сторожевом лимфатическом узле.

После введения радиофармпрепарата необходимо определить, где находится сторожевой лимфоузел. Это делается при помощи гамма-камеры (ОФЭКТ/КТ). Благодаря этому хирург может заранее определить, какой доступ ему необходим, чтобы найти этот лимфоузел минимально травматично для пациента.

Во время операции локализация сторожевого лимфоузла происходит при помощи гамма-зонда через небольшой разрез на коже, к которому подводится лимфоузел. Меченый изотопной меткой лимфоузел удаляется и передаётся на интраоперационное гистологическое исследование. Если в лимфоузле не обнаруживаются метастазы, то рану ушивают, а удаленные лимфоузлы отправляют на расширенное гистологическое исследование в лабораторию.

Если лимфоузлы интактные, то пациент с минимальными постоперационными изменениями (с небольшими рубцами) отправляется домой на выздоровление. Если в лимфоузлах всё-таки обнаруживаются микрометастазы, принимается решение о том, как дальше лечить пациента. Это может быть химиотерапия, лучевая терапия, расширенная операция.

В настоящее время ведутся мультицентровые исследования, которые показывают, что даже если в одном или двух сторожевых лимфоузлах при раке молочной железы есть микрометастазы, которые не прорастают в капсулу самого лимфоузла, то не обязательно делать расширенную лимфодиссекцию. В таком случае проводят лучевую терапию на области подмышки. Данные показывают, что продолжительность жизни после операции у таких пациенток сравнима с продолжительностью жизни пациенток, перенесших лимфодиссекцию, однако качество жизни сохраняется на более высоком уровне.

Что будет, если не проводить биопсию сторожевых лимфоузлов при раке молочной железы?

На самых ранних стадиях заболевания, когда все диагностические методы показали отсутствие отдаленных метастазов, есть два варианта хирургического лечения пациентов без биопсии сторожевых лимфоузлов:

1. Удаление опухоли и расширенная лимфодиссекция (удаление всех, или почти всех лимфоузлов).

В результате расширенной лимфодиссекции развивается множество осложнений, таких как отек, нарушение двигательной функции руки, и, как следствие, инвалидизация пациентки.

Лимфедема – это самый серьезный из всех побочных эффектов после операции по удалению лимфоузлов, и она может быть необратимой. Проявляется лимфедема отеком пальцев, ладоней и кистей руки, или даже всей руки, образованном из-за накопления лимфы. 

2. Удаление самой опухоли с сохранением лимфоузлов и дальнейшее облучение подмышечной области, то есть проведение химиотерапии и/или лучевой терапии.

Оценить

Средняя: 5,00 (3 оценки)

Ваша оценка:

Отменить

В Республиканском онкодиспансере в два раза увеличилось количество, проводимых биопсий сигнальных лимфатических узлов

Биопсия сигнальных лимфатических узлов – один из современных методов ранней диагностики изменений в лимфатических узлах при заболеваниях молочной железы и меланоме.

Сторожевой (сигнальный) лимфоузел – это первый лимфатический узел в регионарном лимфатическом бассейне, через который происходит отток лимфы от первичной опухоли, следовательно, он в первую очередь оказывается пораженным опухолевыми клетками. Сторожевых лимфоузлов может быть несколько. 

Исследование можно условно разделить на три этапа. 

В первом участвуют специалисты отделения радионуклидной диагностики. Они вводят подкожно пациенту радиофармпрепарат, который в течение нескольких часов накапливается в сторожевых лимфоузлах. Затем при помощи однофотонного эмиссионного компьютерного томографа врачи получают проекцию сторожевых лимфоузлов и передают эту «карту» онкологам. 

Дальше за дело берутся хирурги, которые в операционной при помощи специального устройства – гамма-зонда – находят помеченные радиофармпрепаратом сигнальные лимфоузлы. 

На заключительном этапе взятые на анализ сторожевые лимфоузлы изучают гистологии и выясняют, есть ли в них раковые клетки.  

«Методика позволяет оценить риски распространения опухолевого процесса на другие участки тела и может помочь некоторым пациентам избежать обширного удаления лимфатических узлов. Удаление дополнительных близлежащих лимфатических узлов может не понадобиться, если сигнальный лимфатический узел не содержит раковых клеток. В настоящее время методика является «золотым стандартом» в хирургии рака молочной железы и меланомы», — прокомментировал заведующий отдалением радионуклидной диагностики Павел Герасимов. 

За 2021 год в Республиканском клиническом онкологическом диспансере интраоперационным гамма-детектором сцинтиграфии сигнальных лимфоузлов выполнено 286 операций (в два раза больше по сравнению за 2020 г. — 141), в том числе при раке молочной железы — 220, меланоме — 66. 

Напомним, что борьба с онкологическими заболеваниями – одно из приоритетных направлений нацпроекта «Здравоохранение». Цель составляющей нацпроекта, региональной программы «Борьба с онкологическими заболеваниями», – повышение уровня ранней диагностики злокачественных новообразований, эффективности лечения, а также снижение смертности от онкопатологии.

Первоисточник: АУ «Республиканский клинический онкологический диспансер» Минздрава Чувашии

Гистологическое исследование препарата тканей лимфоузла

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 96-127, 95-873 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, пр-т. Ленина, 85А

+7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

%PDF-1. 6 % 1 0 obj > /Metadata 2 0 R /Pages 3 0 R /StructTreeRoot 4 0 R /Type /Catalog >> endobj 5 0 obj /ModDate (D:20161021122157+02’00’) >> endobj 2 0 obj > stream 2016-10-05T12:20:07Z2016-10-21T12:21:57+02:002016-10-21T12:21:57+02:00application/pdf

  • [email protected]
  • Библиотека УО «ВГМУ»
  • [email protected]; Библиотека УО «ВГМУ»uuid:6d8d9570-a9c2-4b1c-83f9-1bbd103df5f0uuid:d7f5aa09-760d-4bc6-8fb5-1e92610b9588 endstream endobj 3 0 obj > endobj 4 0 obj > /Type /StructTreeRoot >> endobj 6 0 obj > >> /StructParents 0 /Type /Page /Annots [526 0 R] >> endobj 7 0 obj > >> /StructParents 1 /Type /Page >> endobj 8 0 obj > >> /StructParents 2 /Type /Page >> endobj 9 0 obj > >> /StructParents 3 /Type /Page >> endobj 10 0 obj > >> /StructParents 4 /Type /Page >> endobj 11 0 obj > >> /StructParents 5 /Type /Page >> endobj 12 0 obj > >> /StructParents 6 /Type /Page >> endobj 13 0 obj > >> /StructParents 7 /Type /Page >> endobj 14 0 obj > >> /StructParents 8 /Type /Page >> endobj 15 0 obj > >> /StructParents 9 /Type /Page >> endobj 16 0 obj > >> /StructParents 10 /Type /Page >> endobj 17 0 obj > >> /StructParents 11 /Type /Page >> endobj 18 0 obj > >> /StructParents 12 /Type /Page >> endobj 19 0 obj > >> /StructParents 13 /Type /Page >> endobj 20 0 obj > >> /StructParents 14 /Type /Page >> endobj 21 0 obj > >> /StructParents 15 /Type /Page >> endobj 22 0 obj > >> /StructParents 16 /Type /Page >> endobj 23 0 obj > >> /StructParents 17 /Type /Page >> endobj 24 0 obj > >> /StructParents 18 /Type /Page >> endobj 25 0 obj > >> /StructParents 19 /Type /Page >> endobj 26 0 obj > >> /StructParents 20 /Type /Page >> endobj 27 0 obj > >> /StructParents 21 /Type /Page >> endobj 28 0 obj > >> /StructParents 22 /Type /Page >> endobj 29 0 obj > >> /StructParents 23 /Type /Page >> endobj 30 0 obj > >> /StructParents 24 /Type /Page >> endobj 31 0 obj > >> /StructParents 25 /Type /Page >> endobj 32 0 obj > >> /StructParents 26 /Type /Page >> endobj 33 0 obj > >> /StructParents 27 /Type /Page >> endobj 34 0 obj > >> /StructParents 28 /Type /Page >> endobj 35 0 obj > >> /StructParents 29 /Type /Page >> endobj 36 0 obj > >> /StructParents 30 /Type /Page >> endobj 37 0 obj > >> /StructParents 31 /Type /Page >> endobj 38 0 obj > >> /StructParents 32 /Type /Page >> endobj 39 0 obj > >> /StructParents 33 /Type /Page >> endobj 40 0 obj > >> /StructParents 34 /Type /Page >> endobj 41 0 obj > >> /StructParents 35 /Type /Page >> endobj 42 0 obj > >> /StructParents 36 /Type /Page >> endobj 43 0 obj > >> /StructParents 37 /Type /Page >> endobj 44 0 obj > >> /StructParents 38 /Type /Page >> endobj 45 0 obj > >> /StructParents 39 /Type /Page >> endobj 46 0 obj > >> /StructParents 40 /Type /Page >> endobj 47 0 obj > >> /StructParents 41 /Type /Page >> endobj 48 0 obj > >> /StructParents 42 /Type /Page >> endobj 49 0 obj > >> /StructParents 43 /Type /Page >> endobj 50 0 obj > >> /StructParents 44 /Type /Page >> endobj 51 0 obj > >> /StructParents 45 /Type /Page >> endobj 52 0 obj > >> /StructParents 46 /Type /Page >> endobj 53 0 obj > >> /StructParents 47 /Type /Page >> endobj 54 0 obj > >> /StructParents 48 /Type /Page >> endobj 55 0 obj > >> /StructParents 49 /Type /Page >> endobj 56 0 obj > >> /StructParents 50 /Type /Page >> endobj 57 0 obj > >> /StructParents 51 /Type /Page >> endobj 58 0 obj > >> /StructParents 52 /Type /Page >> endobj 59 0 obj > >> /StructParents 53 /Type /Page >> endobj 60 0 obj > >> /StructParents 54 /Type /Page >> endobj 61 0 obj > endobj 62 0 obj > endobj 63 0 obj > endobj 64 0 obj > endobj 65 0 obj > endobj 66 0 obj > endobj 67 0 obj > endobj 68 0 obj > endobj 69 0 obj > endobj 70 0 obj > endobj 71 0 obj > endobj 72 0 obj > endobj 73 0 obj > endobj 74 0 obj > endobj 75 0 obj > endobj 76 0 obj > endobj 77 0 obj > endobj 78 0 obj > endobj 79 0 obj > endobj 80 0 obj > endobj 81 0 obj > endobj 82 0 obj > endobj 83 0 obj > endobj 84 0 obj > endobj 85 0 obj > endobj 86 0 obj > endobj 87 0 obj > endobj 88 0 obj > endobj 89 0 obj > endobj 90 0 obj > endobj 91 0 obj > endobj 92 0 obj > endobj 93 0 obj > endobj 94 0 obj > endobj 95 0 obj > endobj 96 0 obj > endobj 97 0 obj > endobj 98 0 obj > endobj 99 0 obj > endobj 100 0 obj > endobj 101 0 obj > endobj 102 0 obj > endobj 103 0 obj > endobj 104 0 obj > endobj 105 0 obj > endobj 106 0 obj > endobj 107 0 obj > endobj 108 0 obj > endobj 109 0 obj > endobj 110 0 obj > endobj 111 0 obj > endobj 112 0 obj > endobj 113 0 obj > endobj 114 0 obj > endobj 115 0 obj > endobj 116 0 obj > endobj 117 0 obj > endobj 118 0 obj > endobj 119 0 obj > endobj 120 0 obj > endobj 121 0 obj > endobj 122 0 obj > endobj 123 0 obj > endobj 124 0 obj > endobj 125 0 obj > endobj 126 0 obj > endobj 127 0 obj > endobj 128 0 obj > endobj 129 0 obj > endobj 130 0 obj > endobj 131 0 obj > endobj 132 0 obj > endobj 133 0 obj > endobj 134 0 obj > endobj 135 0 obj > endobj 136 0 obj > endobj 137 0 obj > endobj 138 0 obj > endobj 139 0 obj > endobj 140 0 obj > endobj 141 0 obj > endobj 142 0 obj > endobj 143 0 obj > endobj 144 0 obj > endobj 145 0 obj > endobj 146 0 obj > endobj 147 0 obj > endobj 148 0 obj > endobj 149 0 obj > endobj 150 0 obj > endobj 151 0 obj > endobj 152 0 obj > endobj 153 0 obj > endobj 154 0 obj > endobj 155 0 obj > endobj 156 0 obj > endobj 157 0 obj > endobj 158 0 obj > endobj 159 0 obj > endobj 160 0 obj > endobj 161 0 obj > endobj 162 0 obj > endobj 163 0 obj > endobj 164 0 obj > endobj 165 0 obj > endobj 166 0 obj > endobj 167 0 obj > endobj 168 0 obj > endobj 169 0 obj > endobj 170 0 obj > endobj 171 0 obj > endobj 172 0 obj > endobj 173 0 obj > endobj 174 0 obj > endobj 175 0 obj > endobj 176 0 obj > endobj 177 0 obj > endobj 178 0 obj > endobj 179 0 obj > endobj 180 0 obj > endobj 181 0 obj > endobj 182 0 obj > endobj 183 0 obj > endobj 184 0 obj > endobj 185 0 obj > endobj 186 0 obj > endobj 187 0 obj > endobj 188 0 obj > endobj 189 0 obj > endobj 190 0 obj > endobj 191 0 obj > endobj 192 0 obj > endobj 193 0 obj > endobj 194 0 obj > endobj 195 0 obj > endobj 196 0 obj > endobj 197 0 obj > endobj 198 0 obj > endobj 199 0 obj > endobj 200 0 obj > endobj 201 0 obj > endobj 202 0 obj > endobj 203 0 obj > endobj 204 0 obj > endobj 205 0 obj > endobj 206 0 obj > endobj 207 0 obj > endobj 208 0 obj > endobj 209 0 obj > endobj 210 0 obj > endobj 211 0 obj > endobj 212 0 obj > endobj 213 0 obj > endobj 214 0 obj > endobj 215 0 obj > endobj 216 0 obj > endobj 217 0 obj > endobj 218 0 obj > endobj 219 0 obj > endobj 220 0 obj > endobj 221 0 obj > endobj 222 0 obj > endobj 223 0 obj > endobj 224 0 obj > endobj 225 0 obj > endobj 226 0 obj > endobj 227 0 obj > endobj 228 0 obj > endobj 229 0 obj > endobj 230 0 obj > endobj 231 0 obj > endobj 232 0 obj > endobj 233 0 obj > endobj 234 0 obj > endobj 235 0 obj > endobj 236 0 obj > endobj 237 0 obj > endobj 238 0 obj > endobj 239 0 obj > endobj 240 0 obj > endobj 241 0 obj > endobj 242 0 obj > endobj 243 0 obj > endobj 244 0 obj > endobj 245 0 obj > endobj 246 0 obj > endobj 247 0 obj > endobj 248 0 obj > endobj 249 0 obj > endobj 250 0 obj > endobj 251 0 obj > endobj 252 0 obj > endobj 253 0 obj > endobj 254 0 obj > endobj 255 0 obj > endobj 256 0 obj > endobj 257 0 obj > endobj 258 0 obj > endobj 259 0 obj > endobj 260 0 obj > endobj 261 0 obj > endobj 262 0 obj > endobj 263 0 obj > endobj 264 0 obj > endobj 265 0 obj > endobj 266 0 obj > endobj 267 0 obj > endobj 268 0 obj > endobj 269 0 obj > endobj 270 0 obj > endobj 271 0 obj > endobj 272 0 obj > endobj 273 0 obj > endobj 274 0 obj > endobj 275 0 obj > endobj 276 0 obj > endobj 277 0 obj > endobj 278 0 obj > endobj 279 0 obj > endobj 280 0 obj > endobj 281 0 obj > endobj 282 0 obj > endobj 283 0 obj > endobj 284 0 obj > endobj 285 0 obj > endobj 286 0 obj > endobj 287 0 obj > endobj 288 0 obj > endobj 289 0 obj > endobj 290 0 obj > endobj 291 0 obj > endobj 292 0 obj > endobj 293 0 obj > endobj 294 0 obj > endobj 295 0 obj > endobj 296 0 obj > endobj 297 0 obj > endobj 298 0 obj > endobj 299 0 obj > endobj 300 0 obj > endobj 301 0 obj > endobj 302 0 obj > endobj 303 0 obj > endobj 304 0 obj > endobj 305 0 obj > endobj 306 0 obj > endobj 307 0 obj > endobj 308 0 obj > endobj 309 0 obj > endobj 310 0 obj > endobj 311 0 obj > endobj 312 0 obj > endobj 313 0 obj > endobj 314 0 obj > endobj 315 0 obj > endobj 316 0 obj > endobj 317 0 obj > endobj 318 0 obj > endobj 319 0 obj > endobj 320 0 obj > endobj 321 0 obj > endobj 322 0 obj > endobj 323 0 obj > endobj 324 0 obj > endobj 325 0 obj > endobj 326 0 obj > endobj 327 0 obj > endobj 328 0 obj > endobj 329 0 obj > endobj 330 0 obj > endobj 331 0 obj > endobj 332 0 obj > endobj 333 0 obj > endobj 334 0 obj > endobj 335 0 obj > endobj 336 0 obj > endobj 337 0 obj > endobj 338 0 obj > endobj 339 0 obj > endobj 340 0 obj > endobj 341 0 obj > endobj 342 0 obj > endobj 343 0 obj > endobj 344 0 obj > endobj 345 0 obj > endobj 346 0 obj > endobj 347 0 obj > endobj 348 0 obj > endobj 349 0 obj > endobj 350 0 obj > endobj 351 0 obj > endobj 352 0 obj > endobj 353 0 obj > endobj 354 0 obj > endobj 355 0 obj > endobj 356 0 obj > endobj 357 0 obj > endobj 358 0 obj > endobj 359 0 obj > endobj 360 0 obj > endobj 361 0 obj > endobj 362 0 obj > endobj 363 0 obj > endobj 364 0 obj > endobj 365 0 obj > endobj 366 0 obj > endobj 367 0 obj > endobj 368 0 obj > endobj 369 0 obj > endobj 370 0 obj > endobj 371 0 obj > endobj 372 0 obj > endobj 373 0 obj > endobj 374 0 obj > endobj 375 0 obj > endobj 376 0 obj > endobj 377 0 obj > endobj 378 0 obj > endobj 379 0 obj > endobj 380 0 obj > endobj 381 0 obj > endobj 382 0 obj > endobj 383 0 obj > endobj 384 0 obj > endobj 385 0 obj > endobj 386 0 obj > endobj 387 0 obj > endobj 388 0 obj > endobj 389 0 obj > endobj 390 0 obj > endobj 391 0 obj > endobj 392 0 obj > endobj 393 0 obj > endobj 394 0 obj > endobj 395 0 obj > endobj 396 0 obj > endobj 397 0 obj > endobj 398 0 obj > endobj 399 0 obj > endobj 400 0 obj > endobj 401 0 obj > endobj 402 0 obj > endobj 403 0 obj > endobj 404 0 obj > endobj 405 0 obj > endobj 406 0 obj > endobj 407 0 obj > endobj 408 0 obj > endobj 409 0 obj > endobj 410 0 obj > endobj 411 0 obj > endobj 412 0 obj > endobj 413 0 obj > endobj 414 0 obj > endobj 415 0 obj > endobj 416 0 obj > endobj 417 0 obj > endobj 418 0 obj > endobj 419 0 obj > endobj 420 0 obj > endobj 421 0 obj > endobj 422 0 obj > endobj 423 0 obj > endobj 424 0 obj > endobj 425 0 obj > endobj 426 0 obj > endobj 427 0 obj > endobj 428 0 obj > endobj 429 0 obj > endobj 430 0 obj > endobj 431 0 obj > endobj 432 0 obj > endobj 433 0 obj > endobj 434 0 obj > endobj 435 0 obj > endobj 436 0 obj > endobj 437 0 obj > endobj 438 0 obj > endobj 439 0 obj > endobj 440 0 obj > endobj 441 0 obj > endobj 442 0 obj > endobj 443 0 obj > endobj 444 0 obj > endobj 445 0 obj > endobj 446 0 obj > endobj 447 0 obj > endobj 448 0 obj > endobj 449 0 obj > endobj 450 0 obj > endobj 451 0 obj > endobj 452 0 obj > endobj 453 0 obj > endobj 454 0 obj > endobj 455 0 obj > endobj 456 0 obj > endobj 457 0 obj > endobj 458 0 obj > endobj 459 0 obj > endobj 460 0 obj > endobj 461 0 obj > endobj 462 0 obj > endobj 463 0 obj > endobj 464 0 obj > endobj 465 0 obj > endobj 466 0 obj > endobj 467 0 obj > endobj 468 0 obj > endobj 469 0 obj > endobj 470 0 obj > endobj 471 0 obj > endobj 472 0 obj > endobj 473 0 obj > endobj 474 0 obj > endobj 475 0 obj > endobj 476 0 obj > endobj 477 0 obj > endobj 478 0 obj > endobj 479 0 obj > endobj 480 0 obj > endobj 481 0 obj > endobj 482 0 obj > endobj 483 0 obj > endobj 484 0 obj > endobj 485 0 obj > endobj 486 0 obj > endobj 487 0 obj > endobj 488 0 obj > endobj 489 0 obj > endobj 490 0 obj > endobj 491 0 obj > endobj 492 0 obj > endobj 493 0 obj > endobj 494 0 obj > endobj 495 0 obj > endobj 496 0 obj > endobj 497 0 obj > endobj 498 0 obj > endobj 499 0 obj > endobj 500 0 obj > endobj 501 0 obj > endobj 502 0 obj > endobj 503 0 obj > endobj 504 0 obj > endobj 505 0 obj > endobj 506 0 obj > endobj 507 0 obj > endobj 508 0 obj > endobj 509 0 obj > endobj 510 0 obj > endobj 511 0 obj > endobj 512 0 obj > endobj 513 0 obj > endobj 514 0 obj > endobj 515 0 obj > endobj 516 0 obj > endobj 517 0 obj > stream xuTK0V&moJy}k;H=lH Z!. 2Qr$9Qwc4+R%+؟>{s`9Mϊ)R؟xh?1#yli0

    AskdC?M4ɪ:$>LP9xP}[email protected]Ի27q&G3(ڣDk.#4Ӷ#VlJ»Rf8ʋ1uQ*>IQ ŒXu3CԴRRu»,gDz֋] b(,OǗҗHFVw,{B;a]h:M`3ro:

    Биопсия лимфатического узла | Клиника Семейный доктор

    Лимфатические узлы являются частью лимфатической системы и связаны между собой одноименными сосудами. При онкологических и инфекционных заболеваниях они часто берут на себя барьерные функции, сигнализируя о наличии патологического очага. Увеличение лимфоузлов может быть симптомом различных заболеваний.

