Какие точки мазать звездочкой при простуде: Как я использую бальзам «Золотая звезда» при простуде | Типичная домохозяйка

Содержание

лечение и диагностика симптомов, причин в Москве

Что такое

Сосудистые звездочки – это видимые глазу образования из сосудов, которые чаще всего появляются на ногах. Заметными становятся близко расположенные на поверхности кожи мелкие сосуды из-за расширения стенок сосуда и их истончения: тогда сосуд увеличивает в объеме, и часть крови может проникать сквозь стенки в окружающие ткани. Женщины с такой проблемой сталкиваются в разы чаще, особенно во время беременности и в возрасте старше 40 лет. Мужчины могут заметить у себя сосудистые звездочки в более старшем возрасте. Особое внимание проблеме следует уделить, если дефект сосудов появился в молодом возрасте 20-30 лет – это может свидетельствовать о патологии сосудов.

Причины и профилактика сосудистых звездочек

Чаще всего среди основных причин образования сосудистых звездочек называют наследственную и гормональную (поэтому во время беременности многие женщины сталкиваются с появлением звездочек). Помимо этого, негативное влияние оказывают следующие факторы:

  • ультрафиолет,
  • тепловое воздействие (частое посещение саун и бань),
  • сидячая работа, малоподвижный образ жизни,
  • ношение неудобной обуви или обуви на высоком каблуке,
  • избыточный вес,
  • травмы мягких тканей,
  • прием гормональных препаратов, например, гормональных контрацептивов.

Причины появления не только телеангиэктазий, но и других более серьезных патологий сосудов активно изучаются, специалисты до сих пор не пришли к единому мнению относительно природы их образования.

Профилактика образования сосудистых звездочек носит ограниченный характер и заключается в общих рекомендациях по сбалансированному, насыщенному витаминами питанию, а также в активном образе жизни с необходимой долей физических нагрузок.

Симптомы

Излишне писать о симптомах заболевания, потому как его проявление обычно не вызывает вопросов — мелкие сосуды становятся видны невооруженным глазом. Они могут быть красного или синего цвета, либо поменять цвет от красного до синего ввиду появления в сосуде венозной крови; могут выпирать на поверхности или не прощупываться. Локализуются они чаще всего на нижних конечностях, занимая порой значительную площадь, различаясь по форме рисунка (древовидные, пятнообразные, звездчатые, линейные). Бывают звездочки не только на ногах, но и на лице (особенно на крыльях носа и щеках), на руках.

Иногда звездочки проходят сами без применения какого-либо лечения. К примеру, если появились они во время беременности, то после рождения ребенка скорее всего пройдут сами. Похожий эффект может произойти при прекращении гормонального лечения, на фоне которого образовались звездочки.

Некоторые люди предпочитают не обращать внимания на появившиеся телеангиэктазии, нивелируя их косметический дефект одеждой или косметикой. Действительно сами по себе они не несут угрозы организму. Отношение к данным образованиям с эстетической точки зрения полностью остается на усмотрение человека, но нельзя забывать, что телеангиэктазии могут быть или симптомом, или предвестником более серьезного заболевания. Поэтому лучше обратиться к врачу и пройти обследование.

Диагностика

В наше время некоторые специалисты считают данное заболевание несерьезным, ведь оно несет только угрозу косметического дефекта. Кроме того, пациенты склонны в высокой степени к рецидивам (даже после удаления звездочки, она часто появляется снова) и резистентности к основным методам лечения. Но, в случае если сосудистые звездочки доставляют дискомфорт, пусть даже только с эстетической точки зрения это уже является веским поводом обратиться за квалифицированной помощью. Так же, нужно помнить, что в некоторых случаях появление сосудистых звездочек является симптомом более серьезного заболевания, к примеру, хронической сосудистой патологии, варикозного расширения вен, атаксии-телеангиэктазии, цирроза печени, синдрома Блума, именно поэтому важно правильно обследоваться и исключить вероятность наличия другого заболевания.

Диагностика сосудистых звездочек не является сложной – это вопрос осмотра и опроса пациента. Но для полной картины важно выяснить причину их появления, и нет ли сопутствующего заболевания. Может потребоваться анализ крови, УЗИ, тест на проходимость основных сосудов, консультации с другими специалистами (кардиологом, эндокринологом, гастроэнтерологом).

Поэтому с проблемой сосудистых звездочек изначально лучше обратиться к специалисту в медицинском центре с достаточной лабораторной и диагностической базами.