    Биопсия — это малоинвазивный метод диагностики, который предусматривает забор части тканей или клеток для их дальнейшего исследования под микроскопом. Процедуру проводят врачи хирурги-онкологи при подозрении на изменение структуры, увеличении лимфатических узлов. Биопсия лимфатического узла помогает уточнить предполагаемый диагноз.

    Виды процедуры

    Есть несколько разновидностей биопсии лимфатических узлов:

    • Тонкоигольная, или пункционная. Позволяет на основании цитологического исследования определить поражение лимфоузлов, установить наличие метастазирования опухоли.

    • Трепан-биопсия. Предусматривает использование толстой иглы. Это позволяет выполнить забор столбика тканей, которого достаточно для гистологического исследования, при этом разрезов не проводится.

    • Биопсия сигнальных лимфатических узлов. Сигнальные, или сторожевые лимфоузлы, представляют собой первый путь раннего метастазирования опухолей. Они первыми улавливают атипичные клетки.

    Процедуры проводятся под местным обезболиванием. Иногда лимфоузел может быть удален и исследован полностью, в этом случае потребуется более серьезная подготовка, врач обязательно разъяснит особенности проведения манипуляции. 

    Особенности лабораторного изучения

    Полученная жидкость, ткани или клетки направляются в лабораторию на цитологическое и гистологическое исследование. В лаборатории они обрабатываются особым образом, при определенных условиях изучения материала и с возможностью длительного хранения.

    Срез обрабатывают красителями и помещают на предметное стекло. При выявлении атипичных клеток  данные обязательно отражаются в письменном заключении.

    Применение биопсии позволяет:

    • определить имеющееся заболевание и его характер;

    • проведение максимально органосохраняющей операции;

    • избежать осложнений лимфодиссекции;

    • улучшить результаты операции;

    • правильно подобрать лучевую и химиотерапию;

    • убедиться в наличии/отсутствии злокачественного процесса.

    Этот метод является одним из самых информативных.

    Биопсию лимфатических узлов на шее, в подмышечной, паховой и других областях, успешно проводят врачи-онкологи клиники «Семейный доктор».

    Мы владеем необходимыми методами диагностики, используем современные инструменты и анестетики, соблюдаем все условия проведения инвазивных процедур. 

    Для записи к врачу позвоните по телефону единого контакт-центра в Москве +7 (495) 775 75 66, воспользуйтесь сервисом онлайн-записи к врачу или обратитесь в регистратуру клиники.

    Стоимость

    врач-хирург, онколог, маммолог

    врач-онколог, хирург, колопроктолог, врач ультразвуковой диагностики

    врач-хирург, онколог, врач ультразвуковой диагностики

    врач-хирург, онколог, к.м.н.

    врач ультразвуковой диагностики, хирург

    врач-хирург, онколог

    врач-хирург, онколог, флеболог

    врач-хирург, к. м.н.

    Гистопатология лимфатических узлов

    Abstract

    Лимфатические узлы функционируют как фильтры тканей и тканевых жидкостей и являются местом происхождения и продукции лимфоцитов для нормальных физиологических функций. В рамках этой нормальной функции они реагируют как на эндогенные, так и на экзогенные вещества множеством специфических морфологических и функциональных реакций. Поражения могут быть как пролиферативными, так и непролиферативными, и могут быть связаны с лечением или нет. Гистологическая оценка лимфатических узлов необходима для понимания иммунотоксического действия химических веществ, а полученные данные являются важным компонентом оценки риска для человека.Перед патологоанатомом-токсикологом стоит задача интерпретировать данные патологии в рамках полной клинической оценки всего животного. Ежедневные травмы, старение и токсины могут изменить нормальную гистологию и основную функцию лимфатических узлов. Поэтому важно различать и дифференцировать поражения, возникающие естественным образом во время нормального развития и старения, от тех, которые индуцируются ксенобиотиками. Для достижения этой цели решающее значение имеет сравнение с контролем, соответствующим возрасту и полу.

    Ключевые слова: Лимфатический узел, иммунотоксичность, ксенобиотик, гиперплазия, ангиэктазия, лимфома

    Введение

    Лимфатические узлы представляют собой организованные лимфоидные органы, содержащие лимфоциты в тонкой ретикулярной строме. Структуры внутри лимфатического узла включают капсулу, подкапсульный синус, кору (зона В-клеток с фолликулами и зародышевыми центрами), паракортекс (зона Т-клеток), мозговые синусы, мозговые тяжи и ворота. Чтобы убедиться, что все эти компоненты оценены, особое внимание следует уделить сбору и ориентации тканей.Лимфатические узлы следует регулярно исследовать макроскопически и под микроскопом, поскольку они могут отражать поражения органов и тканей, которые они дренируют. Кроме того, особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, которые с большей вероятностью будут подвергаться воздействию тестируемого соединения (Haley et al. , 2005; Ruehl-Fehlert et al., 2005). Бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы следует исследовать на наличие соединений, вводимых путем ингаляции, тогда как соединения, вводимые перорально, скорее всего повлияют на нижнечелюстные (поверхностные шейные) и мезентериальные лимфатические узлы.При кожном или подкожном воздействии следует исследовать самый проксимальный дренирующий периферический узел или узлы (ушные, подмышечные, паховые и подколенные).

    Следует также учитывать диапазон нормальных гистологических данных в пределах групп лимфатических узлов, обусловленных нормальными иммунными функциями. Например, синусовый гистиоцитоз является нормальным явлением в брыжеечных лимфатических узлах, а макрофаги могут содержать эндогенный пигмент (гемосидерин, липофусцин) или экзогенный пигмент, отражающий поглощение антигена из пищеварительного тракта.Нижнечелюстные лимфатические узлы подвергаются воздействию антигенов из ротоглоточной области и обычно имеют хорошо развитые вторичные фолликулы и значительное количество плазматических клеток в мозговых тяжах. Для системных эффектов соединений исследование лимфатических узлов, удаленных от места нанесения, может предоставить дополнительную информацию. Если не дренировать место нанесения, подколенные и подмышечные лимфатические узлы часто не стимулируются и могут дать информацию о состоянии лимфатического узла в состоянии покоя.Однако эти лимфатические узлы могут быть очень вариабельными, маленькими и их трудно адекватно брать. Также полезно знать об областях, дренируемых конкретными узлами, для определения происхождения метастатических новообразований. Подробная информация о расположении конкретных лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс описана Tilney (1971) и Sainte-Marie et al. (1982). Информация об анатомии и номенклатуре мышиных лимфатических узлов предоставлена ​​Van den Broeck et al. (2006). Наконец, тщательное и подробное исследование лимфатических узлов может дать ценные сведения о возможном механизме действия исследуемого материала.Подробное описание нормальной структуры, функции и гистологии лимфатического узла см. в статье Willard-Mack (2006). Подробную информацию о расширенной гистопатологической оценке лимфатического узла см. в статье Elmore (2006). Следующие рисунки и описания иллюстрируют и обсуждают некоторые типичные поражения, наблюдаемые в лимфатических узлах.

    Лимфоидный некроз

    Лимфоидный некроз может быть фокальным, многоочаговым или диффузным в пределах лимфатического узла, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного некроза между лимфатическими узлами у одного и того же животного в зависимости от провоцирующего фактора и эффективности иммунный ответ.Некроз лимфоцитов характеризуется набуханием клеток со слипанием хроматина, кариорексисом или кариолизисом, а при более тяжелых поражениях — обильным эозинофильным клеточным детритом (1). Некроз часто сопровождается воспалительными клетками, включая нейтрофилы и фагоцитирующие макрофаги с внутрицитоплазматическим клеточным детритом (1). Эту форму некроза следует отличать от апоптоза, при котором происходит гибель отдельных клеток, характеризующаяся сморщиванием клеток, ядерным пикнозом и фрагментацией с апоптотическими тельцами и макрофагами с осязаемыми тельцами. Этот тип гибели клеток обычно происходит в зародышевых центрах вторичных фолликулов, где он является важным гомеостатическим механизмом. Апоптоз также может быть вызван различными повреждающими стимулами при введении в низких дозах, но эти же стимулы могут вызывать некроз при более высоких дозах. Примерами являются тепло, облучение, гипоксия и цитотоксические противораковые препараты (например, циклофосфамид). Дексаметазон, глюкокортикоид, также может вызывать апоптоз лимфоцитов в лимфатических узлах, но тимус является более чувствительным органом (Elmore, 2006).

    На рисунках 1A–E показаны нижнечелюстные лимфатические узлы самца яванского макака, получившего тестируемое изделие в ходе четырехнедельного исследования через желудочный зонд с 4-недельным периодом восстановления. На рисунках 1А-С показан лимфоидный некроз коры и областей паракортикального и мозгового вещества. Области некроза эозинофильны при малом увеличении (рис. 1А-В). При большем увеличении (рис. 1С) можно увидеть потерю лимфоцитов в сочетании с эозинофильным клеточным детритом и темным пикнотическим ядерным детритом. Макрофаги являются преобладающими воспалительными клетками в этой области. Рисунок 1D и более высокое увеличение на рисунке 1E относятся к другой области одного и того же лимфатического узла с более сильной воспалительной реакцией, преимущественно нейтрофилами. На рисунках 1F и 1G представлены увеличенные изображения медиастинального лимфатического узла 90-дневной самки крысы F344, обработанной высокой дозой уретана, при малом и большом увеличении. Имеется умеренное лимфоидное истощение, характеризующееся уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием, а также истощением паракортикальных лимфоцитов.При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными, как показано стрелкой на рисунке 1G. Микрофотографии 1A–E предоставлены Drs. Ханс Харлеман и Кэтрин Бовенкамп.

    Лимфоидное истощение или атрофия являются следствием хронического некроза или апоптоза. Это может произойти в любом лимфатическом узле, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного истощения между лимфатическими узлами у одного и того же животного. Лимфоидное истощение обычно характеризуется уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием и/или истощением паракортикальных лимфоцитов (11).При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными (1).

    Массивный некроз лимфатических узлов встречается редко и может быть вызван обструкцией кровотока (инфарктом). Это поражение характеризуется диффузным коагуляционным некрозом с потерей клеточных ядер, но на ранней стадии с хорошо сохранившимися контурами клеток. Казеозный некроз также является необычным поражением, но может быть вызван инфекцией туберкулезными организмами и грибками у нечеловекообразных приматов. Его также можно увидеть в очагах быстро растущих новообразований.Макроскопически имеется полутвердая ткань от серого до бледно-желтого цвета. Микроскопически имеется аморфная масса зернистого эозинофильного материала без клеточных очертаний, а также без идентифицируемых ядер.

    Эктазия лимфатических синусов

    Эктазия лимфатических синусов может поражать как мозговые, так и субкапсулярные пазухи. Диффузная эктазия синуса обычно связана с лимфоидной атрофией. Это поражение можно обнаружить у контрольных животных, особенно в брыжеечных и медиастинальных лимфатических узлах стареющих мышей.является примером эктазии медуллярного синуса. Это поражение характеризуется наличием расширенных или кистозных синусов, выстланных лимфэндотелием и заполненных бледным эозинофильным/амфофильным материалом (предположительно лимфой), которые имеют тонкий кружевной вид (4). В лимфе можно найти небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Это пример эктазии мозгового синуса у контрольной 2-летней самки крысы F344. На изображении с малым увеличением показан большой эктатический мозговой синус (рис. 2А).При большем увеличении можно визуализировать лимфэндотелий, выстилающий пазуху (стрелка, рис. 2В). Бледная эозинофильная лимфа, заполняющая расширенный синус, имеет тонкий кружевной вид (рис. 2В). Иногда в лимфе можно обнаружить небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Синонимами этого поражения являются лимфангиэктазия, лимфатические кисты, кистозно-лимфатическая эктазия и дилатация синуса. Группа патологоанатомов, связанных с Национальной токсикологической программой, была опрошена на предмет предпочтительной терминологии для этого поражения.Двумя предпочтительными терминами были «эктазия лимфатического синуса» и «лимфангиэктазия». Лимфатическая эктазия синуса более четко определяет локализацию поражения.

    Сосудистые поражения

    При определении сосудистых поражений в лимфатических узлах можно использовать различные термины, каждая из которых имеет очень конкретное определение. Ангиэктазия определяется в Медицинском словаре Дорланда как «аномальное, обычно грубое расширение и часто удлинение кровеносного или лимфатического сосуда», а его синонимами являются гемангиэктазия, гемангиэктазия, вазодилатация и вазодилатация.В лимфатических узлах ангиэктазия кровеносных сосудов характеризуется расширением и гиперемией тонких вен в коре, мозговом веществе, капсуле, воротах или окружающей соединительной ткани. Ангиэктазии чаще всего наблюдаются в брыжеечных лимфатических узлах крыс и мышей, включая штамм B6C3F1, и могут сопровождаться или не сопровождаться кровоизлиянием (Ward et al., 1999). Это поражение можно отличить от гематомы по наличию клеток эндотелиальной выстилки и от ранней гемангиомы по отсутствию крупных опухолевых эндотелиальных клеток.

    Внутрисинусоидальные эритроциты (синусовый эритроцитоз) могут возникать в результате дренирования лимфатическим узлом области кровоизлияния. Это также может быть артефактом, возникающим в результате эвтаназии или рассечения тканей во время вскрытия, особенно в бронхиальных или медиастинальных лимфатических узлах. Обрезание и срез ткани лимфатических узлов также может привести к удалению эритроцитов из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем могут появиться в синусоидах или в перинодальной области (4). Лимфатические узлы, дренирующие места кровоизлияния, также могут иметь интрасинусоидальные эритроциты, но, в зависимости от хронизации, они могут сопровождаться различным количеством гемосидерин-нагруженных макрофагов, эритрофагоцитозом и воспалительными клетками (4).

    На рисунках 3A и 3B представлены изображения бронхиального лимфатического узла контрольной 3-месячной крысы Sprague-Dawley. Обрезка и разрез этой ткани вытеснили эритроциты из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем появились в синусоидах (рис. 3А, короткая стрелка и рис. 3В) и в перинодальной области (рис. 3А, длинная стрелка). Фигуры 3C и 3D представляют собой изображения медиастинального лимфатического узла 3-месячной крысы Wistar с очагом легочного кровотечения. В этом случае на хронический характер поражения указывает наличие эритрофагоцитоза и гемосидерин-нагруженных макрофагов (рис. 3D).На рисунках 3E–H представлены изображения лимфатических узлов мышей с расширенными сосудистыми пространствами, заполненными эритроцитами. В этом случае трудно отличить ангиэктазию лимфатических узлов от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды могут напоминать расширенные кровеносные сосуды. Оба они выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. Оценка других систем органов на наличие гиперемии и поиск областей кровоизлияния в дренажном поле может помочь более четко определить это поражение.На рисунках 3I–L представлены изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, получавшего высокую дозу N-метилолакриламида. Этот лимфатический узел имеет ряд поражений, которые включают узловые и перинодальные ангиэктазии с гиперемией (рис. 3I-K), синусовый эритроцитоз (рис. 3I-J), пролиферацию перинодальных сосудов с ангиоэктазиями и гиперемией (рис. 3K) и кровоизлияние в узловую паренхиму (рис. 3I-K). Рисунок 3L). На рисунках 3M-P представлены изображения мезентериальных лимфатических узлов двух самцов мышей B6C3F1 в возрасте 24 месяцев, которым вводили высокую дозу метилимидазола.В обоих лимфатических узлах имеются заполненные кровью сосудистые пространства (кровеносные и/или лимфатические сосуды). Также имеются застойные артериолы в окружающей ткани одного лимфатического узла (рис. 3М) и периваскулярное кровоизлияние, связанное с артериолой в перинодальной жировой ткани другого лимфатического узла (рис. 30-Р). Микрофотографии на рисунках 3E и 3F предоставлены Drs. К. Фрит и Дж. Уорд. Рисунки 3G и 3H. Микрофотографии предоставлены доктором Майклом Личем.

    Поражения сосудов лимфатических узлов трудно отличить от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные кровеносные сосуды могут напоминать расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды.Оба выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. При попытке решить эту проблему можно применить более целостный диагностический подход. Например, оценка застойных явлений в других системах органов может исключить наличие или отсутствие застоя кровеносных сосудов в качестве возможного диагноза. Обследование участков кровоизлияний в области дренажа узла может помочь исключить/исключить синусовый эритроцитоз. являются примерами заполненных кровью сосудистых пространств, которые требуют такого целостного подхода для более четкого определения поражения.

    Широкий спектр сосудистых поражений у леченных животных может включать застой синуса, синусовый эритроцитоз, узловую и перинодальную ангиэктазию с застоем, кровоизлияние в узловую паренхиму, перинодальную пролиферацию сосудов и периваскулярное кровоизлияние (). Диагноз связанных с лечением сосудистых поражений в лимфатических узлах следует ставить с учетом общего состояния здоровья животного и наличия или отсутствия сосудистых поражений в других органах и тканях. Обзор терминологии поражения двух лимфатических узлов был получен от группы патологоанатомов.Без каких-либо предварительных знаний о связанных с лечением поражениях и патогенезе поражений лимфатических узлов у этих мышей возникли разногласия относительно наиболее подходящей терминологии. Синусовый эритроцитоз и гиперемия стали двумя предпочтительными терминами. Однако большинство согласились с тем, что для постановки точного диагноза необходима информация о других органах, потенциальных участках кровоизлияния в дренажном поле и времени от смерти до вскрытия.

    Телеангиэктазия и ангиоматоз — это два термина, которые обычно не используются для определения сосудистых эктазий в лимфатических узлах грызунов, поскольку в медицине эти термины используются для обозначения неопластических поражений. Телеангиэктазия определяется как «аномальное расширение капилляров и артериол, которое часто образует ангиому», а ангиоматоз определяется как «заболевание сосудов с образованием множественных ангиом». Ангиома считается опухолью, состоящей в основном из кровеносных или лимфатических сосудов. Однако, когда в лимфатическом узле присутствуют наполненные кровью сосуды, важно отличать их от сосудистых опухолей, таких как гемангиомы и гемангиосаркомы.

    Пигмент

    Пигмент часто обнаруживается в цитоплазме синусоидных макрофагов как у контрольных, так и у обработанных животных.Наиболее распространенными пигментами являются гемосидерин и цероид/липофузин. Гемосидерин представляет собой железосодержащий зернистый материал золотисто-коричневого цвета, и макрофаги, содержащие этот пигмент, скорее всего, обнаруживаются в мозговых тяжах и лимфатических синусах лимфоузлов с синусовым эритроцитозом. Липофусцин также представляет собой мелкозернистый пигмент золотисто-коричневого цвета, но он образуется в основном из продуктов распада липидов, обычно тех, которые образуются из клеточных мембран. Цероид представляет собой вариант липофусцина, обладающий кислотоустойчивостью и аутофлуоресценцией.Количество макрофагов, содержащих гемосидерин или цероид/липофусцин, может быть увеличено при сопутствующей гиперплазии макрофагов в узлах, дренирующих различные поражения (воспалительные, некротические, неопластические и т. д.). Эти пигменты трудно отличить друг от друга с помощью обычного окрашивания гематоксилином и эозином. Чтобы различить их, можно использовать окраску железом (окраска железом Перла, реакция берлинской лазури) для окрашивания гемосидериновым синим. Для идентификации цероида/липофусцина можно использовать различные красители и методы, в том числе суданский черный В, реакцию Шморля, масляный красный О, карбол-липофусцин, окрашивание периодической кислотой-Шиффом, кислотно-устойчивое окрашивание Циля-Нильсена, автофлуоресценцию или лизосомально-кислотную фосфатазу и эстеразу. пятна.Меланин — еще один эндогенный пигмент, который можно найти в лимфатических узлах. Это нормальное явление для чернокожих мышей и не считается поражением. Для положительной идентификации меланина можно использовать метод Шморля, при котором гранулы меланина окрашиваются в сине-зеленый цвет. ДОФА-оксидаза представляет собой ферментный гистохимический метод, который также можно использовать и который очень специфичен для меланина.

    Различные вдыхаемые, проглатываемые, инъекционные и местные химические вещества могут вызывать синусовый гистиоцитоз в ассоциированных лимфатических узлах с макрофагами, содержащими инертное или нерастворимое пигментированное тестируемое вещество (Goginpath et al., 1987). Пигмент татуировки на хвосте, инертный и неполяризуемый, иногда можно обнаружить в виде скоплений разбросанного коричневого/черного материала в лимфатических узлах, прилегающих к татуировке. Регионарные лимфатические узлы, дренирующие места нанесения испытуемого препарата, всегда следует проверять на наличие экзогенных пигментов (), но исходное соединение или его метаболит иногда могут локализоваться в определенных тканях организма ().

    На рисунках 4A и 4B представлены изображения нижнего и верхнего медиастинального лимфатического узла у самцов крыс F344, получавших 2. 5 мг оксида никеля. Обратите внимание на минимальные рассеянные агрегаты коричневого/черного пигмента и связанную с ними лимфоидную гиперплазию. Рисунки 4C–F относятся к 2-летней самке крысы F344, получившей высокую дозу 2,4-диаминофенола-2 HCL. Лимфатический узел поджелудочной железы содержит мелкозернистый коричневый пигмент (рис. 4C-D), который не содержит железа. Предполагается, что этот материал является исходным соединением или его метаболитом. Такой же пигмент присутствовал в собственной пластинке двенадцатиперстной кишки (рис. 4E-F). На рисунках 4G-I представлены изображения бронхиального лимфатического узла 2-летней самки крысы F344, получившей низкую дозу триоксида молибдена.Хотя на этих изображениях трудно увидеть эритроциты, имеется синусовый эритроцитоз, эритрофагоцитоз и внутригистиоцитарные скопления золотисто-коричневого глобулярного пигмента, характерного для гемосидерина.

    Амилоидоз

    Под световым микроскопом и при окраске гематоксилином и эозином амилоид выглядит как аморфный, эозинофильный и гиалинизированный внеклеточный материал. При больших скоплениях амилоид проникает в соседние ткани, вызывая атрофию под давлением. Конго красный является наиболее распространенным красителем, используемым для оценки амилоида, придающим двулучепреломление яблочно-зеленого цвета при поляризации.Амилоидоз встречается у ряда линий мышей и других грызунов, но не наблюдается в лимфатических узлах крыс. Амилоидоз редко встречается у большинства линий мышей, но у мышей CD1, по-видимому, имеется генетическая предрасположенность (Frith and Chandra, 1991). Амилоидоз лимфатических узлов более распространен у самок мышей CD1, и степень амилоидоза увеличивается с возрастом, при этом к 24-месячному возрасту поражается 20–30% лимфатических узлов. У этих мышей отложение амилоида происходит в различных тканях, включая лимфатические узлы.Наиболее часто поражается мезентериальный лимфатический узел, амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла (4). Ранние поражения обычно возникают на периферии узла.

    Это изображения амилоидоза лимфатических узлов у мышей CD1. У этой линии мышей наиболее часто поражается брыжеечный лимфатический узел, а амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах (рис. 5А, стрелки). Фигуры 5В и 5С иллюстрируют характерную гомогенную, аморфную, эозинофильную и внеклеточную природу амилоида с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла.Рисунок 5D иллюстрирует бледную эозинофильную природу амилоида при окрашивании конго красным. Микрофотографии 5A–C предоставлены доктором Майклом Личем. Микрофотография 5D предоставлена ​​Drs. К. Фрит и Дж. Уорд.

    Лимфаденит

    Воспалительные клетки могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих места воспаления, некроза, неоплазии и т. д., или они могут быть результатом введения раздражающего тестируемого соединения. Воспалительные клетки также могут присутствовать в лимфатическом узле в ответ на первичный некроз лимфоцитов. Тип лимфаденита может варьировать в зависимости от провоцирующего фактора (инородное тело, бактерии и т. д.), а ответ может варьировать от острого до гранулематозного (1). При остром лимфадените нейтрофилы и незрелые миелоидные клетки могут быть обнаружены в пазухах и мозговых тяжах. Лимфоидная гиперплазия или атрофия также могут возникать в сочетании с узловым воспалением. Воспалительные инфильтраты следует отличать от состояний экстрамедуллярного кроветворения (ЭМГ) () и гранулоцитарного лейкоза.

    При ЭМГ обычно имеется смесь мегакариоцитов и других гемопоэтических элементов, тогда как при гранулоцитарном лейкозе большое количество незрелых миелоидных клеток с поражением многих органов.Термины «хронический лимфаденит» и «гранулематозный лимфаденит» должны быть зарезервированы для лимфатических узлов с хроническими абсцессами или гранулематозными поражениями, которые частично или полностью стирают нормальную узловую архитектуру, в отличие от повышенного количества гистиоцитов в подкапсульных и медуллярных пазухах (синусовый гистиоцитоз) (синусовый гистиоцитоз). ). Абсцессы могут быть острыми или хроническими и характеризуются центральной областью некроза, связанной преимущественно с нейтрофилами. На более поздних стадиях они окружены разным количеством грануляционной ткани, которая может трансформироваться в волокнистую соединительную ткань (4).Пиогранулематозный лимфаденит характеризуется обилием нейтрофилов и макрофагов, частично или полностью стирающих нормальную узловую архитектуру.

    Гиперплазия лимфоцитов

    Описаны реактивные гиперпластические поражения, включая гиперплазию лимфоцитов, в лимфатических узлах грызунов (Ward, 1990). У нормальных грызунов гиперплазия лимфоцитов может быть выражена в различной степени в зависимости от расположения лимфатического узла, состояния здоровья животного, возраста животного и плоскости разреза узла.Брыжеечные лимфатические узлы, в частности, могут демонстрировать большие различия в степени реактивной гиперплазии лимфоцитов между животными из-за стимуляции антигенами в кишечном тракте. Если предполагается, что увеличение лимфоцитов связано с лечением, то эта потенциальная изменчивость подчеркивает необходимость сравнения с контрольными тканями. Если подозревается эффект, связанный с лечением, может быть проведена расширенная гистопатология, чтобы более четко определить природу и степень этого поражения (Elmore, 2006).

    Лимфоцитарная гиперплазия может поражать как фолликулы, богатые В-клетками, так и паракортикальные клетки, богатые Т-клетками, и может указывать на гуморальный или клеточно-опосредованный ответ соответственно (). Лимфоидная гиперплазия, как правило, представляет собой реактивный или иммунный ответ и не считается предраковым поражением лимфатического узла. Стимулированные (реактивные) фолликулы, также называемые вторичными фолликулами, обычно больше, чем нестимулированные первичные фолликулы, и имеют более бледное окрашивание зародышевого центра с крупными лимфобластами и повышенным количеством апоптотических лимфоцитов и макрофагов с осязаемым телом. Зона мантии, окружающая зародышевый центр, состоит из более темных В-лимфоцитов малого и среднего размера. Гиперплазированные фолликулы идентифицируют по увеличению количества и размера фолликулов и превращению их во вторичные фолликулы. Гиперплазия паракортикального слоя характеризуется увеличением плотности клеток и, в зависимости от степени гиперплазии, увеличением паракортикальной зоны.

    На рисунках 7A и 7B показана лимфоидная гиперплазия с фолликулярным рисунком в нижнечелюстном лимфатическом узле 22-месячной мыши C57bl/6.При малом увеличении (рис. 7А) трудно определить, является ли это случаем пролиферации лимфоцитов или фолликулярной лимфомы. Однако при большем увеличении (рис. 7В) гетерогенный характер пролиферации лимфоцитов указывает скорее на гиперплазию, чем на неоплазию. Внутри фолликулярных зародышевых центров имеются более бледные окрашенные В-лимфобласты (рис. 7В, длинная стрелка), перемежающиеся с более мелкими, более зрелыми лимфоцитами и окруженные ими (рис. 7В, короткая стрелка). Для сравнения, нижнечелюстной лимфатический узел от самки мыши B6C3F1 с лимфомой изображен на рисунке 7C.При большем увеличении (рис. 7D) проиллюстрирована гомогенная природа неопластических лимфоцитов.

    Гиперплазия плазматических клеток

    Количество плазматических клеток обычно увеличивается в ответ на антигенную стимуляцию, которая требует выработки антител. Поэтому гиперплазия В-клеток может происходить одновременно с гиперплазией плазматических клеток. Выраженная гиперплазия плазматических клеток, или плазмоцитоз, часто встречается у грызунов, особенно в подчелюстных лимфатических узлах. Медуллярные тяжи обычно содержат плазматические клетки и их предшественники в качестве доминирующих типов клеток, и эти тяжи являются первичными участками гиперплазии плазматических клеток.В случаях выраженной гиперплазии плазматических клеток узел может быть значительно увеличен, состоять почти полностью из плазматических клеток, демонстрировать частичное стирание нормальной узловой архитектуры, и его может быть трудно отличить от неоплазии. Находками, подтверждающими гиперплазию, являются отсутствие инфильтрации коры и капсулы, атипичные плазматические клетки и метастазы (4). В зависимости от степени и хроничности антигенной стимуляции некоторые плазматические клетки могут содержать тельца Рассела. Предшественники плазматических клеток (иммунобласты или плазмобласты) также могут присутствовать среди более зрелых плазматических клеток.

    Это перипанкреатический лимфатический узел 15-месячной мыши C57bl/6 с выраженной гиперплазией плазматических клеток, затрагивающей медуллярную и паракортикальную области. Хотя имеется заметная инфильтрация медуллярной и паракортикальной областей этой популяцией плазматических клеток, интактная природа фолликулов (рис. 8В, стрелки) и однородная и дифференцированная цитоморфология плазматических клеток (рис. 8С) указывают на то, что это плазматические клетки. гиперплазия, а не неоплазия.

    Гиперплазия макрофагов

    Гиперплазия макрофагов обычно возникает в результате пролиферации резидентных синусоидальных макрофагов (), но также может наблюдаться как скопление макрофагов в любой области лимфатического узла. Скопления макрофагов могут располагаться периферически вокруг паракортикального слоя (1) или внутри кортикальной, паракортикальной и мозговой областей (3). Гиперплазия макрофагов также может быть признаком лимфатических узлов, которые дренируют место нанесения тестируемого препарата (). Конкретные паттерны (внутрисинусоидальный, кортикальный, паракортикальный, медуллярный) гиперплазии макрофагов в одном и том же лимфатическом узле в пределах дозовой группы будут соответствовать эффекту, связанному с лечением.

    На рис. 9А представлен пример брыжеечного лимфатического узла самки мыши B6C3F1, которой вводили высокую дозу 4,4′-тиобис-(6-Т-бутил-М-крезола).Обратите внимание на пролиферацию синусоидальных макрофагов (синусовый гистиоцитоз). Однако скопления макрофагов также можно увидеть в любой области лимфатического узла. На рисунках 9B-D представлены изображения лимфатического узла самца мыши B6C3F1, обработанного дигидратом дихромата натрия, которые иллюстрируют агрегаты макрофагов, расположенные периферически вокруг паракортикального слоя (стрелки). На рисунках 9E-G представлены изображения лимфатического узла двухлетней крысы F344 с скоплениями макрофагов в кортикальной, паракортикальной и медуллярной областях.На рисунках 9H-I представлены изображения мезентериального лимфатического узла 90-дневного самца крысы F344 в субхроническом исследовании elmiron. Эти изображения иллюстрируют пролиферацию макрофагов с вакуолизированной цитоплазмой в медуллярной области. Эти типы гиперплазии могут быть признаком лимфатических узлов, дренирующих место нанесения тестируемого препарата. Конкретные паттерны гиперплазии макрофагов в одном и том же узле в дозовой группе будут согласовываться с эффектом, связанным с лечением. Ингаляционные исследования с частицами могут привести к повышенному скоплению макрофагов в регионарных дренирующих лимфатических узлах.Ингаляционное исследование талька привело к скоплению макрофагов, большинство из которых содержало частицы талька, в перибронхиальной лимфоидной ткани легких, а также в бронхиальных (рис. 9J и 9K) и медиастинальных лимфатических узлах 2-летнего самца крысы F344. Поляризация бронхиального лимфатического узла выявила короткие линейные фрагменты талька в цитоплазме макрофагов (рис. 9L и 9M).

    Пролиферацию (гиперплазию) резидентных макрофагов можно легко спутать с увеличением количества интрасинусоидальных макрофагов, которые проникают через эфферентные лимфатические сосуды, дренирующие область с большим количеством макрофагов.Сравнение поражений в лимфатическом узле с органами и тканями, которые дренирует этот конкретный узел, помогает дифференцировать их. Брыжеечные лимфатические узлы постоянно стимулируются внутрикишечными антигенами и поэтому могут иметь большое количество интрасинусоидальных макрофагов, а также мультифокальные скопления макрофагов в коре и паракортексе. Кроме того, среди животных могут быть значительные индивидуальные различия. Сравнение группы обработанных животных с контрольными животными поможет определить, связано ли это с лечением.Особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, связанным с путем введения тестируемого соединения. Для ингаляционных исследований следует исследовать бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы, а пероральное введение соединений может привести к поражению подчелюстных и мезентериальных лимфатических узлов. Предварительное знание физических и химических свойств испытуемого соединения может помочь идентифицировать фагоцитированный материал испытуемого изделия. Например, нерастворимые твердые частицы могут рассматриваться как внутрицитоплазматический преломляющий материал при поляризации (1).

    Когда гистиоциты встречаются в виде скоплений внутри синусоидов, это обычно называют «синусовым гистиоцитозом». Когда скопления гистиоцитов встречаются в паренхиме лимфатических узлов, термины «гранулематозное воспаление», «гранулематозный лимфаденит», «агрегаты/инфильтраты гистиоцитов» и «скопления/инфильтраты макрофагов» используются взаимозаменяемо. Однако степень накопления макрофагов должна помочь определить, используется ли термин «гранулематозный». Если есть агрегаты гистиоцитов с минимальной или легкой степенью тяжести, то гистиоцитарные или макрофагальные агрегаты/инфильтраты будут подходящими. Если степень тяжести умеренная или отмечается частичное или полное стирание узловой архитектуры, то термин «гранулематозный» будет более подходящим.

    Экстрамедуллярный гемопоэз

    Хотя селезенка является основным местом экстрамедуллярного гемопоэза (ЭМГ) у грызунов, иногда он может присутствовать в лимфатическом узле. ЭМГ обычно является физиологической реакцией на резкую потерю или повышенную потребность в дополнительных клетках крови из-за таких состояний, как кровоизлияние или сильное воспаление.Он характеризуется смесью миелоцитарных, эритроцитарных и мегакариоцитарных клеток и в основном присутствует в мозговых тяжах (4).

    Эти изображения иллюстрируют различные типы ЭМГ, присутствующие в лимфатических узлах грызунов. Фигура 10А представляет собой изображение мезентериального лимфатического узла контрольного самца мыши B6C3F1. На этом изображении с малым увеличением виден синусовый эритроцитоз. Наличие мегакариоцитов (стрелки) указывает на наличие ЭМГ. Это может быть в ответ на хроническую кровопотерю в организме и потребность в дополнительных тромбоцитах. Фигуры 10B и 10C представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, которого лечили высокой дозой N-метилолакриламида. В дополнение к синусовому эритроцитозу стрелка на рисунке 10B и наконечники стрелок на рисунке 10C указывают на мегакариоциты в пазухах. Медуллярные тяжи заполнены миелоидными предшественниками, что свидетельствует о гранулопоэзе (рис. 10С, стрелка). Фигуры 10D и 10E представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1 из контрольной группы.В дополнение к мегакариоцитам в мозговых тяжах и синусах имеются миелоидные и эритроидные предшественники.

    Лимфома и MCL

    Существует множество подклассов лимфомы, включая малые лимфоциты, лимфобластные, плазматические клетки, иммунобластные лимфомы, лимфомы фолликулярного центра и маргинальной зоны. Консенсусная система для классификации лимфоидных новообразований мыши в соответствии с их гистопатологическими и генетическими особенностями была предложена как способ моделирования болезней кроветворения человека у мышей (Morse et al. , 2002). Однако обсуждение и описание каждого типа выходит за рамки данной статьи.

    Лимфома является наиболее распространенным первичным новообразованием, возникающим в лимфатических узлах, и у крыс F344 ее следует отличать от мононуклеарно-клеточного лейкоза (MCL). У мышей B6C3F1 лимфомы часто возникают в брыжеечных лимфатических узлах, селезенке и пейеровых бляшках (Ward et al., 1999). Лимфома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов (4). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (11).При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптозными тельцами, которые представляют собой остатки ядер (1). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию (4). Следует отметить, что лимфоидная ткань часто обнаруживается в перинодальной жировой клетчатке, и ее нельзя рассматривать как неопластическую инвазию без наличия других признаков лимфомы в узле.

    Лимфосаркома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов, как показано в этом лимфатическом узле гемизиготной мыши TGAC (FVB/N) (рис. 11А). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфосаркомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (рис. 11В). При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптотическими тельцами (ядерными остатками) (рис. 11С, стрелки). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию.Однако это также могут быть особенности MCL. На рисунках 11D–H представлены изображения лимфатического узла крысы F344, иллюстрирующие случай MCL с инвазией капсулы (рис. 11D и 11E), инвазией перинодального жира (рис. 11F) и мономорфной популяцией неопластических лимфоцитов (рис. 11G). Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфосаркомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие (рис. 11H), печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.

    Диагностические признаки лимфомы также могут быть признаками MCL. Однако цитоплазма клеток MCL может иметь характерный эозинофильный зернистый вид с окрашиванием гематоксилином и эозином или практически не окрашиваться, а окрашивание ядер может варьироваться от бледного до густобазофильного. Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие, печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.Для получения более подробной информации о MCL обратитесь к статье Suttie (2006).

    Метастатические поражения

    Метастатические поражения в лимфатических узлах могут возникать из неопластических эмболов крови из опухолей, которые не находятся в непосредственной близости от узла. Метастатические неоплазии также могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих область, пораженную опухолью. Таким образом, если метастатическая неоплазия обнаружена в лимфатическом узле, а первичная опухоль еще не идентифицирована, ее локализацию можно определить путем оценки тканей в пределах лимфатического дренирующего поля этого конкретного узла.Хотя это и не исчерпывающий список, в нем перечислены несколько лимфатических узлов и соответствующие метастазы у крыс F344 на основе анатомического расположения и поля дренирования (Stefanski et al., 1990). Подробная информация о расположении специфических лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс и мышей была описана (Tilney, 1971; Sainte-Marie et al., 1982; Van den Broeck et al., 2006). Микрофотографии и описания — иллюстрируют и обсуждают различные метастатические поражения в лимфатических узлах грызунов.