Лечение сосудистых звездочек

Если никакого сопутствующего заболевания выявлено не было, то ничто не помешает сосредоточатся на устранении косметического недостатка. В настоящее время применяются два основных метода удаления сосудистых звездочек: склеротерапия и лазерная коагуляция.

Склеротерапия применяется и при других сосудистых заболеваниях – особенно при варикозе. Суть этого метода во введении в сосуд специального вещества (склерозанта), который склеивает сосуд и останавливает кровоток в нем. Этот метод невозможно применить для мелких сосудов, поэтому в таком случае врачи удаляют сосудистую звездочку с помощью лазера. Лазерная коагуляция – это воздействие теплом на стенки сосуда – ткани разрушаются, и сосуд исчезает.

К сожалению, ни один из методов не гарантирует отсутствие рецидива. Сосуд может восстановиться, а при возобновлении кровотока звездочка снова может проявиться. С учетом этого врачи призывают ответственно отнестись к рекомендациям по корректировкам образа жизни после операции, минимизации факторов, усугубляющих состояние сосудов – это поможет снизить риск рецидива.

Записаться на прием к специалисту вы можете через специальную форму на сайте или по телефону.

Как ставить пиявки в домашних условиях|постановка пиявок

Рекомендации домашнему гиродотерапевту

Споры, можно лечиться пиявками в домашних условиях или нет, ведутся давно. Основной аргумент тех кто «против» — не имеющий специальных знаний и не прошедший соответствующую подготовку человек не сможет в полной мере оценить показания и противопоказания для гирудотерапии, не владеет методикой лечения при том или ином заболевании, не сможет в полной мере выполнить все правила септики и антисептики.
Если Вы приверженец тех, кто считает, что ничего не возможного в нашем мире нет, настоятельно советуем ознакомиться с нижеследующими правилами.

Правило первое

  Узнайте точный свой диагноз у специалиста. Не ищите подтверждений вашим догадкам в медицинских справочниках, энциклопедиях и интернете. Не диагностируйте себя сами и не слушайте диагнозы, которые ставят вам «всезнающие» родственники, друзья, знакомые. Обратитесь за консультацией к врачу. Если нужно, пройдите обследование.

Правило второе

 Получите соответствующую консультацию специалиста-гирудотерапевта именно по вашему заболеванию.

Правило третье

 В домашних условиях устраивайте себе профилактические курсы гирудотерапии, ставьте пиявок для реабилитации после проведенного курса медикаментозной терапии или лечите заболевании в стадии ремиссии. Острые формы любого заболевания дома лучше не лечить.

Правило четвертое

 Первый курс лечения лучше пройти в специализированном центре у специалиста-гирудотерапевта и при его эффективности повторяйте в домашних условиях. Лечение у специалиста – это прекрасная возможность познакомиться со схемой постановки пиявок, которая подходит именно Вам.

Правило пятое

 Не пытайтесь заставлять медицинскую пиявку садиться на строго определенное место, нужно дать ей возможность самой выбрать место укуса в радиусе 2-3 см от необходимой точки.

Помните: пиявки садятся только на рефлексогенные точки. Но ни в коем случае не сажайте их на вены.
Запомните главное: трудно причинить себе вред с помощью пиявки. Трудно, но можно. Что бы этого не произошло ознакомьтесь с противопоказаниями для гирудотерапии.

Для проведения домашнего сеанса гирудотерапии вам потребуются:

  • Банка с пиявками. Для гирудотерапии используются пиявки выращенные в искусственных условиях. Поэтому для лечения покупайте только сертифицированных пиявок в аптеках.
  • Клеенка или непромокаемая пеленка, которую вы положите под себя: на нее может капать кровь из ранки, либо останется кровавый след от отвалившейся пиявки.
  • Чистая простыня, а также чисто полотенце.
  • Йод.
  • Флакончик из под таблеток или маленькая рюмка.
  • Пакет или сосуд, в который будут помещены использованные пиявки.
  • Перевязочный материал: стерильная салфетка, бинт, непромокаемая салфетка или гигиеническая прокладка, лейкопластырь.
  • Гемостатическая губка, на тот случай, если вы случайно поставите пиявку на кровеносный сосуд и придется останавливать кровотечение.
  • Одноразовые медицинские перчатки.
Перед началом процедуры вымойте руки. Обратите внимание на то, чтобы ваше мыло не было ароматизировано. Пиявки не любят резких запахов. Наденьте одноразовые медицинские перчатки. Возьмите флакончик из под таблеток или маленькую рюмку и поместите в него пиявку. Аккуратно поднесите его к месту, на которое вы будете ставить пиявку и быстрым движением переверните. Следите за тем, чтобы края флаконы были плотно прижаты к вашей коже. Придерживайте флакон в перевернутом положении до тех пор, пока не увидите, что пиявка присосалась к коже. Определить это просто: по легкому прокалыванию в месте присасывания и своеобразным движениям пиявки. Осторожно уберите флакон. Количество пиявок, которое ставят за один сеанс зависит от методики лечения вашего заболевания и телосложения. В среднем ставится одна пиявка на 10 кг массы тела.
  Длительность процедуры от 20 минут до 1 часа. Не стоит дожидаться когда все пиявки окончательно удовлетворят свою кровожадность, дайте им понюхать смоченный йодом или этиловым спиртом тампон. Можно сделать это после того, как отвалиться первая пиявка, можно – спустя 20-30 минут после того как они присосались. Пиявки тут же неохотно отползут в сторону.
  Отвалившихся пиявок соберите в пакет и хорошо завяжите его, чтобы сытые пиявки не разбежались по всему дому, и займитесь обработкой ранки.
  Обработайте ранку йодом и накройте одноразовой стерильной салфеткой или сложенным в несколько слоев стерильным бинтом. Сверху приложить непромокаемую салфетку (детскую одноразовую пеленку) или гигиеническую прокладку и закрепите лейкопластырем. Повязку менять по мере промокания. Обычно кровь останавливается через пять или шесть часов. После того как кровотечение остановилось наложите облегченную бинтовую повязку на сутки.
Использованные пиявки, которые лежат у вас в пакете необходимо уничтожить. Пиявки – это лекарство одноразовое. В лечебных учреждениях использованных пиявок заливают раствором хлорамина, а затем утилизируют. В домашних условиях раствор хлорамина можно заменить любым хлорсодержащим средством (белизна и др.).

У многих пациентов спустя несколько часов после сеанса места укуса пиявки начинают сильно чесаться. Ни в коем случае не трогайте ранку руками и не расчесывайте ее. Если она очень сильно чешется можно аккуратно нанести вокруг ранки масло чайного дерева или крем с экстрактом пиявки «гирудалгон».

Следующий сеанс проводят через 3 – 4 дня. На курс 6 – 7 сеансов.

Реабилитационный массаж после коронавирусной инфекции COVID-19 (Ковид) и пневмонии

COVID-19 стремительно ворвался в нашу жизнь, изменив привычный уклад. Особенно сильно перемены, связанные с новой коварной болезнью, коснулись различных областей медицины. Массажная терапия играет очень важную роль в процессе восстановления организма, пострадавшего от Ковид-19. Медицинский центр «Эс Класс Клиник» оказывает услуги по проведению курсов массажа после коронавирусной инфекции COVID и пневмонии в Ульяновске.

Какие изменения происходят в легких при COVID-19

По своему характеру эта болезнь – один из видов респираторно-вирусных инфекций, которая может протекать с различными осложнениями. Наиболее агрессивной формой является пневмония. У человека, инфицированного вирусом SARS-CoV-2, в дыхательной системе развиваются воспалительные процессы. Даже при течении в бессимптомной форме, на дыхательную систему и иммунитет обрушивается большая нагрузка, что не может не сказаться негативно на состоянии здоровья.

При попадании в легкие вирус может спровоцировать развитие воспаление по вирусному или вирусно-бактериальному типу. В этом случае основной удар принимают на себя альвеолы – мельчайшие пузырьки, являющиеся важной частью легочной системы. Они несут ответственность за насыщение кислородом крови и удаление углекислого газа. Разрушение альвеол влечет дестабилизацию газообменных процессов и приводит к скапливанию воспалительного экссудата в альвеолах. В результате на пораженных участках формируется соединительная фиброзная ткань, за счет которой жизненный объем легких сокращается, они не могут полноценно функционировать, что может привести к инвалидности или летальному исходу.

Особое внимание следует уделить составлению тщательно продуманного плана реабилитации, позволяющего достичь полноценного восстановления. Реабилитационный массаж после COVID-19 (Ковид) и пневмонии – один из самых эффективных методов восстановления нормальной работы дыхательной системы и других жизненно важных органов.