    Метастатические поражения иногда можно обнаружить в лимфатическом узле, дренирующем область, пораженную неоплазией. Фигуры 12А и 12В иллюстрируют нижнечелюстной лимфатический узел крысы F344 со стиранием примерно 80% нормальной архитектуры узла из-за большого метастатического поражения. Имеется компрессия оставшейся нормальной лимфоидной ткани слева от образования (стрелки). При большем увеличении видны островки и трабекулы опухолевых клеток плоского эпителия с образованием эозинофильного кератина (рис. 12С, стрелка).На рис. 12D показано основное место этого новообразования, десна верхней челюсти, которая представляет собой область, дренируемую нижнечелюстным лимфатическим узлом.

    На рисунках 17А и 17В показан лимфатический узел самки мыши B6C3F1 с пластами круглых клеток, стирающих нормальную архитектуру узла. Оценка клеток на периферии поражения выявляет опухолевые клетки с классическими чертами плазматических клеток (эксцентричное ядро ​​и выступающий аппарат Гольджи) (рис. 17С). Плазмоклеточные опухоли могут быть первичными новообразованиями лимфатических узлов или могут быть метастатическими поражениями.У мышей длительная адъювантная стимуляция может привести к развитию опухолей плазматических клеток в брюшине (Potter and Robertson, 1960; McIntire and Princler, 1969). Опухоли плазматических клеток возникают в результате моноклональной пролиферации В-клеток.

    Таблица 1

    Лимфатические узлы и соответствующие метастазы.

    Гистопатология лимфатических узлов

    Abstract

    Лимфатические узлы функционируют как фильтры тканей и тканевой жидкости и являются местом происхождения и продукции лимфоцитов для нормальных физиологических функций.В рамках этой нормальной функции они реагируют как на эндогенные, так и на экзогенные вещества множеством специфических морфологических и функциональных реакций. Поражения могут быть как пролиферативными, так и непролиферативными, и могут быть связаны с лечением или нет. Гистологическая оценка лимфатических узлов необходима для понимания иммунотоксического действия химических веществ, а полученные данные являются важным компонентом оценки риска для человека. Перед патологоанатомом-токсикологом стоит задача интерпретировать данные патологии в рамках полной клинической оценки всего животного. Ежедневные травмы, старение и токсины могут изменить нормальную гистологию и основную функцию лимфатических узлов. Поэтому важно различать и дифференцировать поражения, возникающие естественным образом во время нормального развития и старения, от тех, которые индуцируются ксенобиотиками. Для достижения этой цели решающее значение имеет сравнение с контролем, соответствующим возрасту и полу.

    Ключевые слова: Лимфатический узел, иммунотоксичность, ксенобиотик, гиперплазия, ангиэктазия, лимфома

    Введение

    Лимфатические узлы представляют собой организованные лимфоидные органы, содержащие лимфоциты в тонкой ретикулярной строме.Структуры внутри лимфатического узла включают капсулу, подкапсульный синус, кору (зона В-клеток с фолликулами и зародышевыми центрами), паракортекс (зона Т-клеток), мозговые синусы, мозговые тяжи и ворота. Чтобы убедиться, что все эти компоненты оценены, особое внимание следует уделить сбору и ориентации тканей. Лимфатические узлы следует регулярно исследовать макроскопически и под микроскопом, поскольку они могут отражать поражения органов и тканей, которые они дренируют. Более того, особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, которые с большей вероятностью будут подвергаться воздействию тестируемого соединения (Haley et al., 2005; Ruehl-Fehlert и др., 2005). Бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы следует исследовать на наличие соединений, вводимых путем ингаляции, тогда как соединения, вводимые перорально, скорее всего повлияют на нижнечелюстные (поверхностные шейные) и мезентериальные лимфатические узлы. При кожном или подкожном воздействии следует исследовать самый проксимальный дренирующий периферический узел или узлы (ушные, подмышечные, паховые и подколенные).

    Следует также учитывать диапазон нормальных гистологических данных в пределах групп лимфатических узлов, обусловленных нормальными иммунными функциями.Например, синусовый гистиоцитоз является нормальным явлением в брыжеечных лимфатических узлах, а макрофаги могут содержать эндогенный пигмент (гемосидерин, липофусцин) или экзогенный пигмент, отражающий поглощение антигена из пищеварительного тракта. Нижнечелюстные лимфатические узлы подвергаются воздействию антигенов из ротоглоточной области и обычно имеют хорошо развитые вторичные фолликулы и значительное количество плазматических клеток в мозговых тяжах. Для системных эффектов соединений исследование лимфатических узлов, удаленных от места нанесения, может предоставить дополнительную информацию.Если не дренировать место нанесения, подколенные и подмышечные лимфатические узлы часто не стимулируются и могут дать информацию о состоянии лимфатического узла в состоянии покоя. Однако эти лимфатические узлы могут быть очень вариабельными, маленькими и их трудно адекватно брать. Также полезно знать об областях, дренируемых конкретными узлами, для определения происхождения метастатических новообразований. Подробная информация о расположении конкретных лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс описана Tilney (1971) и Sainte-Marie et al.(1982). Информация об анатомии и номенклатуре мышиных лимфатических узлов предоставлена ​​Van den Broeck et al. (2006). Наконец, тщательное и подробное исследование лимфатических узлов может дать ценные сведения о возможном механизме действия исследуемого материала. Подробное описание нормальной структуры, функции и гистологии лимфатического узла см. в статье Willard-Mack (2006). Подробную информацию о расширенной гистопатологической оценке лимфатического узла см. в статье Elmore (2006).Следующие рисунки и описания иллюстрируют и обсуждают некоторые типичные поражения, наблюдаемые в лимфатических узлах.

    Лимфоидный некроз

    Лимфоидный некроз может быть фокальным, многоочаговым или диффузным в пределах лимфатического узла, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного некроза между лимфатическими узлами у одного и того же животного в зависимости от провоцирующего фактора и эффективности иммунный ответ. Некроз лимфоцитов характеризуется набуханием клеток со слипанием хроматина, кариорексисом или кариолизисом, а при более тяжелых поражениях — обильным эозинофильным клеточным детритом (1). Некроз часто сопровождается воспалительными клетками, включая нейтрофилы и фагоцитирующие макрофаги с внутрицитоплазматическим клеточным детритом (1). Эту форму некроза следует отличать от апоптоза, при котором происходит гибель отдельных клеток, характеризующаяся сморщиванием клеток, ядерным пикнозом и фрагментацией с апоптотическими тельцами и макрофагами с осязаемыми тельцами. Этот тип гибели клеток обычно происходит в зародышевых центрах вторичных фолликулов, где он является важным гомеостатическим механизмом.Апоптоз также может быть вызван различными повреждающими стимулами при введении в низких дозах, но эти же стимулы могут вызывать некроз при более высоких дозах. Примерами являются тепло, облучение, гипоксия и цитотоксические противораковые препараты (например, циклофосфамид). Дексаметазон, глюкокортикоид, также может вызывать апоптоз лимфоцитов в лимфатических узлах, но тимус является более чувствительным органом (Elmore, 2006).

    На рисунках 1A–E показаны нижнечелюстные лимфатические узлы самца яванского макака, получившего тестируемое изделие в ходе четырехнедельного исследования через желудочный зонд с 4-недельным периодом восстановления. На рисунках 1А-С показан лимфоидный некроз коры и областей паракортикального и мозгового вещества. Области некроза эозинофильны при малом увеличении (рис. 1А-В). При большем увеличении (рис. 1С) можно увидеть потерю лимфоцитов в сочетании с эозинофильным клеточным детритом и темным пикнотическим ядерным детритом. Макрофаги являются преобладающими воспалительными клетками в этой области. Рисунок 1D и более высокое увеличение на рисунке 1E относятся к другой области одного и того же лимфатического узла с более сильной воспалительной реакцией, преимущественно нейтрофилами.На рисунках 1F и 1G представлены увеличенные изображения медиастинального лимфатического узла 90-дневной самки крысы F344, обработанной высокой дозой уретана, при малом и большом увеличении. Имеется умеренное лимфоидное истощение, характеризующееся уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием, а также истощением паракортикальных лимфоцитов. При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными, как показано стрелкой на рисунке 1G. Микрофотографии 1A–E предоставлены Drs.Ханс Харлеман и Кэтрин Бовенкамп.

    Лимфоидное истощение или атрофия являются следствием хронического некроза или апоптоза. Это может произойти в любом лимфатическом узле, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного истощения между лимфатическими узлами у одного и того же животного. Лимфоидное истощение обычно характеризуется уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием и/или истощением паракортикальных лимфоцитов (11). При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными (1).

    Массивный некроз лимфатических узлов встречается редко и может быть вызван обструкцией кровотока (инфарктом). Это поражение характеризуется диффузным коагуляционным некрозом с потерей клеточных ядер, но на ранней стадии с хорошо сохранившимися контурами клеток. Казеозный некроз также является необычным поражением, но может быть вызван инфекцией туберкулезными организмами и грибками у нечеловекообразных приматов. Его также можно увидеть в очагах быстро растущих новообразований. Макроскопически имеется полутвердая ткань от серого до бледно-желтого цвета.Микроскопически имеется аморфная масса зернистого эозинофильного материала без клеточных очертаний, а также без идентифицируемых ядер.

    Эктазия лимфатических синусов

    Эктазия лимфатических синусов может поражать как мозговые, так и субкапсулярные пазухи. Диффузная эктазия синуса обычно связана с лимфоидной атрофией. Это поражение можно обнаружить у контрольных животных, особенно в брыжеечных и медиастинальных лимфатических узлах стареющих мышей. является примером эктазии медуллярного синуса. Это поражение характеризуется наличием расширенных или кистозных синусов, выстланных лимфэндотелием и заполненных бледным эозинофильным/амфофильным материалом (предположительно лимфой), которые имеют тонкий кружевной вид (4).В лимфе можно найти небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Это пример эктазии мозгового синуса у контрольной 2-летней самки крысы F344. На изображении с малым увеличением показан большой эктатический мозговой синус (рис. 2А). При большем увеличении можно визуализировать лимфэндотелий, выстилающий пазуху (стрелка, рис. 2В). Бледная эозинофильная лимфа, заполняющая расширенный синус, имеет тонкий кружевной вид (рис. 2В). Иногда в лимфе можно обнаружить небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Синонимами этого поражения являются лимфангиэктазия, лимфатические кисты, кистозно-лимфатическая эктазия и дилатация синуса. Группа патологоанатомов, связанных с Национальной токсикологической программой, была опрошена на предмет предпочтительной терминологии для этого поражения. Двумя предпочтительными терминами были «эктазия лимфатического синуса» и «лимфангиэктазия». Лимфатическая эктазия синуса более четко определяет локализацию поражения.

    Сосудистые поражения

    При определении сосудистых поражений в лимфатических узлах можно использовать различные термины, каждая из которых имеет очень конкретное определение. Ангиэктазия определяется в Медицинском словаре Дорланда как «аномальное, обычно грубое расширение и часто удлинение кровеносного или лимфатического сосуда», а его синонимами являются гемангиэктазия, гемангиэктазия, вазодилатация и вазодилатация. В лимфатических узлах ангиэктазия кровеносных сосудов характеризуется расширением и гиперемией тонких вен в коре, мозговом веществе, капсуле, воротах или окружающей соединительной ткани. Ангиэктазии чаще всего наблюдаются в брыжеечных лимфатических узлах крыс и мышей, включая штамм B6C3F1, и могут сопровождаться или не сопровождаться кровоизлиянием (Ward et al., 1999). Это поражение можно отличить от гематомы по наличию клеток эндотелиальной выстилки и от ранней гемангиомы по отсутствию крупных опухолевых эндотелиальных клеток.

    Внутрисинусоидальные эритроциты (синусовый эритроцитоз) могут возникать в результате дренирования лимфатическим узлом области кровоизлияния. Это также может быть артефактом, возникающим в результате эвтаназии или рассечения тканей во время вскрытия, особенно в бронхиальных или медиастинальных лимфатических узлах. Обрезание и срез ткани лимфатических узлов также может привести к удалению эритроцитов из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем могут появиться в синусоидах или в перинодальной области (4).Лимфатические узлы, дренирующие места кровоизлияния, также могут иметь интрасинусоидальные эритроциты, но, в зависимости от хронизации, они могут сопровождаться различным количеством гемосидерин-нагруженных макрофагов, эритрофагоцитозом и воспалительными клетками (4).

    На рисунках 3A и 3B представлены изображения бронхиального лимфатического узла контрольной 3-месячной крысы Sprague-Dawley. Обрезка и разрез этой ткани вытеснили эритроциты из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем появились в синусоидах (рис. 3А, короткая стрелка и рис. 3В) и в перинодальной области (рис. 3А, длинная стрелка).Фигуры 3C и 3D представляют собой изображения медиастинального лимфатического узла 3-месячной крысы Wistar с очагом легочного кровотечения. В этом случае на хронический характер поражения указывает наличие эритрофагоцитоза и гемосидерин-нагруженных макрофагов (рис. 3D). На рисунках 3E–H представлены изображения лимфатических узлов мышей с расширенными сосудистыми пространствами, заполненными эритроцитами. В этом случае трудно отличить ангиэктазию лимфатических узлов от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды могут напоминать расширенные кровеносные сосуды.Оба они выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. Оценка других систем органов на наличие гиперемии и поиск областей кровоизлияния в дренажном поле может помочь более четко определить это поражение. На рисунках 3I–L представлены изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, получавшего высокую дозу N-метилолакриламида. Этот лимфатический узел имеет ряд поражений, которые включают узловые и перинодальные ангиэктазии с гиперемией (рис. 3I-K), синусовый эритроцитоз (рис. 3I-J), пролиферацию перинодальных сосудов с ангиоэктазиями и гиперемией (рис. 3K) и кровоизлияние в узловую паренхиму (рис. 3I-K). Рисунок 3L).На рисунках 3M-P представлены изображения мезентериальных лимфатических узлов двух самцов мышей B6C3F1 в возрасте 24 месяцев, которым вводили высокую дозу метилимидазола. В обоих лимфатических узлах имеются заполненные кровью сосудистые пространства (кровеносные и/или лимфатические сосуды). Также имеются застойные артериолы в окружающей ткани одного лимфатического узла (рис. 3М) и периваскулярное кровоизлияние, связанное с артериолой в перинодальной жировой ткани другого лимфатического узла (рис. 30-Р). Микрофотографии на рисунках 3E и 3F предоставлены Drs.К. Фрит и Дж. Уорд. Рисунки 3G и 3H. Микрофотографии предоставлены доктором Майклом Личем.

    Поражения сосудов лимфатических узлов трудно отличить от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные кровеносные сосуды могут напоминать расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды. Оба выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. При попытке решить эту проблему можно применить более целостный диагностический подход. Например, оценка застойных явлений в других системах органов может исключить наличие или отсутствие застоя кровеносных сосудов в качестве возможного диагноза.Обследование участков кровоизлияний в области дренажа узла может помочь исключить/исключить синусовый эритроцитоз. являются примерами заполненных кровью сосудистых пространств, которые требуют такого целостного подхода для более четкого определения поражения.

    Широкий спектр сосудистых поражений у леченных животных может включать застой синуса, синусовый эритроцитоз, узловую и перинодальную ангиэктазию с застоем, кровоизлияние в узловую паренхиму, перинодальную пролиферацию сосудов и периваскулярное кровоизлияние ().Диагноз связанных с лечением сосудистых поражений в лимфатических узлах следует ставить с учетом общего состояния здоровья животного и наличия или отсутствия сосудистых поражений в других органах и тканях. Обзор терминологии поражения двух лимфатических узлов был получен от группы патологоанатомов. Без каких-либо предварительных знаний о связанных с лечением поражениях и патогенезе поражений лимфатических узлов у этих мышей возникли разногласия относительно наиболее подходящей терминологии. Синусовый эритроцитоз и гиперемия стали двумя предпочтительными терминами.Однако большинство согласились с тем, что для постановки точного диагноза необходима информация о других органах, потенциальных участках кровоизлияния в дренажном поле и времени от смерти до вскрытия.

    Телеангиэктазия и ангиоматоз — это два термина, которые обычно не используются для определения сосудистых эктазий в лимфатических узлах грызунов, поскольку в медицине эти термины используются для обозначения неопластических поражений. Телеангиэктазия определяется как «аномальное расширение капилляров и артериол, которое часто образует ангиому», а ангиоматоз определяется как «заболевание сосудов с образованием множественных ангиом».Ангиома считается опухолью, состоящей преимущественно из кровеносных или лимфатических сосудов. Однако, когда в лимфатическом узле присутствуют наполненные кровью сосуды, важно отличать их от сосудистых опухолей, таких как гемангиомы и гемангиосаркомы.

    Пигмент

    Пигмент часто обнаруживается в цитоплазме синусоидных макрофагов как у контрольных, так и у обработанных животных. Наиболее распространенными пигментами являются гемосидерин и цероид/липофузин. Гемосидерин представляет собой железосодержащий зернистый материал золотисто-коричневого цвета, и макрофаги, содержащие этот пигмент, скорее всего, обнаруживаются в мозговых тяжах и лимфатических синусах лимфоузлов с синусовым эритроцитозом.Липофусцин также представляет собой мелкозернистый пигмент золотисто-коричневого цвета, но он образуется в основном из продуктов распада липидов, обычно тех, которые образуются из клеточных мембран. Цероид представляет собой вариант липофусцина, обладающий кислотоустойчивостью и аутофлуоресценцией. Количество макрофагов, содержащих гемосидерин или цероид/липофусцин, может быть увеличено при сопутствующей гиперплазии макрофагов в узлах, дренирующих различные поражения (воспалительные, некротические, неопластические и т. д.). Эти пигменты трудно отличить друг от друга с помощью обычного окрашивания гематоксилином и эозином.Чтобы различить их, можно использовать окраску железом (окраска железом Перла, реакция берлинской лазури) для окрашивания гемосидериновым синим. Для идентификации цероида/липофусцина можно использовать различные красители и методы, в том числе суданский черный В, реакцию Шморля, масляный красный О, карбол-липофусцин, окрашивание периодической кислотой-Шиффом, кислотно-устойчивое окрашивание Циля-Нильсена, автофлуоресценцию или лизосомально-кислотную фосфатазу и эстеразу. пятна. Меланин — еще один эндогенный пигмент, который можно найти в лимфатических узлах. Это нормальное явление для чернокожих мышей и не считается поражением.Для положительной идентификации меланина можно использовать метод Шморля, при котором гранулы меланина окрашиваются в сине-зеленый цвет. ДОФА-оксидаза представляет собой ферментный гистохимический метод, который также можно использовать и который очень специфичен для меланина.

    Различные вдыхаемые, проглатываемые, инъекционные и местные химические вещества могут вызывать синусовый гистиоцитоз в ассоциированных лимфатических узлах с макрофагами, содержащими инертное или нерастворимое пигментированное тестируемое вещество (Goginpath et al. , 1987). Пигмент татуировки на хвосте, инертный и неполяризуемый, иногда можно обнаружить в виде скоплений разбросанного коричневого/черного материала в лимфатических узлах, прилегающих к татуировке.Регионарные лимфатические узлы, дренирующие места нанесения испытуемого препарата, всегда следует проверять на наличие экзогенных пигментов (), но исходное соединение или его метаболит иногда могут локализоваться в определенных тканях организма ().

    На рисунках 4A и 4B представлены изображения нижнего и верхнего медиастинального лимфатического узла самца крысы F344, обработанного 2,5 мг оксида никеля. Обратите внимание на минимальные рассеянные агрегаты коричневого/черного пигмента и связанную с ними лимфоидную гиперплазию. Рисунки 4C–F относятся к 2-летней самке крысы F344, получившей высокую дозу 2,4-диаминофенола-2 HCL.Лимфатический узел поджелудочной железы содержит мелкозернистый коричневый пигмент (рис. 4C-D), который не содержит железа. Предполагается, что этот материал является исходным соединением или его метаболитом. Такой же пигмент присутствовал в собственной пластинке двенадцатиперстной кишки (рис. 4E-F). На рисунках 4G-I представлены изображения бронхиального лимфатического узла 2-летней самки крысы F344, получившей низкую дозу триоксида молибдена. Хотя на этих изображениях трудно увидеть эритроциты, имеется синусовый эритроцитоз, эритрофагоцитоз и внутригистиоцитарные скопления золотисто-коричневого глобулярного пигмента, характерного для гемосидерина.

    Амилоидоз

    Под световым микроскопом и при окраске гематоксилином и эозином амилоид выглядит как аморфный, эозинофильный и гиалинизированный внеклеточный материал. При больших скоплениях амилоид проникает в соседние ткани, вызывая атрофию под давлением. Конго красный является наиболее распространенным красителем, используемым для оценки амилоида, придающим двулучепреломление яблочно-зеленого цвета при поляризации. Амилоидоз встречается у ряда линий мышей и других грызунов, но не наблюдается в лимфатических узлах крыс.Амилоидоз редко встречается у большинства линий мышей, но у мышей CD1, по-видимому, имеется генетическая предрасположенность (Frith and Chandra, 1991). Амилоидоз лимфатических узлов более распространен у самок мышей CD1, и степень амилоидоза увеличивается с возрастом, при этом к 24-месячному возрасту поражается 20–30% лимфатических узлов. У этих мышей отложение амилоида происходит в различных тканях, включая лимфатические узлы. Наиболее часто поражается мезентериальный лимфатический узел, амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла (4).Ранние поражения обычно возникают на периферии узла.

    Это изображения амилоидоза лимфатических узлов у мышей CD1. У этой линии мышей наиболее часто поражается брыжеечный лимфатический узел, а амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах (рис. 5А, стрелки). Фигуры 5В и 5С иллюстрируют характерную гомогенную, аморфную, эозинофильную и внеклеточную природу амилоида с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла. Рисунок 5D иллюстрирует бледную эозинофильную природу амилоида при окрашивании конго красным. Микрофотографии 5A–C предоставлены доктором Майклом Личем. Микрофотография 5D предоставлена ​​Drs. К. Фрит и Дж. Уорд.

    Лимфаденит

    Воспалительные клетки могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих места воспаления, некроза, неоплазии и т. д., или они могут быть результатом введения раздражающего тестируемого соединения. Воспалительные клетки также могут присутствовать в лимфатическом узле в ответ на первичный некроз лимфоцитов. Тип лимфаденита может варьировать в зависимости от провоцирующего фактора (инородное тело, бактерии и др.).) и ответ может варьироваться от острого до гранулематозного (). При остром лимфадените нейтрофилы и незрелые миелоидные клетки могут быть обнаружены в пазухах и мозговых тяжах. Лимфоидная гиперплазия или атрофия также могут возникать в сочетании с узловым воспалением. Воспалительные инфильтраты следует отличать от состояний экстрамедуллярного кроветворения (ЭМГ) () и гранулоцитарного лейкоза.

    При ЭМГ обычно имеется смесь мегакариоцитов и других гемопоэтических элементов, тогда как при гранулоцитарном лейкозе большое количество незрелых миелоидных клеток с поражением многих органов. Термины «хронический лимфаденит» и «гранулематозный лимфаденит» должны быть зарезервированы для лимфатических узлов с хроническими абсцессами или гранулематозными поражениями, которые частично или полностью стирают нормальную узловую архитектуру, в отличие от повышенного количества гистиоцитов в подкапсульных и медуллярных пазухах (синусовый гистиоцитоз) (синусовый гистиоцитоз). ). Абсцессы могут быть острыми или хроническими и характеризуются центральной областью некроза, связанной преимущественно с нейтрофилами. На более поздних стадиях они окружены разным количеством грануляционной ткани, которая может трансформироваться в волокнистую соединительную ткань (4).Пиогранулематозный лимфаденит характеризуется обилием нейтрофилов и макрофагов, частично или полностью стирающих нормальную узловую архитектуру.

    Гиперплазия лимфоцитов

    Описаны реактивные гиперпластические поражения, включая гиперплазию лимфоцитов, в лимфатических узлах грызунов (Ward, 1990). У нормальных грызунов гиперплазия лимфоцитов может быть выражена в различной степени в зависимости от расположения лимфатического узла, состояния здоровья животного, возраста животного и плоскости разреза узла. Брыжеечные лимфатические узлы, в частности, могут демонстрировать большие различия в степени реактивной гиперплазии лимфоцитов между животными из-за стимуляции антигенами в кишечном тракте. Если предполагается, что увеличение лимфоцитов связано с лечением, то эта потенциальная изменчивость подчеркивает необходимость сравнения с контрольными тканями. Если подозревается эффект, связанный с лечением, может быть проведена расширенная гистопатология, чтобы более четко определить природу и степень этого поражения (Elmore, 2006).

    Лимфоцитарная гиперплазия может поражать как фолликулы, богатые В-клетками, так и паракортикальные клетки, богатые Т-клетками, и может указывать на гуморальный или клеточно-опосредованный ответ соответственно (). Лимфоидная гиперплазия, как правило, представляет собой реактивный или иммунный ответ и не считается предраковым поражением лимфатического узла. Стимулированные (реактивные) фолликулы, также называемые вторичными фолликулами, обычно больше, чем нестимулированные первичные фолликулы, и имеют более бледное окрашивание зародышевого центра с крупными лимфобластами и повышенным количеством апоптотических лимфоцитов и макрофагов с осязаемым телом. Зона мантии, окружающая зародышевый центр, состоит из более темных В-лимфоцитов малого и среднего размера. Гиперплазированные фолликулы идентифицируют по увеличению количества и размера фолликулов и превращению их во вторичные фолликулы. Гиперплазия паракортикального слоя характеризуется увеличением плотности клеток и, в зависимости от степени гиперплазии, увеличением паракортикальной зоны.

    На рисунках 7A и 7B показана лимфоидная гиперплазия с фолликулярным рисунком в нижнечелюстном лимфатическом узле 22-месячной мыши C57bl/6.При малом увеличении (рис. 7А) трудно определить, является ли это случаем пролиферации лимфоцитов или фолликулярной лимфомы. Однако при большем увеличении (рис. 7В) гетерогенный характер пролиферации лимфоцитов указывает скорее на гиперплазию, чем на неоплазию. Внутри фолликулярных зародышевых центров имеются более бледные окрашенные В-лимфобласты (рис. 7В, длинная стрелка), перемежающиеся с более мелкими, более зрелыми лимфоцитами и окруженные ими (рис. 7В, короткая стрелка). Для сравнения, нижнечелюстной лимфатический узел от самки мыши B6C3F1 с лимфомой изображен на рисунке 7C.При большем увеличении (рис. 7D) проиллюстрирована гомогенная природа неопластических лимфоцитов.

    Гиперплазия плазматических клеток

    Количество плазматических клеток обычно увеличивается в ответ на антигенную стимуляцию, которая требует выработки антител. Поэтому гиперплазия В-клеток может происходить одновременно с гиперплазией плазматических клеток. Выраженная гиперплазия плазматических клеток, или плазмоцитоз, часто встречается у грызунов, особенно в подчелюстных лимфатических узлах. Медуллярные тяжи обычно содержат плазматические клетки и их предшественники в качестве доминирующих типов клеток, и эти тяжи являются первичными участками гиперплазии плазматических клеток.В случаях выраженной гиперплазии плазматических клеток узел может быть значительно увеличен, состоять почти полностью из плазматических клеток, демонстрировать частичное стирание нормальной узловой архитектуры, и его может быть трудно отличить от неоплазии. Находками, подтверждающими гиперплазию, являются отсутствие инфильтрации коры и капсулы, атипичные плазматические клетки и метастазы (4). В зависимости от степени и хроничности антигенной стимуляции некоторые плазматические клетки могут содержать тельца Рассела. Предшественники плазматических клеток (иммунобласты или плазмобласты) также могут присутствовать среди более зрелых плазматических клеток.

    Это перипанкреатический лимфатический узел 15-месячной мыши C57bl/6 с выраженной гиперплазией плазматических клеток, затрагивающей медуллярную и паракортикальную области. Хотя имеется заметная инфильтрация медуллярной и паракортикальной областей этой популяцией плазматических клеток, интактная природа фолликулов (рис. 8В, стрелки) и однородная и дифференцированная цитоморфология плазматических клеток (рис. 8С) указывают на то, что это плазматические клетки. гиперплазия, а не неоплазия.

    Гиперплазия макрофагов

    Гиперплазия макрофагов обычно возникает в результате пролиферации резидентных синусоидальных макрофагов (), но также может наблюдаться как скопление макрофагов в любой области лимфатического узла. Скопления макрофагов могут располагаться периферически вокруг паракортикального слоя (1) или внутри кортикальной, паракортикальной и мозговой областей (3). Гиперплазия макрофагов также может быть признаком лимфатических узлов, которые дренируют место нанесения тестируемого препарата (). Конкретные паттерны (внутрисинусоидальный, кортикальный, паракортикальный, медуллярный) гиперплазии макрофагов в одном и том же лимфатическом узле в пределах дозовой группы будут соответствовать эффекту, связанному с лечением.

    На рис. 9А представлен пример брыжеечного лимфатического узла самки мыши B6C3F1, которой вводили высокую дозу 4,4′-тиобис-(6-Т-бутил-М-крезола).Обратите внимание на пролиферацию синусоидальных макрофагов (синусовый гистиоцитоз). Однако скопления макрофагов также можно увидеть в любой области лимфатического узла. На рисунках 9B-D представлены изображения лимфатического узла самца мыши B6C3F1, обработанного дигидратом дихромата натрия, которые иллюстрируют агрегаты макрофагов, расположенные периферически вокруг паракортикального слоя (стрелки). На рисунках 9E-G представлены изображения лимфатического узла двухлетней крысы F344 с скоплениями макрофагов в кортикальной, паракортикальной и медуллярной областях.На рисунках 9H-I представлены изображения мезентериального лимфатического узла 90-дневного самца крысы F344 в субхроническом исследовании elmiron. Эти изображения иллюстрируют пролиферацию макрофагов с вакуолизированной цитоплазмой в медуллярной области. Эти типы гиперплазии могут быть признаком лимфатических узлов, дренирующих место нанесения тестируемого препарата. Конкретные паттерны гиперплазии макрофагов в одном и том же узле в дозовой группе будут согласовываться с эффектом, связанным с лечением. Ингаляционные исследования с частицами могут привести к повышенному скоплению макрофагов в регионарных дренирующих лимфатических узлах.Ингаляционное исследование талька привело к скоплению макрофагов, большинство из которых содержало частицы талька, в перибронхиальной лимфоидной ткани легких, а также в бронхиальных (рис. 9J и 9K) и медиастинальных лимфатических узлах 2-летнего самца крысы F344. Поляризация бронхиального лимфатического узла выявила короткие линейные фрагменты талька в цитоплазме макрофагов (рис. 9L и 9M).

    Пролиферацию (гиперплазию) резидентных макрофагов можно легко спутать с увеличением количества интрасинусоидальных макрофагов, которые проникают через эфферентные лимфатические сосуды, дренирующие область с большим количеством макрофагов.Сравнение поражений в лимфатическом узле с органами и тканями, которые дренирует этот конкретный узел, помогает дифференцировать их. Брыжеечные лимфатические узлы постоянно стимулируются внутрикишечными антигенами и поэтому могут иметь большое количество интрасинусоидальных макрофагов, а также мультифокальные скопления макрофагов в коре и паракортексе. Кроме того, среди животных могут быть значительные индивидуальные различия. Сравнение группы обработанных животных с контрольными животными поможет определить, связано ли это с лечением.Особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, связанным с путем введения тестируемого соединения. Для ингаляционных исследований следует исследовать бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы, а пероральное введение соединений может привести к поражению подчелюстных и мезентериальных лимфатических узлов. Предварительное знание физических и химических свойств испытуемого соединения может помочь идентифицировать фагоцитированный материал испытуемого изделия. Например, нерастворимые твердые частицы могут рассматриваться как внутрицитоплазматический преломляющий материал при поляризации (1).

    Когда гистиоциты встречаются в виде скоплений внутри синусоидов, это обычно называют «синусовым гистиоцитозом». Когда скопления гистиоцитов встречаются в паренхиме лимфатических узлов, термины «гранулематозное воспаление», «гранулематозный лимфаденит», «агрегаты/инфильтраты гистиоцитов» и «скопления/инфильтраты макрофагов» используются взаимозаменяемо. Однако степень накопления макрофагов должна помочь определить, используется ли термин «гранулематозный». Если есть агрегаты гистиоцитов с минимальной или легкой степенью тяжести, то гистиоцитарные или макрофагальные агрегаты/инфильтраты будут подходящими.Если степень тяжести умеренная или отмечается частичное или полное стирание узловой архитектуры, то термин «гранулематозный» будет более подходящим.

    Экстрамедуллярный гемопоэз

    Хотя селезенка является основным местом экстрамедуллярного гемопоэза (ЭМГ) у грызунов, иногда он может присутствовать в лимфатическом узле. ЭМГ обычно является физиологической реакцией на резкую потерю или повышенную потребность в дополнительных клетках крови из-за таких состояний, как кровоизлияние или сильное воспаление.Он характеризуется смесью миелоцитарных, эритроцитарных и мегакариоцитарных клеток и в основном присутствует в мозговых тяжах (4).

    Эти изображения иллюстрируют различные типы ЭМГ, присутствующие в лимфатических узлах грызунов. Фигура 10А представляет собой изображение мезентериального лимфатического узла контрольного самца мыши B6C3F1. На этом изображении с малым увеличением виден синусовый эритроцитоз. Наличие мегакариоцитов (стрелки) указывает на наличие ЭМГ. Это может быть в ответ на хроническую кровопотерю в организме и потребность в дополнительных тромбоцитах.Фигуры 10B и 10C представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, которого лечили высокой дозой N-метилолакриламида. В дополнение к синусовому эритроцитозу стрелка на рисунке 10B и наконечники стрелок на рисунке 10C указывают на мегакариоциты в пазухах. Медуллярные тяжи заполнены миелоидными предшественниками, что свидетельствует о гранулопоэзе (рис. 10С, стрелка). Фигуры 10D и 10E представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1 из контрольной группы.В дополнение к мегакариоцитам в мозговых тяжах и синусах имеются миелоидные и эритроидные предшественники.

    Лимфома и MCL

    Существует множество подклассов лимфомы, включая малые лимфоциты, лимфобластные, плазматические клетки, иммунобластные лимфомы, лимфомы фолликулярного центра и маргинальной зоны. Консенсусная система для классификации лимфоидных новообразований мыши в соответствии с их гистопатологическими и генетическими особенностями была предложена как способ моделирования болезней кроветворения человека у мышей (Morse et al., 2002). Однако обсуждение и описание каждого типа выходит за рамки данной статьи.

    Лимфома является наиболее распространенным первичным новообразованием, возникающим в лимфатических узлах, и у крыс F344 ее следует отличать от мононуклеарно-клеточного лейкоза (MCL). У мышей B6C3F1 лимфомы часто возникают в брыжеечных лимфатических узлах, селезенке и пейеровых бляшках (Ward et al., 1999). Лимфома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов (4). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (11).При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптозными тельцами, которые представляют собой остатки ядер (1). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию (4). Следует отметить, что лимфоидная ткань часто обнаруживается в перинодальной жировой клетчатке, и ее нельзя рассматривать как неопластическую инвазию без наличия других признаков лимфомы в узле.

    Лимфосаркома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов, как показано в этом лимфатическом узле гемизиготной мыши TGAC (FVB/N) (рис. 11А). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфосаркомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (рис. 11В). При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптотическими тельцами (ядерными остатками) (рис. 11С, стрелки). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию.Однако это также могут быть особенности MCL. На рисунках 11D–H представлены изображения лимфатического узла крысы F344, иллюстрирующие случай MCL с инвазией капсулы (рис. 11D и 11E), инвазией перинодального жира (рис. 11F) и мономорфной популяцией неопластических лимфоцитов (рис. 11G). Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфосаркомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие (рис. 11H), печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.

    Диагностические признаки лимфомы также могут быть признаками MCL. Однако цитоплазма клеток MCL может иметь характерный эозинофильный зернистый вид с окрашиванием гематоксилином и эозином или практически не окрашиваться, а окрашивание ядер может варьироваться от бледного до густобазофильного. Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие, печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.Для получения более подробной информации о MCL обратитесь к статье Suttie (2006).

    Метастатические поражения

    Метастатические поражения в лимфатических узлах могут возникать из неопластических эмболов крови из опухолей, которые не находятся в непосредственной близости от узла. Метастатические неоплазии также могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих область, пораженную опухолью. Таким образом, если метастатическая неоплазия обнаружена в лимфатическом узле, а первичная опухоль еще не идентифицирована, ее локализацию можно определить путем оценки тканей в пределах лимфатического дренирующего поля этого конкретного узла.Хотя это и не исчерпывающий список, в нем перечислены несколько лимфатических узлов и соответствующие метастазы у крыс F344 на основе анатомического расположения и поля дренирования (Stefanski et al., 1990). Подробная информация о расположении специфических лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс и мышей была описана (Tilney, 1971; Sainte-Marie et al., 1982; Van den Broeck et al., 2006). Микрофотографии и описания — иллюстрируют и обсуждают различные метастатические поражения в лимфатических узлах грызунов.

    Метастатические поражения иногда можно обнаружить в лимфатическом узле, дренирующем область, пораженную неоплазией. Фигуры 12А и 12В иллюстрируют нижнечелюстной лимфатический узел крысы F344 со стиранием примерно 80% нормальной архитектуры узла из-за большого метастатического поражения. Имеется компрессия оставшейся нормальной лимфоидной ткани слева от образования (стрелки). При большем увеличении видны островки и трабекулы опухолевых клеток плоского эпителия с образованием эозинофильного кератина (рис. 12С, стрелка).На рис. 12D показано основное место этого новообразования, десна верхней челюсти, которая представляет собой область, дренируемую нижнечелюстным лимфатическим узлом.

    На рисунках 17А и 17В показан лимфатический узел самки мыши B6C3F1 с пластами круглых клеток, стирающих нормальную архитектуру узла. Оценка клеток на периферии поражения выявляет опухолевые клетки с классическими чертами плазматических клеток (эксцентричное ядро ​​и выступающий аппарат Гольджи) (рис. 17С). Плазмоклеточные опухоли могут быть первичными новообразованиями лимфатических узлов или могут быть метастатическими поражениями.У мышей длительная адъювантная стимуляция может привести к развитию опухолей плазматических клеток в брюшине (Potter and Robertson, 1960; McIntire and Princler, 1969). Опухоли плазматических клеток возникают в результате моноклональной пролиферации В-клеток.

    Таблица 1

    Лимфатические узлы и соответствующие метастазы.

    Гистопатология лимфатических узлов

    Abstract

    Лимфатические узлы функционируют как фильтры тканей и тканевой жидкости и являются местом происхождения и продукции лимфоцитов для нормальных физиологических функций.В рамках этой нормальной функции они реагируют как на эндогенные, так и на экзогенные вещества множеством специфических морфологических и функциональных реакций. Поражения могут быть как пролиферативными, так и непролиферативными, и могут быть связаны с лечением или нет. Гистологическая оценка лимфатических узлов необходима для понимания иммунотоксического действия химических веществ, а полученные данные являются важным компонентом оценки риска для человека. Перед патологоанатомом-токсикологом стоит задача интерпретировать данные патологии в рамках полной клинической оценки всего животного.Ежедневные травмы, старение и токсины могут изменить нормальную гистологию и основную функцию лимфатических узлов. Поэтому важно различать и дифференцировать поражения, возникающие естественным образом во время нормального развития и старения, от тех, которые индуцируются ксенобиотиками. Для достижения этой цели решающее значение имеет сравнение с контролем, соответствующим возрасту и полу.

    Ключевые слова: Лимфатический узел, иммунотоксичность, ксенобиотик, гиперплазия, ангиэктазия, лимфома

    Введение

    Лимфатические узлы представляют собой организованные лимфоидные органы, содержащие лимфоциты в тонкой ретикулярной строме.Структуры внутри лимфатического узла включают капсулу, подкапсульный синус, кору (зона В-клеток с фолликулами и зародышевыми центрами), паракортекс (зона Т-клеток), мозговые синусы, мозговые тяжи и ворота. Чтобы убедиться, что все эти компоненты оценены, особое внимание следует уделить сбору и ориентации тканей. Лимфатические узлы следует регулярно исследовать макроскопически и под микроскопом, поскольку они могут отражать поражения органов и тканей, которые они дренируют. Более того, особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, которые с большей вероятностью будут подвергаться воздействию тестируемого соединения (Haley et al., 2005; Ruehl-Fehlert и др., 2005). Бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы следует исследовать на наличие соединений, вводимых путем ингаляции, тогда как соединения, вводимые перорально, скорее всего повлияют на нижнечелюстные (поверхностные шейные) и мезентериальные лимфатические узлы. При кожном или подкожном воздействии следует исследовать самый проксимальный дренирующий периферический узел или узлы (ушные, подмышечные, паховые и подколенные).