Польза массажных процедур

Мероприятия по восстановлению здоровья необходимо начинать как можно раньше – только это поможет достичь максимального эффекта. Реабилитационный массаж после COVID-19 (Ковид) и пневмонии – неотъемлемая часть лечения, которая способствует:

  • эффективному рассасыванию воспалительных очагов;
  • стимуляции процесса кровоснабжения и лимфотока;
  • стабилизации вентиляции легких;
  • стимуляции отделения и выведения мокроты;
  • укреплению мышц, в том числе и дыхательных.

Не рекомендуется прибегать к массажным процедурам на стадии острой фазы! Также следует отметить эффективность специальных дыхательных упражнений, положительно влияющих на работу нервной системы и повышающих уровень вентиляции дыхательных путей.

Особенности массажа после коронавирусной инфекции COVID и пневмонии

Основной массажный прием, входящий в комплекс сеанса – движения, вызывающие вибрацию. В результате существенно улучшается кровоснабжение, дыхание стабилизируется, а процесс отхождения мокроты значительно активизируется. Наиболее доступным и простым вариантом реабилитационного массажа после COVID-19 (Ковид) и пневмонии является похлопывание ладонями по спине в течение нескольких минут.

В более тяжелых случаях проработка начинается с грудины с постепенным переходом на области спины и шеи, после чего массажист возвращается к груди. Этот вариант направлен на стимуляцию оттока жидкости из всех отделов дыхательных путей. Положительное действие на состояние пациента оказывают и разогревающие движения.

Массаж после коронавирусной инфекции COVID и пневмонии требует от врача особой аккуратности и осторожности, так как излишнее усердие может привести к нежелательным результатам.

Эффективность массажа в борьбе с психологическими проблемами после коронавирусной инфекции COVID и пневмонии

Такое сложное заболевание как COVID – сильный стресс не только для дыхательной, но и для нервной системы. Больному приходится много пережить в результате интенсивной терапии, требующей госпитализации. У многих пациентов может развиться постреанимационный синдром, вызывающий повышенную тревожность, плохой сон и другие психосоматические симптомы.

Могут ли в таком случае помочь массажные сеансы? Безусловно, да! Ведь спокойные и уверенные прикосновения рук профессионального массажиста обладают успокаивающим и умиротворяющим эффектом. Именно такой массаж мы предлагаем пройти выздоравливающим после коронавирусной инфекции COVID и пневмонии в Ульяновске. Записаться на процедуры в медицинский центр «Эс Класс Клиник» можно на нашем сайте или по телефону +7 (8422) 50-54-63.

Цены

При покупке курса 12 сеансов реабилитационного массажа после Ковид-19 и воспаления легких — в подарок 2 сеанса дополнительно.

Уникальные свойства бальзама «Звездочка» — Irzeis — ЖЖ

Лет 20-30 тому назад бальзам «Золотая звезда» (вьетн. Cao Sao vàng [Као Шао Ванг] англ. Golden star balm), или как его еще называют, «Звездочка», был неизменным гостем в аптечке каждого жителя нашей страны.

Не многие знают, что в состав этой чудодейственной мази входит 4 вида натуральных масел: гвоздичное, коричное, мятное и эвкалиптовое.

Теперь более подробно об ингредиентах, входящих в состав «Звездочки»:

Восточный бальзам «Звездочка» создан из комбинации экстрактов целебных трав и эфирных масел (применяемых в традиционной восточной медицине) и усилен муравьиной кислотой. Муравьиную кислоту используют с незапамятных времен для избавления от болей различного происхождения и исцеления многих недугов.

  • Ментол кристаллический — 658 мг
  • Камфора — 124 мг
  • Мятное масло — 258 мг
  • Эвкалиптовое масло — 65 мг
  • Гвоздичное масло — 5 мг
  • Коричное масло — 6 мг
  • Муравьиная кислота
  • Вазелин — 184 мг

 ❧ Ментол кристаллический

Ментол обладает рядом свойств, делающих его возможным применение в фармации:  обезболивающее, антибактериальное, болеутоляющее, успокоительное, спазмолитическое и антисептическое,  жаропонижающее, отхаркивающее и антиангинальное, вызывает рефлекторное расширение коронарных сосудов, устраняет спазм бронхов, сосудов головного мозга.
Предназначенных для лечения простуды, ревматизма, для снятия мышечных болей от усталости и пр. Кристаллический ментол  явлется важным компонентом «Звёздочки»  при простудных заболеваниях верхних дыхательных путей, при головной боли простудного характера, при прострелах в голове, при мигрени, а также при невралгиях, артралгиях и миалгиях.