    Следует также учитывать диапазон нормальных гистологических данных в пределах групп лимфатических узлов, обусловленных нормальными иммунными функциями.Например, синусовый гистиоцитоз является нормальным явлением в брыжеечных лимфатических узлах, а макрофаги могут содержать эндогенный пигмент (гемосидерин, липофусцин) или экзогенный пигмент, отражающий поглощение антигена из пищеварительного тракта. Нижнечелюстные лимфатические узлы подвергаются воздействию антигенов из ротоглоточной области и обычно имеют хорошо развитые вторичные фолликулы и значительное количество плазматических клеток в мозговых тяжах. Для системных эффектов соединений исследование лимфатических узлов, удаленных от места нанесения, может предоставить дополнительную информацию.Если не дренировать место нанесения, подколенные и подмышечные лимфатические узлы часто не стимулируются и могут дать информацию о состоянии лимфатического узла в состоянии покоя. Однако эти лимфатические узлы могут быть очень вариабельными, маленькими и их трудно адекватно брать. Также полезно знать об областях, дренируемых конкретными узлами, для определения происхождения метастатических новообразований. Подробная информация о расположении конкретных лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс описана Tilney (1971) и Sainte-Marie et al.(1982). Информация об анатомии и номенклатуре мышиных лимфатических узлов предоставлена ​​Van den Broeck et al. (2006). Наконец, тщательное и подробное исследование лимфатических узлов может дать ценные сведения о возможном механизме действия исследуемого материала. Подробное описание нормальной структуры, функции и гистологии лимфатического узла см. в статье Willard-Mack (2006). Подробную информацию о расширенной гистопатологической оценке лимфатического узла см. в статье Elmore (2006).Следующие рисунки и описания иллюстрируют и обсуждают некоторые типичные поражения, наблюдаемые в лимфатических узлах.

    Лимфоидный некроз

    Лимфоидный некроз может быть фокальным, многоочаговым или диффузным в пределах лимфатического узла, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного некроза между лимфатическими узлами у одного и того же животного в зависимости от провоцирующего фактора и эффективности иммунный ответ. Некроз лимфоцитов характеризуется набуханием клеток со слипанием хроматина, кариорексисом или кариолизисом, а при более тяжелых поражениях — обильным эозинофильным клеточным детритом (1).Некроз часто сопровождается воспалительными клетками, включая нейтрофилы и фагоцитирующие макрофаги с внутрицитоплазматическим клеточным детритом (1). Эту форму некроза следует отличать от апоптоза, при котором происходит гибель отдельных клеток, характеризующаяся сморщиванием клеток, ядерным пикнозом и фрагментацией с апоптотическими тельцами и макрофагами с осязаемыми тельцами. Этот тип гибели клеток обычно происходит в зародышевых центрах вторичных фолликулов, где он является важным гомеостатическим механизмом.Апоптоз также может быть вызван различными повреждающими стимулами при введении в низких дозах, но эти же стимулы могут вызывать некроз при более высоких дозах. Примерами являются тепло, облучение, гипоксия и цитотоксические противораковые препараты (например, циклофосфамид). Дексаметазон, глюкокортикоид, также может вызывать апоптоз лимфоцитов в лимфатических узлах, но тимус является более чувствительным органом (Elmore, 2006).

    На рисунках 1A–E показаны нижнечелюстные лимфатические узлы самца яванского макака, получившего тестируемое изделие в ходе четырехнедельного исследования через желудочный зонд с 4-недельным периодом восстановления.На рисунках 1А-С показан лимфоидный некроз коры и областей паракортикального и мозгового вещества. Области некроза эозинофильны при малом увеличении (рис. 1А-В). При большем увеличении (рис. 1С) можно увидеть потерю лимфоцитов в сочетании с эозинофильным клеточным детритом и темным пикнотическим ядерным детритом. Макрофаги являются преобладающими воспалительными клетками в этой области. Рисунок 1D и более высокое увеличение на рисунке 1E относятся к другой области одного и того же лимфатического узла с более сильной воспалительной реакцией, преимущественно нейтрофилами.На рисунках 1F и 1G представлены увеличенные изображения медиастинального лимфатического узла 90-дневной самки крысы F344, обработанной высокой дозой уретана, при малом и большом увеличении. Имеется умеренное лимфоидное истощение, характеризующееся уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием, а также истощением паракортикальных лимфоцитов. При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными, как показано стрелкой на рисунке 1G. Микрофотографии 1A–E предоставлены Drs.Ханс Харлеман и Кэтрин Бовенкамп.

    Лимфоидное истощение или атрофия являются следствием хронического некроза или апоптоза. Это может произойти в любом лимфатическом узле, и могут быть различия в наличии и тяжести лимфоидного истощения между лимфатическими узлами у одного и того же животного. Лимфоидное истощение обычно характеризуется уменьшением количества и размера фолликулов с небольшим количеством зародышевых центров или их отсутствием и/или истощением паракортикальных лимфоцитов (11). При истощении паракортикальных лимфоцитов стромальные клетки могут стать более заметными (1).

    Массивный некроз лимфатических узлов встречается редко и может быть вызван обструкцией кровотока (инфарктом). Это поражение характеризуется диффузным коагуляционным некрозом с потерей клеточных ядер, но на ранней стадии с хорошо сохранившимися контурами клеток. Казеозный некроз также является необычным поражением, но может быть вызван инфекцией туберкулезными организмами и грибками у нечеловекообразных приматов. Его также можно увидеть в очагах быстро растущих новообразований. Макроскопически имеется полутвердая ткань от серого до бледно-желтого цвета.Микроскопически имеется аморфная масса зернистого эозинофильного материала без клеточных очертаний, а также без идентифицируемых ядер.

    Эктазия лимфатических синусов

    Эктазия лимфатических синусов может поражать как мозговые, так и субкапсулярные пазухи. Диффузная эктазия синуса обычно связана с лимфоидной атрофией. Это поражение можно обнаружить у контрольных животных, особенно в брыжеечных и медиастинальных лимфатических узлах стареющих мышей. является примером эктазии медуллярного синуса. Это поражение характеризуется наличием расширенных или кистозных синусов, выстланных лимфэндотелием и заполненных бледным эозинофильным/амфофильным материалом (предположительно лимфой), которые имеют тонкий кружевной вид (4).В лимфе можно найти небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Это пример эктазии мозгового синуса у контрольной 2-летней самки крысы F344. На изображении с малым увеличением показан большой эктатический мозговой синус (рис. 2А). При большем увеличении можно визуализировать лимфэндотелий, выстилающий пазуху (стрелка, рис. 2В). Бледная эозинофильная лимфа, заполняющая расширенный синус, имеет тонкий кружевной вид (рис. 2В). Иногда в лимфе можно обнаружить небольшое количество лимфоцитов, плазматических клеток и макрофагов.

    Синонимами этого поражения являются лимфангиэктазия, лимфатические кисты, кистозно-лимфатическая эктазия и дилатация синуса. Группа патологоанатомов, связанных с Национальной токсикологической программой, была опрошена на предмет предпочтительной терминологии для этого поражения. Двумя предпочтительными терминами были «эктазия лимфатического синуса» и «лимфангиэктазия». Лимфатическая эктазия синуса более четко определяет локализацию поражения.

    Сосудистые поражения

    При определении сосудистых поражений в лимфатических узлах можно использовать различные термины, каждая из которых имеет очень конкретное определение.Ангиэктазия определяется в Медицинском словаре Дорланда как «аномальное, обычно грубое расширение и часто удлинение кровеносного или лимфатического сосуда», а его синонимами являются гемангиэктазия, гемангиэктазия, вазодилатация и вазодилатация. В лимфатических узлах ангиэктазия кровеносных сосудов характеризуется расширением и гиперемией тонких вен в коре, мозговом веществе, капсуле, воротах или окружающей соединительной ткани. Ангиэктазии чаще всего наблюдаются в брыжеечных лимфатических узлах крыс и мышей, включая штамм B6C3F1, и могут сопровождаться или не сопровождаться кровоизлиянием (Ward et al., 1999). Это поражение можно отличить от гематомы по наличию клеток эндотелиальной выстилки и от ранней гемангиомы по отсутствию крупных опухолевых эндотелиальных клеток.

    Внутрисинусоидальные эритроциты (синусовый эритроцитоз) могут возникать в результате дренирования лимфатическим узлом области кровоизлияния. Это также может быть артефактом, возникающим в результате эвтаназии или рассечения тканей во время вскрытия, особенно в бронхиальных или медиастинальных лимфатических узлах. Обрезание и срез ткани лимфатических узлов также может привести к удалению эритроцитов из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем могут появиться в синусоидах или в перинодальной области (4).Лимфатические узлы, дренирующие места кровоизлияния, также могут иметь интрасинусоидальные эритроциты, но, в зависимости от хронизации, они могут сопровождаться различным количеством гемосидерин-нагруженных макрофагов, эритрофагоцитозом и воспалительными клетками (4).

    На рисунках 3A и 3B представлены изображения бронхиального лимфатического узла контрольной 3-месячной крысы Sprague-Dawley. Обрезка и разрез этой ткани вытеснили эритроциты из перегруженных кровеносных сосудов, которые затем появились в синусоидах (рис. 3А, короткая стрелка и рис. 3В) и в перинодальной области (рис. 3А, длинная стрелка).Фигуры 3C и 3D представляют собой изображения медиастинального лимфатического узла 3-месячной крысы Wistar с очагом легочного кровотечения. В этом случае на хронический характер поражения указывает наличие эритрофагоцитоза и гемосидерин-нагруженных макрофагов (рис. 3D). На рисунках 3E–H представлены изображения лимфатических узлов мышей с расширенными сосудистыми пространствами, заполненными эритроцитами. В этом случае трудно отличить ангиэктазию лимфатических узлов от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды могут напоминать расширенные кровеносные сосуды.Оба они выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. Оценка других систем органов на наличие гиперемии и поиск областей кровоизлияния в дренажном поле может помочь более четко определить это поражение. На рисунках 3I–L представлены изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, получавшего высокую дозу N-метилолакриламида. Этот лимфатический узел имеет ряд поражений, которые включают узловые и перинодальные ангиэктазии с гиперемией (рис. 3I-K), синусовый эритроцитоз (рис. 3I-J), пролиферацию перинодальных сосудов с ангиоэктазиями и гиперемией (рис. 3K) и кровоизлияние в узловую паренхиму (рис. 3I-K). Рисунок 3L).На рисунках 3M-P представлены изображения мезентериальных лимфатических узлов двух самцов мышей B6C3F1 в возрасте 24 месяцев, которым вводили высокую дозу метилимидазола. В обоих лимфатических узлах имеются заполненные кровью сосудистые пространства (кровеносные и/или лимфатические сосуды). Также имеются застойные артериолы в окружающей ткани одного лимфатического узла (рис. 3М) и периваскулярное кровоизлияние, связанное с артериолой в перинодальной жировой ткани другого лимфатического узла (рис. 30-Р). Микрофотографии на рисунках 3E и 3F предоставлены Drs.К. Фрит и Дж. Уорд. Рисунки 3G и 3H. Микрофотографии предоставлены доктором Майклом Личем.

    Поражения сосудов лимфатических узлов трудно отличить от умеренного или выраженного синусового эритроцитоза, поскольку расширенные кровеносные сосуды могут напоминать расширенные и наполненные кровью лимфатические сосуды. Оба выстланы уплощенными клетками и встречаются по всему лимфатическому узлу. При попытке решить эту проблему можно применить более целостный диагностический подход. Например, оценка застойных явлений в других системах органов может исключить наличие или отсутствие застоя кровеносных сосудов в качестве возможного диагноза.Обследование участков кровоизлияний в области дренажа узла может помочь исключить/исключить синусовый эритроцитоз. являются примерами заполненных кровью сосудистых пространств, которые требуют такого целостного подхода для более четкого определения поражения.

    Широкий спектр сосудистых поражений у леченных животных может включать застой синуса, синусовый эритроцитоз, узловую и перинодальную ангиэктазию с застоем, кровоизлияние в узловую паренхиму, перинодальную пролиферацию сосудов и периваскулярное кровоизлияние ().Диагноз связанных с лечением сосудистых поражений в лимфатических узлах следует ставить с учетом общего состояния здоровья животного и наличия или отсутствия сосудистых поражений в других органах и тканях. Обзор терминологии поражения двух лимфатических узлов был получен от группы патологоанатомов. Без каких-либо предварительных знаний о связанных с лечением поражениях и патогенезе поражений лимфатических узлов у этих мышей возникли разногласия относительно наиболее подходящей терминологии. Синусовый эритроцитоз и гиперемия стали двумя предпочтительными терминами.Однако большинство согласились с тем, что для постановки точного диагноза необходима информация о других органах, потенциальных участках кровоизлияния в дренажном поле и времени от смерти до вскрытия.

    Телеангиэктазия и ангиоматоз — это два термина, которые обычно не используются для определения сосудистых эктазий в лимфатических узлах грызунов, поскольку в медицине эти термины используются для обозначения неопластических поражений. Телеангиэктазия определяется как «аномальное расширение капилляров и артериол, которое часто образует ангиому», а ангиоматоз определяется как «заболевание сосудов с образованием множественных ангиом».Ангиома считается опухолью, состоящей преимущественно из кровеносных или лимфатических сосудов. Однако, когда в лимфатическом узле присутствуют наполненные кровью сосуды, важно отличать их от сосудистых опухолей, таких как гемангиомы и гемангиосаркомы.

    Пигмент

    Пигмент часто обнаруживается в цитоплазме синусоидных макрофагов как у контрольных, так и у обработанных животных. Наиболее распространенными пигментами являются гемосидерин и цероид/липофузин. Гемосидерин представляет собой железосодержащий зернистый материал золотисто-коричневого цвета, и макрофаги, содержащие этот пигмент, скорее всего, обнаруживаются в мозговых тяжах и лимфатических синусах лимфоузлов с синусовым эритроцитозом.Липофусцин также представляет собой мелкозернистый пигмент золотисто-коричневого цвета, но он образуется в основном из продуктов распада липидов, обычно тех, которые образуются из клеточных мембран. Цероид представляет собой вариант липофусцина, обладающий кислотоустойчивостью и аутофлуоресценцией. Количество макрофагов, содержащих гемосидерин или цероид/липофусцин, может быть увеличено при сопутствующей гиперплазии макрофагов в узлах, дренирующих различные поражения (воспалительные, некротические, неопластические и т. д.). Эти пигменты трудно отличить друг от друга с помощью обычного окрашивания гематоксилином и эозином.Чтобы различить их, можно использовать окраску железом (окраска железом Перла, реакция берлинской лазури) для окрашивания гемосидериновым синим. Для идентификации цероида/липофусцина можно использовать различные красители и методы, в том числе суданский черный В, реакцию Шморля, масляный красный О, карбол-липофусцин, окрашивание периодической кислотой-Шиффом, кислотно-устойчивое окрашивание Циля-Нильсена, автофлуоресценцию или лизосомально-кислотную фосфатазу и эстеразу. пятна. Меланин — еще один эндогенный пигмент, который можно найти в лимфатических узлах. Это нормальное явление для чернокожих мышей и не считается поражением.Для положительной идентификации меланина можно использовать метод Шморля, при котором гранулы меланина окрашиваются в сине-зеленый цвет. ДОФА-оксидаза представляет собой ферментный гистохимический метод, который также можно использовать и который очень специфичен для меланина.

    Различные вдыхаемые, проглатываемые, инъекционные и местные химические вещества могут вызывать синусовый гистиоцитоз в ассоциированных лимфатических узлах с макрофагами, содержащими инертное или нерастворимое пигментированное тестируемое вещество (Goginpath et al., 1987). Пигмент татуировки на хвосте, инертный и неполяризуемый, иногда можно обнаружить в виде скоплений разбросанного коричневого/черного материала в лимфатических узлах, прилегающих к татуировке.Регионарные лимфатические узлы, дренирующие места нанесения испытуемого препарата, всегда следует проверять на наличие экзогенных пигментов (), но исходное соединение или его метаболит иногда могут локализоваться в определенных тканях организма ().

    На рисунках 4A и 4B представлены изображения нижнего и верхнего медиастинального лимфатического узла самца крысы F344, обработанного 2,5 мг оксида никеля. Обратите внимание на минимальные рассеянные агрегаты коричневого/черного пигмента и связанную с ними лимфоидную гиперплазию. Рисунки 4C–F относятся к 2-летней самке крысы F344, получившей высокую дозу 2,4-диаминофенола-2 HCL.Лимфатический узел поджелудочной железы содержит мелкозернистый коричневый пигмент (рис. 4C-D), который не содержит железа. Предполагается, что этот материал является исходным соединением или его метаболитом. Такой же пигмент присутствовал в собственной пластинке двенадцатиперстной кишки (рис. 4E-F). На рисунках 4G-I представлены изображения бронхиального лимфатического узла 2-летней самки крысы F344, получившей низкую дозу триоксида молибдена. Хотя на этих изображениях трудно увидеть эритроциты, имеется синусовый эритроцитоз, эритрофагоцитоз и внутригистиоцитарные скопления золотисто-коричневого глобулярного пигмента, характерного для гемосидерина.

    Амилоидоз

    Под световым микроскопом и при окраске гематоксилином и эозином амилоид выглядит как аморфный, эозинофильный и гиалинизированный внеклеточный материал. При больших скоплениях амилоид проникает в соседние ткани, вызывая атрофию под давлением. Конго красный является наиболее распространенным красителем, используемым для оценки амилоида, придающим двулучепреломление яблочно-зеленого цвета при поляризации. Амилоидоз встречается у ряда линий мышей и других грызунов, но не наблюдается в лимфатических узлах крыс.Амилоидоз редко встречается у большинства линий мышей, но у мышей CD1, по-видимому, имеется генетическая предрасположенность (Frith and Chandra, 1991). Амилоидоз лимфатических узлов более распространен у самок мышей CD1, и степень амилоидоза увеличивается с возрастом, при этом к 24-месячному возрасту поражается 20–30% лимфатических узлов. У этих мышей отложение амилоида происходит в различных тканях, включая лимфатические узлы. Наиболее часто поражается мезентериальный лимфатический узел, амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла (4).Ранние поражения обычно возникают на периферии узла.

    Это изображения амилоидоза лимфатических узлов у мышей CD1. У этой линии мышей наиболее часто поражается брыжеечный лимфатический узел, а амилоид преимущественно накапливается в подкапсульных синусах (рис. 5А, стрелки). Фигуры 5В и 5С иллюстрируют характерную гомогенную, аморфную, эозинофильную и внеклеточную природу амилоида с прогрессирующим распространением в паракортикальные области лимфатического узла. Рисунок 5D иллюстрирует бледную эозинофильную природу амилоида при окрашивании конго красным.Микрофотографии 5A–C предоставлены доктором Майклом Личем. Микрофотография 5D предоставлена ​​Drs. К. Фрит и Дж. Уорд.

    Лимфаденит

    Воспалительные клетки могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих места воспаления, некроза, неоплазии и т. д., или они могут быть результатом введения раздражающего тестируемого соединения. Воспалительные клетки также могут присутствовать в лимфатическом узле в ответ на первичный некроз лимфоцитов. Тип лимфаденита может варьировать в зависимости от провоцирующего фактора (инородное тело, бактерии и др.).) и ответ может варьироваться от острого до гранулематозного (). При остром лимфадените нейтрофилы и незрелые миелоидные клетки могут быть обнаружены в пазухах и мозговых тяжах. Лимфоидная гиперплазия или атрофия также могут возникать в сочетании с узловым воспалением. Воспалительные инфильтраты следует отличать от состояний экстрамедуллярного кроветворения (ЭМГ) () и гранулоцитарного лейкоза.

    При ЭМГ обычно имеется смесь мегакариоцитов и других гемопоэтических элементов, тогда как при гранулоцитарном лейкозе большое количество незрелых миелоидных клеток с поражением многих органов.Термины «хронический лимфаденит» и «гранулематозный лимфаденит» должны быть зарезервированы для лимфатических узлов с хроническими абсцессами или гранулематозными поражениями, которые частично или полностью стирают нормальную узловую архитектуру, в отличие от повышенного количества гистиоцитов в подкапсульных и медуллярных пазухах (синусовый гистиоцитоз) (синусовый гистиоцитоз). ). Абсцессы могут быть острыми или хроническими и характеризуются центральной областью некроза, связанной преимущественно с нейтрофилами. На более поздних стадиях они окружены разным количеством грануляционной ткани, которая может трансформироваться в волокнистую соединительную ткань (4).Пиогранулематозный лимфаденит характеризуется обилием нейтрофилов и макрофагов, частично или полностью стирающих нормальную узловую архитектуру.

    Гиперплазия лимфоцитов

    Описаны реактивные гиперпластические поражения, включая гиперплазию лимфоцитов, в лимфатических узлах грызунов (Ward, 1990). У нормальных грызунов гиперплазия лимфоцитов может быть выражена в различной степени в зависимости от расположения лимфатического узла, состояния здоровья животного, возраста животного и плоскости разреза узла.Брыжеечные лимфатические узлы, в частности, могут демонстрировать большие различия в степени реактивной гиперплазии лимфоцитов между животными из-за стимуляции антигенами в кишечном тракте. Если предполагается, что увеличение лимфоцитов связано с лечением, то эта потенциальная изменчивость подчеркивает необходимость сравнения с контрольными тканями. Если подозревается эффект, связанный с лечением, может быть проведена расширенная гистопатология, чтобы более четко определить природу и степень этого поражения (Elmore, 2006).

    Лимфоцитарная гиперплазия может поражать как фолликулы, богатые В-клетками, так и паракортикальные клетки, богатые Т-клетками, и может указывать на гуморальный или клеточно-опосредованный ответ соответственно (). Лимфоидная гиперплазия, как правило, представляет собой реактивный или иммунный ответ и не считается предраковым поражением лимфатического узла. Стимулированные (реактивные) фолликулы, также называемые вторичными фолликулами, обычно больше, чем нестимулированные первичные фолликулы, и имеют более бледное окрашивание зародышевого центра с крупными лимфобластами и повышенным количеством апоптотических лимфоцитов и макрофагов с осязаемым телом.Зона мантии, окружающая зародышевый центр, состоит из более темных В-лимфоцитов малого и среднего размера. Гиперплазированные фолликулы идентифицируют по увеличению количества и размера фолликулов и превращению их во вторичные фолликулы. Гиперплазия паракортикального слоя характеризуется увеличением плотности клеток и, в зависимости от степени гиперплазии, увеличением паракортикальной зоны.

    На рисунках 7A и 7B показана лимфоидная гиперплазия с фолликулярным рисунком в нижнечелюстном лимфатическом узле 22-месячной мыши C57bl/6.При малом увеличении (рис. 7А) трудно определить, является ли это случаем пролиферации лимфоцитов или фолликулярной лимфомы. Однако при большем увеличении (рис. 7В) гетерогенный характер пролиферации лимфоцитов указывает скорее на гиперплазию, чем на неоплазию. Внутри фолликулярных зародышевых центров имеются более бледные окрашенные В-лимфобласты (рис. 7В, длинная стрелка), перемежающиеся с более мелкими, более зрелыми лимфоцитами и окруженные ими (рис. 7В, короткая стрелка). Для сравнения, нижнечелюстной лимфатический узел от самки мыши B6C3F1 с лимфомой изображен на рисунке 7C.При большем увеличении (рис. 7D) проиллюстрирована гомогенная природа неопластических лимфоцитов.

    Гиперплазия плазматических клеток

    Количество плазматических клеток обычно увеличивается в ответ на антигенную стимуляцию, которая требует выработки антител. Поэтому гиперплазия В-клеток может происходить одновременно с гиперплазией плазматических клеток. Выраженная гиперплазия плазматических клеток, или плазмоцитоз, часто встречается у грызунов, особенно в подчелюстных лимфатических узлах. Медуллярные тяжи обычно содержат плазматические клетки и их предшественники в качестве доминирующих типов клеток, и эти тяжи являются первичными участками гиперплазии плазматических клеток.В случаях выраженной гиперплазии плазматических клеток узел может быть значительно увеличен, состоять почти полностью из плазматических клеток, демонстрировать частичное стирание нормальной узловой архитектуры, и его может быть трудно отличить от неоплазии. Находками, подтверждающими гиперплазию, являются отсутствие инфильтрации коры и капсулы, атипичные плазматические клетки и метастазы (4). В зависимости от степени и хроничности антигенной стимуляции некоторые плазматические клетки могут содержать тельца Рассела. Предшественники плазматических клеток (иммунобласты или плазмобласты) также могут присутствовать среди более зрелых плазматических клеток.

    Это перипанкреатический лимфатический узел 15-месячной мыши C57bl/6 с выраженной гиперплазией плазматических клеток, затрагивающей медуллярную и паракортикальную области. Хотя имеется заметная инфильтрация медуллярной и паракортикальной областей этой популяцией плазматических клеток, интактная природа фолликулов (рис. 8В, стрелки) и однородная и дифференцированная цитоморфология плазматических клеток (рис. 8С) указывают на то, что это плазматические клетки. гиперплазия, а не неоплазия.

    Гиперплазия макрофагов

    Гиперплазия макрофагов обычно возникает в результате пролиферации резидентных синусоидальных макрофагов (), но также может наблюдаться как скопление макрофагов в любой области лимфатического узла.Скопления макрофагов могут располагаться периферически вокруг паракортикального слоя (1) или внутри кортикальной, паракортикальной и мозговой областей (3). Гиперплазия макрофагов также может быть признаком лимфатических узлов, которые дренируют место нанесения тестируемого препарата (). Конкретные паттерны (внутрисинусоидальный, кортикальный, паракортикальный, медуллярный) гиперплазии макрофагов в одном и том же лимфатическом узле в пределах дозовой группы будут соответствовать эффекту, связанному с лечением.

    На рис. 9А представлен пример брыжеечного лимфатического узла самки мыши B6C3F1, которой вводили высокую дозу 4,4′-тиобис-(6-Т-бутил-М-крезола).Обратите внимание на пролиферацию синусоидальных макрофагов (синусовый гистиоцитоз). Однако скопления макрофагов также можно увидеть в любой области лимфатического узла. На рисунках 9B-D представлены изображения лимфатического узла самца мыши B6C3F1, обработанного дигидратом дихромата натрия, которые иллюстрируют агрегаты макрофагов, расположенные периферически вокруг паракортикального слоя (стрелки). На рисунках 9E-G представлены изображения лимфатического узла двухлетней крысы F344 с скоплениями макрофагов в кортикальной, паракортикальной и медуллярной областях.На рисунках 9H-I представлены изображения мезентериального лимфатического узла 90-дневного самца крысы F344 в субхроническом исследовании elmiron. Эти изображения иллюстрируют пролиферацию макрофагов с вакуолизированной цитоплазмой в медуллярной области. Эти типы гиперплазии могут быть признаком лимфатических узлов, дренирующих место нанесения тестируемого препарата. Конкретные паттерны гиперплазии макрофагов в одном и том же узле в дозовой группе будут согласовываться с эффектом, связанным с лечением. Ингаляционные исследования с частицами могут привести к повышенному скоплению макрофагов в регионарных дренирующих лимфатических узлах.Ингаляционное исследование талька привело к скоплению макрофагов, большинство из которых содержало частицы талька, в перибронхиальной лимфоидной ткани легких, а также в бронхиальных (рис. 9J и 9K) и медиастинальных лимфатических узлах 2-летнего самца крысы F344. Поляризация бронхиального лимфатического узла выявила короткие линейные фрагменты талька в цитоплазме макрофагов (рис. 9L и 9M).

    Пролиферацию (гиперплазию) резидентных макрофагов можно легко спутать с увеличением количества интрасинусоидальных макрофагов, которые проникают через эфферентные лимфатические сосуды, дренирующие область с большим количеством макрофагов.Сравнение поражений в лимфатическом узле с органами и тканями, которые дренирует этот конкретный узел, помогает дифференцировать их. Брыжеечные лимфатические узлы постоянно стимулируются внутрикишечными антигенами и поэтому могут иметь большое количество интрасинусоидальных макрофагов, а также мультифокальные скопления макрофагов в коре и паракортексе. Кроме того, среди животных могут быть значительные индивидуальные различия. Сравнение группы обработанных животных с контрольными животными поможет определить, связано ли это с лечением.Особое внимание следует уделять лимфатическим узлам, связанным с путем введения тестируемого соединения. Для ингаляционных исследований следует исследовать бронхиальные и медиастинальные лимфатические узлы, а пероральное введение соединений может привести к поражению подчелюстных и мезентериальных лимфатических узлов. Предварительное знание физических и химических свойств испытуемого соединения может помочь идентифицировать фагоцитированный материал испытуемого изделия. Например, нерастворимые твердые частицы могут рассматриваться как внутрицитоплазматический преломляющий материал при поляризации (1).

    Когда гистиоциты встречаются в виде скоплений внутри синусоидов, это обычно называют «синусовым гистиоцитозом». Когда скопления гистиоцитов встречаются в паренхиме лимфатических узлов, термины «гранулематозное воспаление», «гранулематозный лимфаденит», «агрегаты/инфильтраты гистиоцитов» и «скопления/инфильтраты макрофагов» используются взаимозаменяемо. Однако степень накопления макрофагов должна помочь определить, используется ли термин «гранулематозный». Если есть агрегаты гистиоцитов с минимальной или легкой степенью тяжести, то гистиоцитарные или макрофагальные агрегаты/инфильтраты будут подходящими.Если степень тяжести умеренная или отмечается частичное или полное стирание узловой архитектуры, то термин «гранулематозный» будет более подходящим.

    Экстрамедуллярный гемопоэз

    Хотя селезенка является основным местом экстрамедуллярного гемопоэза (ЭМГ) у грызунов, иногда он может присутствовать в лимфатическом узле. ЭМГ обычно является физиологической реакцией на резкую потерю или повышенную потребность в дополнительных клетках крови из-за таких состояний, как кровоизлияние или сильное воспаление.Он характеризуется смесью миелоцитарных, эритроцитарных и мегакариоцитарных клеток и в основном присутствует в мозговых тяжах (4).

    Эти изображения иллюстрируют различные типы ЭМГ, присутствующие в лимфатических узлах грызунов. Фигура 10А представляет собой изображение мезентериального лимфатического узла контрольного самца мыши B6C3F1. На этом изображении с малым увеличением виден синусовый эритроцитоз. Наличие мегакариоцитов (стрелки) указывает на наличие ЭМГ. Это может быть в ответ на хроническую кровопотерю в организме и потребность в дополнительных тромбоцитах.Фигуры 10B и 10C представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1, которого лечили высокой дозой N-метилолакриламида. В дополнение к синусовому эритроцитозу стрелка на рисунке 10B и наконечники стрелок на рисунке 10C указывают на мегакариоциты в пазухах. Медуллярные тяжи заполнены миелоидными предшественниками, что свидетельствует о гранулопоэзе (рис. 10С, стрелка). Фигуры 10D и 10E представляют собой изображения мезентериального лимфатического узла 24-месячного самца мыши B6C3F1 из контрольной группы.В дополнение к мегакариоцитам в мозговых тяжах и синусах имеются миелоидные и эритроидные предшественники.

    Лимфома и MCL

    Существует множество подклассов лимфомы, включая малые лимфоциты, лимфобластные, плазматические клетки, иммунобластные лимфомы, лимфомы фолликулярного центра и маргинальной зоны. Консенсусная система для классификации лимфоидных новообразований мыши в соответствии с их гистопатологическими и генетическими особенностями была предложена как способ моделирования болезней кроветворения человека у мышей (Morse et al., 2002). Однако обсуждение и описание каждого типа выходит за рамки данной статьи.

    Лимфома является наиболее распространенным первичным новообразованием, возникающим в лимфатических узлах, и у крыс F344 ее следует отличать от мононуклеарно-клеточного лейкоза (MCL). У мышей B6C3F1 лимфомы часто возникают в брыжеечных лимфатических узлах, селезенке и пейеровых бляшках (Ward et al., 1999). Лимфома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов (4). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (11).При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптозными тельцами, которые представляют собой остатки ядер (1). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию (4). Следует отметить, что лимфоидная ткань часто обнаруживается в перинодальной жировой клетчатке, и ее нельзя рассматривать как неопластическую инвазию без наличия других признаков лимфомы в узле.

    Лимфосаркома обычно состоит из мономорфных пластов неопластических лимфоцитов, как показано в этом лимфатическом узле гемизиготной мыши TGAC (FVB/N) (рис. 11А). Апоптоз лимфоцитов является общим признаком лимфосаркомы, придающим лимфатическому узлу вид «звездного неба» при малом увеличении (рис. 11В). При большем увеличении визуализируются макрофаги с осязаемыми тельцами с внутрицитоплазматическими апоптотическими тельцами (ядерными остатками) (рис. 11С, стрелки). Общие диагностические признаки лимфоидной неоплазии включают размер лимфатического узла, потерю нормальной архитектуры, наличие мономорфной популяции лимфоцитов, инвазию в капсулу и перинодальную жировую инвазию.Однако это также могут быть особенности MCL. На рисунках 11D–H представлены изображения лимфатического узла крысы F344, иллюстрирующие случай MCL с инвазией капсулы (рис. 11D и 11E), инвазией перинодального жира (рис. 11F) и мономорфной популяцией неопластических лимфоцитов (рис. 11G). Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфосаркомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие (рис. 11H), печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.

    Диагностические признаки лимфомы также могут быть признаками MCL. Однако цитоплазма клеток MCL может иметь характерный эозинофильный зернистый вид с окрашиванием гематоксилином и эозином или практически не окрашиваться, а окрашивание ядер может варьироваться от бледного до густобазофильного. Диффузное поражение красной пульпы селезенки является основным признаком MCL и помогает дифференцировать MCL от лимфомы. Присутствие лейкемии в других тканях, таких как легкие, печень и почки, является общим признаком прогрессирующего MCL.Для получения более подробной информации о MCL обратитесь к статье Suttie (2006).

    Метастатические поражения

    Метастатические поражения в лимфатических узлах могут возникать из неопластических эмболов крови из опухолей, которые не находятся в непосредственной близости от узла. Метастатические неоплазии также могут быть обнаружены в лимфатических узлах, дренирующих область, пораженную опухолью. Таким образом, если метастатическая неоплазия обнаружена в лимфатическом узле, а первичная опухоль еще не идентифицирована, ее локализацию можно определить путем оценки тканей в пределах лимфатического дренирующего поля этого конкретного узла.Хотя это и не исчерпывающий список, в нем перечислены несколько лимфатических узлов и соответствующие метастазы у крыс F344 на основе анатомического расположения и поля дренирования (Stefanski et al., 1990). Подробная информация о расположении специфических лимфатических узлов и схемах лимфооттока у крыс и мышей была описана (Tilney, 1971; Sainte-Marie et al., 1982; Van den Broeck et al., 2006). Микрофотографии и описания — иллюстрируют и обсуждают различные метастатические поражения в лимфатических узлах грызунов.

    Метастатические поражения иногда можно обнаружить в лимфатическом узле, дренирующем область, пораженную неоплазией. Фигуры 12А и 12В иллюстрируют нижнечелюстной лимфатический узел крысы F344 со стиранием примерно 80% нормальной архитектуры узла из-за большого метастатического поражения. Имеется компрессия оставшейся нормальной лимфоидной ткани слева от образования (стрелки). При большем увеличении видны островки и трабекулы опухолевых клеток плоского эпителия с образованием эозинофильного кератина (рис. 12С, стрелка).На рис. 12D показано основное место этого новообразования, десна верхней челюсти, которая представляет собой область, дренируемую нижнечелюстным лимфатическим узлом.

    На рисунках 17А и 17В показан лимфатический узел самки мыши B6C3F1 с пластами круглых клеток, стирающих нормальную архитектуру узла. Оценка клеток на периферии поражения выявляет опухолевые клетки с классическими чертами плазматических клеток (эксцентричное ядро ​​и выступающий аппарат Гольджи) (рис. 17С). Плазмоклеточные опухоли могут быть первичными новообразованиями лимфатических узлов или могут быть метастатическими поражениями.У мышей длительная адъювантная стимуляция может привести к развитию опухолей плазматических клеток в брюшине (Potter and Robertson, 1960; McIntire and Princler, 1969). Опухоли плазматических клеток возникают в результате моноклональной пролиферации В-клеток.

    Таблица 1

    Лимфатические узлы и соответствующие метастазы.

    Гистология, лимфатические узлы — StatPearls

    Введение

    Рассеянные по всему телу лимфатические узлы выполняют важную функцию фильтрации как экзогенных, так и эндогенных антигенов и вызывают иммунный ответ посредством активированных лимфоцитов и антител.Они могут увеличиваться при инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, лимфомах и метастатических карциномах.[1] Гистологическая оценка обязательна в диагностике этих образований. В случае метастатической карциномы дополнительная информация, такая как экстракапсулярное распространение и размер метастатической карциномы, имеет прогностическое значение [2].

    Вопросы, вызывающие озабоченность

    Обработка и оценка лимфатических узлов отличаются от других органов, так как для различных нозологических форм используется несколько методов.Для оценки лимфомы требуется проточная цитометрия, для которой необходима свежая ткань (без формалина или другой среды). Последняя классификация лимфом (ВОЗ, 2018 г.) основана на молекулярных данных; следовательно, в некоторых случаях ткань отправляется на мутационный анализ. Метастатическая карцинома в лимфатическом узле является одним из важнейших прогностических факторов практически при всех видах опухолей. Место и размер метастатической карциномы, наряду с экстракапсулярным распространением, также присутствуют во многих опухолях, включая рак молочной железы и толстой кишки, и помогают при выборе вариантов лечения.Таким образом, базовые знания гистологии лимфатических узлов и лабораторной оценки помогают правильному гистологическому, молекулярному тестированию и лечению.

    Структура

    Лимфатические узлы представляют собой бобовидные органы от желто-коричневого до коричневого цвета, распределенные по всему телу. Они имеют тонкую капсулу, через которую в нее впадают многочисленные афферентные лимфатические сосуды. Кора содержит лимфоидные фолликулы, первичные в наивных лимфатических узлах и вторичные в активированных лимфатических узлах. Вторичные лимфатические узлы имеют реактивный зародышевый центр в ответ на стимуляцию антигенпрезентирующими клетками.Единственный эфферентный лимфатический отток от каждого лимфатического узла впадает в лимфатические стволы, которые в конечном итоге впадают в вены.

    Функция

    Лимфатические узлы участвуют в выработке как клеточного, так и гуморального иммунитета. Они фильтруют все виды инородных материалов, вирусов, бактерий и опухолевых клеток. В ответ на антигены, которые презентируются Т-лимфоцитам, продуцируются активированные Т- и В-лимфоциты. Они также способствуют оттоку лимфы. При отсутствии лимфатических узлов, как это бывает у онкологических больных после лимфаденэктомии, развивается лимфедема и повышается риск ангиосаркомы.

    Подготовка ткани

    Лимфатические узлы с подозрением на лимфому отправляются свежими в гистопатологическую лабораторию. Образец для проточной цитометрии в специальной среде RBMI берется вместе с сенсорными отпечатками для возможного предварительного диагноза. Остальную часть образца обрабатывают как обычный гистологический образец. Лимфатический узел нарезают, и репрезентативные срезы берут для микроскопического исследования. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Образцы сторожевых лимфатических узлов берутся для выявления рака молочной железы, которые также отправляются в свежем виде для интраоперационной оценки.[4][5] Сторожевые лимфатические узлы на наличие меланомы, отправленные в формалине и оцененные с помощью многоэтапных срезов. Лимфатические узлы также подвергаются забору образцов при воспалительных состояниях, таких как туберкулез и другие карциномы, для определения стадии.