Охлаждающее действие ментола на кожные рецепторы позволяет снизить раздражение и зуд, например, при аллергии. Способствует снижению болезненных реакций, снижает воспалительные процессы.
Обезболивающему действию ментола предшествует ощущение холода, лёгкое жжение и покалывание.

 ❧ Эвкалипт (эвкалиптовое масло)

Давно доказано, что масло эвкалипта оказывает стимулирующее влияние на рецепторы слизистых оболочек, а в сочетании с другими эфирными маслами является прекрасным противовоспалительным и антисептическим средством. Эфирное масдо эвкалипта хорошо помогает при ингаляциях — быстро и эффективно прочищает носовые ходы.

Благодаря эвкалиптовому маслу «Звездочка» стимулирует чувствительные нервные окончания и незаменима при головных болях и простудных заболеваниях. Ее аромат великолепно помогает как средство борьбы с комарами — «кровососы» на дух не переносят эвкалиптовый запах.

Об удивительных свойствах эвкалипта написано много. Это средство очень хорошо зарекомендовало себя при головных болях,кашле, воспалительных заболеваниях верхних дыхательных путей, укусах насекомых, при расстройстве пищеварения и болях в животе.

 ❧ Мята (масло мяты перечной)

Эфирное масло мяты перечной дистиллируется паром из листьев и цветущих верхушек растения mcntha piperita. Имеет ярко выраженный запах ментола с травянистым оттенком.

Масло мяты — прекрасный адаптоген, оно способствует нормализации функций организма и его устойчивости к внешним воздействиям. Некоторые биологически активные точки рекомендуется массировать именно с маслом мяты.
При простуде, гриппе, синусите масло мяты перечной хорошо прочищает дыхательные пути.

 ❧ Гвоздика (гвоздичное масло)

Противовирусные и антибактериальные свойства гвоздичного масла можно сравнить разве что с лучшим хвойными антисептиками. Оно прекрасно подходит для профилактики распространения, ускоряет выздоровление во время вирусных и простудных заболеваний, при этом свойства гвоздичного масла эффективны как в случае воздушно-капельных заболеваний, так и кишечных инфекций.

Также его применяют для лечения серьезных повреждений — синяков, ран, ожогов, фурункулеза, угревой сыпи, гнойничковых поражений, порезов, чесотки.

 ❧ Корица (коричное масло)

Коричное масло высшего качества получают из молодой коры цейлонского коричного дерева (cinnamonum zeilanicum), дикорастущего и культивируемого в Шри-Ланке, а также на Сейшельских островах и Мадагаскаре.

Коричное масло является одним из сильнейших антисептиков, применяемых в гомеопатии. Дает прекрасный эффект не только при терапии простуды, гриппа, вирусных заболеваний, но и некоторых кожных инфекций. Целебное действие корицы проявляется в стимуляции кровообращения, что особенно полезно при переохлаждении, простудах, болезнях суставов и позвоночника.

 ❧ Муравьиная кислота

Натуральная муравьиная кислота содержит большое количество органических компонентов цинка. А цинк, как известно, является антиоксидантом и иммуностимулятором. Получается, что по своему действию натуральная муравьиная кислота аналогична таким широко применяемым в медицине средствам, как витамин С или препараты с женьшенем.

Муравьиная кислота обладает болеутоляющим, противовоспалительным, согревающим и проникающим тонизирующим свойствами. Благодаря этому компаненту бальзам «Звёздочка» и используется  для снятия суставных болей различного происхождения (артрит, артроз, остеохондроз, ревматизм) и оказания восстанавливающего и тонизирующего действия на структуру мышц и суставов.

 ❧ Камфара

Камфара (камфара) (camphor) представляет собой твердый летучий кетон с характерным приятным запахом. Она обладает свойством снимать различные воспаления и согревать.
Рекомендуют применять при ревматических болях, артрите, артрозе, ишиасе, воспалениях мышц и суставов. При нанесении на кожу, сначала охлаждает зону поражения, а затем нагревает ее, увеличивая приток крови. Способна стимулировать периферийные нервные окончания, что, в свою очередь, помогает уменьшить боль.

Помогает избавиться от кашля при простудных и вирусных респираторных заболеваниях и затяжного насморка.

 ❧ Вазелин

Вазелин — это однородная, тянущаяся короткими нитями вязкопластичная масса без запаха, белого или желтого цвета.