    Гистохимия и цитохимия

    При наличии гранулематозного воспаления заказывают окраску на грибы (PAS, GMS) и Mycobacterium (Ziehl Neelson). Следующие пятна могут также быть заказаны, если клинически и гистологически указано:

  • Whipple Deals: PAS PACT

  • Cat царапина: Warthin Starry

  • Иммуногистохимия использует несколько пятенных антител для идентификации характер лимфоцитов.Некоторые из широко используемых красителей:

    • В-клетки: CD 20 и Cd79a

    • Т-клетки: CD3 и CD5 И клетки Ходжкин

    • CD 15: Neutrofils и Hodgkkin клетки

    • Лангеры, S100 и CD68

    и CD68

    Света микроскопии

    На капсуле Lymph Node — это тонкий волокнистый, который получает афферентную лимфатику.Наивный лимфатический узел не подвергался какой-либо антигенной стимуляции и, следовательно, имеет все первичные лимфоидные фолликулы без зародышевого центра. В ответ на антигены трансформируется во вторичные лимфоидные фолликулы с герминативными центрами и периферической мантийной зоной с мелкими зрелыми В-клетками. Зародышевый центр состоит из центробластов, центроцитов, макрофагов осязаемого тела и фолликулярных дендритных клеток. Между капсулой и корой находятся субкапсулярные синусы, которые являются основным местом метастатического рака.[6]

    Паракортекс представляет собой зону Т-клеток со смешанными иммунобластами и дендритными клетками. Продолговатый мозг является самой внутренней частью лимфатического узла и состоит из медуллярных тяжей и синусов и богат плазматическими клетками.

    Реактивная фолликулярная гиперплазия наблюдается при вирусных и бактериальных инфекциях и аутоиммунных заболеваниях.

    Гранулематозное воспаление характерно для микобактериального туберкулеза, грибковой инфекции, болезни кошачьих царапин, венерической лимфогранулемы, туляремии и иерсиний.[7]

    Некротизирующий негранулематозный лимфаденит присутствует при болезни Кикути-Фудзимото и системной красной волчанке.

    Подход, основанный на образце, служит для первоначальной гистологической оценки лимфом.

    Крупные узлы обычно наблюдаются при узловом склерозе, лимфоме Ходжкина, лимфоме Ходжкина с преобладанием лимфоцитов, прогрессирующей трансформации зародышевых центров и фолликулярной лимфоме.

    Узелки малого и среднего размера встречаются при фолликулярной лимфоме, прореагировавшей фолликулярной гиперплазии, лимфоме из мантийных клеток и лимфоме маргинальной зоны.

    Диффузное сглаживание малыми лимфоцитами наблюдается при мелкоклеточной лимфоме, диффузной фолликулярной лимфоме, экстранодальной маргинальной В-клеточной лимфоме.

    Микроскопия Электрон

    Электронно-микроскопические исследования лимфатических узлов показали чрезвычайно сложную корково-капиллярную сеть, доказывающую фильтрующую функцию лимфатических узлов. Также было показано, что он становится более сложным в ответ на антигенную стимуляцию.[8]

    Патофизиология

    Лимфа происходит из интерстициальной космической жидкости.Лимфатические каналы несут его к лимфатическим узлам вместе со всеми видами экзогенных и эндогенных антигенов и антигенпрезентирующих клеток. Антигенпрезентирующие клетки включают дендритные клетки, макрофаги и В-лимфоциты. Антиген обрабатывается и связывается с главными комплексами гистосовместимости (MHC), чтобы стабильно экспортировать их на клеточную поверхность для презентации CD 4+ хелперным и CD 8+ киллерным Т-лимфоцитам. Вспомогательные Т-клетки CD 4+ связываются с В-клетками и активируют их, превращаясь в зрелые плазматические клетки, секретирующие антитела, борющиеся с инфекцией.[9] Естественные киллеры и цитотоксические Т-клетки CD8+ убивают инфицированные клетки, высвобождая цитотоксические гранулы и цитокины.

    Клиническое значение

    Лимфатические узлы могут увеличиваться в ответ на инфекцию. Микобактериальные, грибковые инфекции и болезнь кошачьих царапин вызывают некротическое гранулематозное воспаление. Вирусные инфекции, такие как инфекционный мононуклеоз, вызывают реактивную гиперплазию лимфатических узлов. Аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит и системная красная волчанка, вызывают реактивную фолликулярную гиперплазию.Лимфатические узлы являются одной из первых и частых локализаций метастатических опухолей. В таких случаях тип, расположение, размер и количество вовлеченных лимфатических узлов являются наиболее важным прогностическим признаком, который определяет тактику лечения и стадирование опухоли.[10] Лимфомы чаще всего возникают из лимфатических узлов. Следовательно, знание реактивных лимфаденопатий необходимо, чтобы избежать ошибочного диагноза лимфомы.

    Рисунок

    Окрашенный гемоксилином и эозином препарат лимфатического узла с метастатической карциномой.Предоставлено Sameera Rashid, MD

    Рисунок

    Срез лимфатического узла с крупными клетками с «совиным глазом» «клетки Ходжкина» на фоне смешанных воспалительных клеток у молодого мужчины. Диагноз — лимфома Ходжкина. Предоставлено Самирой Рашид, доктором медицины.

    Ссылки

    1.
    Gaddey HL, Riegel AM. Необъяснимая лимфаденопатия: оценка и дифференциальная диагностика. Ам семейный врач. 01 декабря 2016 г .; 94 (11): 896-903. [PubMed: 27929264]
    2.
    Мараз Р., Венцель Л., Сикорски Л., Амброзай Э., Серфозё О., Райтар М., Черни Г.Значение экстракапсулярного распространения метастазов в сторожевой узел в хирургическом лечении рака молочной железы. Маги Себ. 2020 март;73(1):16-22. [PubMed: 32172574]
    3.
    Цзян М., Беннани Н.Н., Фельдман А.Л. Обновление классификации лимфом: Т-клеточные лимфомы, лимфомы Ходжкина и новообразования гистиоцитарных/дендритных клеток. Эксперт преподобный Гематол. 2017 март; 10 (3): 239-249. [Бесплатная статья PMC: PMC5514564] [PubMed: 28133975]
    4.
    Dixon JM. Биопсия сигнального лимфатического узла в хирургии рака молочной железы.Энн Сург Онкол. 2016 Октябрь; 23 (11): 3426-3428. [PubMed: 27448117]
    5.
    Zhang S, Zhang D, Yi S, Gong M, Lu C, Cai Y, Tang X, Zou L. Взаимосвязь плотности лимфатических сосудов, лимфоваскулярной инвазии и метастазирования в лимфатические узлы при рак молочной железы: систематический обзор и метаанализ. Онкотаргет. 2017 10 января; 8 (2): 2863-2873. [Бесплатная статья PMC: PMC5356848] [PubMed: 27926511]
    6.
    Willard-Mack CL. Нормальная структура, функция и гистология лимфатических узлов. Токсикол патол.2006;34(5):409-24. [PubMed: 17067937]
    7.
    Паттерсон К.С., Кеваль С.Дж., Гутьеррес М.Г. Гранулематозное воспаление при туберкулезе и саркоидозе: влияет ли лимфатическая система на заболевание? Биоэссе. 2019 ноябрь;41(11):e16. [PubMed: 31588585]
    8.
    Brooks RE, Siegel BV. Нормальные клетки лимфатических узлов человека: электронно-микроскопическое исследование. Кровь. 1966 г., май; 27 (5): 687–705. [PubMed: 5936825]
    9.
    Messadeg L, Hordonneau C, Bouguen G, Goutorbe F, Reimund JM, Goutte M, Boucher AL, Scanzi J, Reymond M, Allimant C, Dapoigny M, Pereira B, Bommelaer G, Буиссон А.Ранний трансмуральный ответ, оцененный с помощью магнитно-резонансной томографии, может предсказать устойчивую клиническую ремиссию и предотвратить повреждение кишечника у пациентов с болезнью Крона, получающих терапию против фактора некроза опухоли. Дж. Колит Крона. 2020 07 ноября; 14 (11): 1524-1534. [PubMed: 32533769]
    10.
    Ушигоме Х., Охью М., Китамура М., Накацука С., Харагути Н., Нисимура Дж., Ясуи М., Вада Х., Такахаши Х., Омори Т., Мията Х., Яно М., Такигути С. Оценка факторов риска метастазирования в лимфатические узлы при раке нижних отделов прямой кишки Т2 для проведения химиолучевой терапии после локальной резекции.Мол Клин Онкол. 2020 апр;12(4):390-394. [Бесплатная статья PMC: PMC7057958] [PubMed: 321

    ]

    Лимфоид: Руководство по гистологии

    Что такое лимфатические узлы?

    Это около 100-200 100 бобовидных органов, которые находятся вдоль лимфатических сосудов и фильтруют микроорганизмы и т. д. из лимфы.

    Это схема лимфатического узла , срезанная до показать организацию внутри, на корковую и мозговую области.

    Первичные фолликулы : лимфоидные фолликулы без зародышевого центра.

    Вторичные фолликулы : лимфоидные фолликулы с зародышевым центром. Они в основном содержат В-клетки.

    Узлы покрыты капсулой из плотной соединительной ткани ткани и имеют капсульные расширения соединительной ткани, называемые трабекулы , которые обеспечивают поддержку крови сосуды, входящие в узлы.
    Лимфа , содержащая микроорганизмы, растворимые антигены, антигенпредставляющие клетки и несколько В-клеток попадают в лимфатический узел через афферентных лимфатических сосудов, впадающих в подкапсульный синус . Затем он проходит через кортикальных синусы в костномозговые синусы и листья через эфферентных лимфатических сосудов , в гилиум как эфферентный лимфатический.Этот содержит много Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, плазматических клеток и антитело.
    Все кровяных синусов выстланы прерывистой слой простого плоского эндотелия, а также содержат лимфоциты и макрофаги. Ретикулярные волокна обеспечивают дополнительную поддержку матрица/строма.
    Кора делится на внешнюю и внутренней коры .

    Наружная кора имеет лимфатические узелки, которые в основном содержат В-клетки.В промежутках между сеть ретикулярных волокон в коре головного мозга. (см. рисунок ниже).
    Более светлые области окрашивания – это зародышевых центров, где В-клеток пролиферируют в секретирующие антитела плазматические клетки (см. В- и Т-лимфоциты). Макрофаги также присутствуют в этих регионах, вместе с дендритными клетками и некоторыми Т-клетками .И макрофаги, и дендритные клетки улавливают антигены и представляют их на своей поверхности В-клеткам.

    Внутренняя кора содержит в основном Т-клетки.

    глубокие корковые и мозговые тяжи содержат В-клетки и плазматические клетки. Плазматические клетки живут 3 дня, а вырабатывают антитела типа IgG.

    На этой схеме лимфатического узла показаны пути, по которым лимфоциты могут проникать в лимфатический узел и выходить из него.

    Большая часть лимфоцитов попадает в лимфатические узлы через кровеносные сосуды, а около 10% — через лимфу.

    Строение посткапиллярной венулы в глубокой коре (паракортекс) необычен тем, что не выстлан простой плоскоклеточной эпителия, а простым кубическим эпителием. Это называется венулы с высоким эндотелием (HEV) (см. рисунок ниже). лимфоциты распознавать и прикрепляться к этим эндотелиальным клеткам и протискиваться через их в глубокие корковые области узлов.Этот регион в лимфе много Т-клеток, а также антигенпредставляющих дендритные клетки.

    Поступившие сюда

    Т-клеток активируются в коре, между лимфоидными фолликулами.

    Лимфатические узлы

    № 22 Лимфатический узел, (серебряное пятно)

    На этом препарате хорошо видна гистологическая топография лимфатического узла, хотя окраска серебром не показывает клеточных элементов. Ретикулярные волокна , окрашенные в черный цвет серебристым ретикулумом, расположены в рыхлой паутинной сети.Коллаген I типа окрашивается контрастным красителем в красно-коричневый цвет.

    Определите следующие структуры:

    1. Соединительнотканная капсула , окрашенная в красно-коричневый цвет при контрастном окрашивании и покрытая с внешней стороны рыхлой соединительной тканью, в которой находятся жировые клетки, кровеносные сосуды и несколько афферентных лимфатических сосудов с тонкими клапанами.
    2. Подкапсульный синус непосредственно под капсулой.
    3. Мелкие корковые синусы ( трабекулярные синусы ) по обе стороны от трабекул.
    4. Соединительная ткань трабекулы , окрашенные в красно-коричневый цвет и отходящие от капсулы в область коры.
    5. Кора , состоящая из лимфатической ткани с узелками (которые плохо определяются в этом узле).
    6. Паракортикальная неузловая область коры.
    7. продолговатый мозг , характеризующийся лимфатической тканью, расположенной в виде разветвлений и анастомозирующих мозговых тяжей и мозговых синусов.
    8. Углубленная область, ворота , которые окружены мозговым веществом и содержат соединительную ткань, несколько жировых клеток, кровеносные сосуды, нервные пучки и крупные эфферентные лимфатические сосуды с тонкими клапанами для предотвращения обратного оттока лимфы в узел . (Сканированный срез не проходит непосредственно через ворота, но в центре мозгового вещества находится большой эфферентный лимфатический сосуд).

    Убедитесь, что вы понимаете клеточные взаимодействия и активность как в кортикальной, так и в медуллярной областях лимфатического узла.

    #31 Бронхиальный лимфатический узел, (H & Azure II-Eosin)

    Это хороший слайд для изучения васкуляризации и цитологических особенностей различных областей узла. При малом увеличении идентифицируйте кору , паракортекс и продолговатый мозг . Обратите внимание на артерии, вены и выносящие лимфатические сосуды. В коре исследуют зародышевых центров и темную окружающую зону внутри лимфатических узелков. Темная зона, окружающая зародышевый центр, состоит из плотно упакованных мелких и средних лимфоцитов, отделенных друг от друга слоями уплощенных ретикулярных клеток бледного окрашивания.Под большим увеличением можно наблюдать, что зародышевый центр фолликула содержит большое количество лимфоцитов. Обратите внимание на активированные В-клетки, которые имеют большое центральное ядро ​​и заметное ядрышко, окруженное относительно узким ободком сильно базофильной цитоплазмы. Есть также несколько свободных макрофагов с поглощенными клеточными остатками.

    В паракортексе идентифицируйте посткапиллярных венул , выстланных необычными кубовидными эндотелиальными клетками.Обратите внимание на многочисленные малые лимфоциты, пересекающие стенки этих венул. Посткапиллярные венулы являются местом входа В- и Т-лимфоцитов в паренхиму лимфатического узла. Т-клетки остаются в зоне коры, зависящей от тимуса, а В-клетки мигрируют в узловые области. Посткапиллярные венулы отсутствуют в узловой области коры или в мозговых тяжах.

    Далее исследуют медуллярную область лимфатического узла. Лимфоциты видны в мозговых синусах, которые прерывисто выстланы эндотелиальными клетками.Медуллярные тяжи более клеточные и состоят из ретикулярных клеток, лимфоцитов, макрофагов и плазматических клеток. Плазматические клетки имеют обильную, очень базофильную цитоплазму, выраженную зону Гольджи и эксцентричное ядро, хроматин которого имеет вид «тележного колеса». Плазматические клетки секретируют антитела.

    #24 Лимфатический узел, инъецированный тушью через лимфатическую систему

    При малом увеличении обратите внимание, что частицы туши концентрируются в основном в пазухах узла и в меньшей степени в мозговых тяжах, где находится большая часть фагоцитирующих клеток.Чернила практически отсутствуют в корковых узелках. При большем увеличении частицы чернил можно увидеть внутри макрофагов . Подкапсульный синус имеет клиническое значение, поскольку опухолевые клетки попадают сюда в лимфатический узел. На выпуклой поверхности узла видны афферентные лимфатические сосуды с клапанами.

    Нормальная гистология и цитология лимфатических узлов

    Нормальная гистология лимфатических узлов

    Лимфатические узлы представляют собой овальные массы, окруженные фиброзной капсулой и разделенные перегородками.Внутренние области разделены и поддерживаются ретикулярными волокнами различной толщины. Капсула достигает афферентных лимфатических протоков, которые несут лимфу, оттекающую в подкапсульном синусе, к периферическому синусу. Лимфатические узлы анатомически и функционально состоят из трех отдельных областей: коркового, паракортикального и мозгового вещества. Кора представляет собой зависимую от В-клеток область, содержащую первичные и вторичные фолликулы. Первичные фолликулы представляют собой сферические скопления малых лимфоцитов. Вторичные фолликулы являются местом воздействия антигена, рекрутирования и перегруппировки В-лимфоцитов; они образованы «бледным» зародышевым центром, окруженным темной толстой каймой из мелких В-лимфоцитов.Паракортекс окружает фолликулы и располагается между корковым и мозговым веществами; это Т-клеточнозависимая область, образованная малыми лимфоцитами. Продолговатый мозг — это место синуса, где лимфа направляется к эфферентным лимфатическим протокам, и является B-зависимой областью; мозговое вещество содержит макрофаги, плазматические клетки и лимфоциты. Каждая из этих областей, далеко не статическая, может претерпевать изменения в зависимости от различных патологических состояний, а мазки могут отражать преобладание соответствующего клеточного состава.

    Оценка FNC

    Посмотрите на мазок при малом увеличении: высоко или низкоклеточный мазок? Он мономорфный или полиморфный? собраны или рассредоточены?
    Определите 1) изолированные клетки, 2) лимфоидные клетки на разных стадиях развития и их количественную распространенность, 3) гранулоциты и 4) гистиоциты.
    Посмотрите на группы клеток: есть ли незрелые лимфоидные клетки? макрофагально-лимфоидные комплексы? эпителиоидные клетки? метастатические клетки?
    Определите строму и сосудистые структуры.
    Оцените ядерную атипию, но имейте в виду, что большинство клеток НХЛ представляют собой клональную экспансию соответствующих нелимфоматозных цитотипов.
    Сравните цитологические данные с ICC и/или FC, FISH и молекулярными данными, если они доступны, чтобы подтвердить клональность или идентифицировать специфические транслокации.

    Цитотипы и их распространенность при различных патологических образованиях

    Зрелые лимфоциты имеют мелкие и темные ядра с грубым хроматином и тонким ободком цитоплазмы. Фенотип В и Т нельзя различить по цитологическим признакам, тогда как увеличенные ядра и небольшие цитоплазматические «складки» кажутся типичными для Т-лимфоцитов.Т-лимфоциты могут быть избыточно многочисленны в ЛХ с преобладанием лимфоцитов или в Т-богатых В-НХЛ.
    Плазматические клетки имеют эксцентрично расположенные ядра с хроматином в виде колеса и крупную, четко очерченную цитоплазму со светлым ободком в парануклеарной области. Плазматические клетки могут преобладать при сифилисе, лимфоплазмоцитоидной лимфоме и плазмоцитоме.
    Макрофаги представляют собой крупные клетки с широкой цитоплазмой, часто поглощенной фагоцитированным клеточным дебрисом, и одним или двумя эксцентрично расположенными ядрами. Последние могут быть круглыми или овальными, бледными с «пыльным» хроматином и мелкими или малозаметными ядрышками.Макрофаги преобладают при синусовом гистиоцитозе или смешиваются с лимфоидными клетками при реактивной гиперплазии и могут вызывать картину «звездного неба» при лимфобластной лимфоме (лимфоме Беркитта).
    Эпителиоидные клетки представляют собой крупные клетки моноцитоидного происхождения. Эти клетки имеют одно или два ядра и широкую нечетко очерченную цитоплазму, розоватую при окраске Diff Quik. Эпителиоидные клетки могут быть изолированы или сгруппированы в небольшие группы и даже смешаны с лимфоцитами. Эпителиоидные клетки могут наблюдаться при всех реактивных гиперплазиях, в основном при токсоплазмозе, или при гематологических заболеваниях, или после химио- или лучевой терапии.
    Многоядерные гигантские клетки представляют собой крупные клетки с широкой цитоплазмой и даже дюжиной ядер. Гигантские клетки инородного тела могут быть сгруппированы и содержать фагоцитированный материал. Астероидные тела редко можно увидеть.
    Центроциты представляют собой центрофолликулярные клетки среднего размера с неправильными ядрами и скудной цитоплазмой. Ядра имеют рассеянный хроматин и неправильную форму с небольшими дроблениями. Более глубокие ядерные расщепления лучше видны в гистологических срезах, чем в мазках, где центроциты могут казаться нечетко многоугольными, а не округлыми.Центроциты могут значительно присутствовать при некоторых фолликулярных гиперплазиях, при фолликулярной лимфоме и лимфоме из мантийных клеток.
    Центробласты представляют собой крупные центрофолликулярные клетки со светлыми округлыми ядрами с грубым хроматином и двумя или более краевыми ядрышками.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.