Эфирные масла успешно используются в гомеопатии при лечении травами и, к сожалению, слишком редко — в классической фармацевтике. Эфирные масла легко проникают под кожу и проявляют свое действие, связываясь с жирами, входящими в состав клеток.
При насморке принято натирать «Звездочкой» под носом; при головной боли – наносить на виски; при комариных укусах, сопровождающихся неприятным зудом – несколько раз в день мазать кожу для скорейшего заживления и снятия неприятных ощущений.

Во Вьетнаме — откуда родом «Звездочка» — это средство считается достаточно эффективным и используется при многих заболеваниях. Но используют его вьетнамские врачи с учетом точек акупунктуры — активных точек на теле человека, в которые втирается небольшое количество бальзама. Причем для каждого заболевания применяются разные сочетания точек.

При домашнем лечении с бальзамом «Золотая звезда» можно использовать простой метод растирания больного места или акупунктуру определенных точек.

Для растирания на кожу следует наносить небольшое количество бальзама и интенсивно втирать до полного впитывания.

Особенно эффективно втирание препарата кончиками пальцев в определенные акупунктурные точки. Для этого, слегка намазав кожу бальзамом в определенной точке, нужно без напряжения массировать ее до тех пор, пока кожа не порозовеет. Подобный массаж снимает боль и улучшает общее самочувствие.
Однако следует сказать, что в случаях тяжелых запущенных заболеваний такой массаж как самостоятельный, обособленный способ лечения не принесет особого эффекта, поэтому его лучше всего включить в общий курс лечения.

  Перед тем как пользоваться бальзамом проверьте, нет ли у вас аллергии на компоненты.

  

✅ При укусе насекомыми бальзам наносят непосредственно на место укуса. Больное место охлаждается, а боль и зуд на некоторое время отступают. Следует помнить, что бальзам категорически нельзя использовать при различных кожных заболеваниях, а также наносить на открытые раны.

   ✅ Если болит голова, то «Звездочкой» нужно втирать бальзам «Звездочка» в виски и кожу над бровями на протяжении 20 секунд с легкими нажимами.Но нужно проявлять осторожность и следить, чтобы бальзам не попал в глаза.

   ✅ При ушибах, растяжении связок или болях в мышцах, мазь втирают тонким слоем в больное место.

   ✅ Если вас укачало то втирание мази в виски и затылок облегчит состояние. То же самое следует делать при бессоннице или затяжной депрессии.

   ✅ При зубной боли. Зубная боль — это симптом, требующий обязательного обращения к стоматологу. Но сильный болевой приступ также поможет снять бальзам «Золотая звезда», что, конечно, не отменяет визита к врачу, когда боль пройдет. Как обезболивающее мы хотим предложить вам следующий точечный массаж.

Найдите точку, расположенную в середине ямки под скуловой костью впереди от отростка верхней челюсти. Точку массируйте интенсивно против часовой стрелки в течение 1-2 минут. Далее массируйте ещё 3 точки.

Для облегчения боли можно массировать также точку, указанную на рисунке ниже. Мочку зажмите большим и указательным пальцами, смазанными бальзамом «Звездочка», и интенсивно массируйте. Боль в скором времени должна прекратиться.

   ✅ «Звездочка» неплохо помогает при насморке. Однако для начала хорошо бы выяснить, чем вызван ринит, не является ли он проявлением аллергии. Если же вы уверены, что простудились, и простудились сильно, тогда прибегните к следующему эффективному средству. Возьмите небольшое количество бальзама «Звездочка» и плавными движениями разотрите грудь, не касаясь сосков. Процедуру можно повторять несколько раз (3-4 раза) в сутки. При хронических простудных заболеваниях полезно производить ежедневное растирание спины и груди с небольшим количеством бальзама.

От простуды бальзам «Звездочка», конечно же, не спасает, но в сочетании с массажем спинки носа облегчает дыхание при насморке. Чтобы провести массаж по всем правилам, найдите указательными пальцами две симметричные точки там, где спинка носа переходит в скуловые кости (при надавливании в этих местах вы испытаете распирающее, чуть болезненное ощущение). Здесь находятся рефлекторные зоны, раздражение которых очищает носовые ходы.
Затем нанесите на кончики пальцев немного бальзама и в течение 2-3 минут вращательными движениями массируйте данные точки, то усиливая, то уменьшая давление. Повторяйте 5-6 раз в день. Возможно, уже на второй день насморк исчезнет.

   ✅ Ангина — это поправимо. Точка, отмеченная на рисунке, находится несколько выше адамова яблока, в складке шеи на уровне подъязычной кости. Смажьте данное место бальзамом «Звездочка» и интенсивно массируйте в течение 15-30 секунд.

Вылечить полностью болезнь можно всего несколькими нажатиями.

      ✅ Простудные заболевания. Для профилактики гриппа на указательный палец нанесите небольшое количество препарата «Звездочка» и произведите втирание в кожу вокруг носа, в подчелюстной и затылочной областях, где сосредоточено большое количество биологически активных точек. Можно втирать в надбровья.
Втирание имеет не только лечебный, но и профилактический эффект. Через некоторое время процедуру следует повторить.

А 6 точек на рисунке ниже помогают эффективно справиться гриппом.

  Важная точка, расположенная на внешней стороне ладони между большим и указательными пальцами очень эффективна для повышения иммунитета и мобилизации внутренних сил организма в борьбе с простудными заболеваниями, но она, не забудьте, противопоказана при беременности.

На начальной стадии гриппа хорошо помогает следующая процедура: намажьте бальзамом «Звездочка» ступню ноги, но не всю, а только пятку и под пальцами, большой палец и над пальцами. А потом на стопе от большого пальца необходимо провести бальзамом к пятке.
Затем необходимо надеть грубые шерстяные носки и походить в них. Кроме того, необходимо обильное питье, очень полезны морсы.

Существует один известный способ вылечить простуду за короткий срок. Кстати, средство это уже считается народным. Оно действительно очень хорошо помогает, в чем я убедилась на собственном опыте. Надо легкими массирующими движениями натереть горло бальзамом «Звездочка», затем завязать горло платком и весь вечер пить липовый чай с медом в больших количествах. Уже на следующее утро вы почувствуете, что совершенно выздоровели.

  ✅ Шейный остеохондроз

При остеохондрозе есть хорошее средство — массаж. Однако массаж обязательно должен производить специалист. Хочу предложить средство, которое вполне вам доступно. Воспользуйтесь рисунком и найдите точку, расположенную на тыльной поверхности кисти, между пястно-фаланговыми суставами второго и третьего пальцев.
В найденную точку вотрите бальзам «Звездочка» и массируйте в течение двух минут. Это средство помогает при болезненных ощущениях в шее при остеохондрозе.

Особенно полезен подобный массаж тем, кто ведет малоподвижный образ жизни, кому, к примеру, долгое время приходится проводить за компьютером.

   ✅ Для профилактики и лечения радикулита. Люмбалгия — это приступообразная резкая боль в пояснице, обусловленная чаще всего остеохондрозом поясничных межпозвонковых дисков. Возникает обычно внезапно после какого-либо движения позвоночника (сгибании туловища вперед или повороте в сторону).

Снимают боль физический покой, горизонтальное положение позвоночника. Значительное облегчение дает и массаж с бальзамом «Золотая звезда».

Найдите точку, расположенную в центре подколенной ямки, изображенную на рисунке, и с силой втирайте в нес бальзам «Звездочка». Далее нужно промассировать и другие точки.  Проводите интенсивный массаж точек со «Звездочкой» против часовой стрелки в течение 3-4 минут.

Ниже приведён рисунок, на котором изображена точка, также помогающая снять болевые ощущения при радикулите (ишиасе). Расположена данная точка  — в углублении между наружной лодыжкой и ахилловым сухожилием у верхнего края пяточной кости. Точку интенсивно массируйте с бальзамом «Звездочка» в течение 15-30 секунд.
Надавливайте на нее кончиком большого пальца в направлении внутрь и вперед. Одновременно сжимайте голень остальными пальцами с противоположной стороны.

✅ Боль в колене. Используйте эти точки чтобы снять боль в коленном суставе.

Если точка при акупунктуре выбрана правильно, при лёгком и нерезком надавливании на неё кончиками пальцев возникает ощущение боли.

Точечный массаж проводится одним пальцем. Определив по описанию и рисунку место расположения точки, нажмите слегка согнутым пальцем. Постепенно увеличивая давление, добейтесь слабой болезненности и массируйте точку, совершая небольшие по амплитуде колебательно-вращательные движения без смещения пальца по коже. Обычно на точку надавливают подушечкой большого или среднего пальца.
Ни в коем случае не надавливайте на акупунктурную точку ногтями.

Можно сразу втирать в точку бальзам «Звездочка», а можно провести процедуру массажа сухим пальцем, а сразу по окончании сеанса массажа смазать точку небольшим количеством вьетнамского препарата.

Ингаляция с бальзамом «Золотая звезда»

Кроме того, бальзам используют для ингаляций. Ингаляции делают либо с помощью специального ингалятора, либо просто бросают немного мази в кипяток, и вдыхают ароматный пар.

Показания к применению ингаляций: острые и хронические заболевания верхних дыхательных путей, бронхов и легких; профессиональные заболевания гортани, верхних дыхательных путей, бронхов и легких; острые и хронические заболевания среднего уха и околоносовых пазух; простуда, респираторные, аденовирусные инфекции в остром и подостром периодах; обструктивные синдромы, ларингоспазмы, бронхиальная астма, профилактика осложнений в послеоперационном периоде.

Ингаляции со «Звездочкой» уменьшают гиперемию слизистой оболочки носа, гортани, трахеи и бронхов, уменьшают вязкость слизи, разжижают и ускоряют ее эвакуацию, усиливают деятельность мерцательного эпителия, способствуя восстановлению нормального состояния слизистой оболочки дыхательных путей, уменьшают сухость слизистых оболочек верхних дыхательных путей.

При гриппе, ангине, любых воспалениях верхних дыхательных путей рекомендуется добавить в кипящую воду (500 мл кипятка) немного бальзама «Золотая звезда» (количество, равное по объему спичечной головке), размешать и, накрывшись полотенцем, вдыхать его испарения в течение 15-20 минут. Эфирные масла, содержащиеся в нем, расширяют сосуды, снимают воспалительные процессы, прочищают дыхательные пути и оказывают мощное антибактерицидное действие. Такую ингаляцию нужно проводить 2 раза в день — утром и вечером. Особенно действен этот способ в сочетании с массажем акупунктурных точек.

Можно сделать следующую ингаляцию — на дно чайного блюдца мазнуть бальзам «Звездочка», присыпать содой и полить крутым кипятком, глубоко вдохнуть.

   ✅ Аромотерапия. Хорошо использовать «Звездочку» и для проведения сеансов ароматерапии. Для этого в аромалампу помещают капельку бальзама, заливают водой и поджигают свечу.
 Летучие эфирные масла быстро испаряются и при вдохе попадают внутрь организма, а также раздражают миллионы чувствительных клеток, выстилающих носовые ходы. Эти клетки посылают сигналы непосредственно в мозг и влияют на эмоции и нервную регуляцию функций всех органов. Поэтому следует знать, что, например, при ингаляции бальзамом «Звездочка» эфирные масла одновременно воздействуют и па физическое, и на психическое самочувствие человека. То же самое происходит, если бальзам втирать в биологически активные точки, находящиеся на теле.   

Также хочу добавить, что эфирные масла, входящие в состав «Звездочки», — это непревзойденное средство от кровососущих насекомых. Мухи и комары чутко реагируют на запахи. Особенно отпугивает комаров аромат гвоздики и эвкалипта. При использовании для защиты  достаточно смазать открытые участки кожи или положить на источник огня — в камин, костер, на свечку или на разогретую сковородку.
Известно, что запах камфары, также входящей в состав бальзама «Золотая звезда», способен отпугивать не только комаров, но и мух и даже клещей.

Меры предосторожности и особые указания

Предназначен только для наружного применения. Нельзя допускать попадания бальзама в глаза, на слизистые оболочки, на открытую раневую поверхность.
После нанесения мази на кожу наблюдается локальное повышение температуры и покраснение кожи, одновременно появляется ощущение тепла и жжения, которое в течение одного часа постепенно исчезает. При нанесении мази на кожу не должны возникать болевые ощущения. В случае возникновения боли, отека или высыпаний на коже необходимо прекратить применение мази и немедленно обратиться к врачу.

  Имеются данные о возможности развития побочных реакций при применении бальзама. При появлении аллергических реакций необходимо смыть остатки препарата с кожи тёплой водой с мылом, прекратить его использование на некоторое время.
В случае попадания бальзама на слизистые оболочки следует удалить мазь при помощи влажных салфеток и промыть обильным количеством воды.

Противопоказания  к применению бальзам звездочки:

  • Аллергические реакции. Нужно помнить, что бальзам «Золотая Звезда» может вызвать аллергическую реакцию, ведь все его компоненты являются сильными аллергенам. В частности, это может проявляться покраснением кожи в местах применения.
    Для того, чтобы предотвратить возможные неприятности, перед использованием бальзама сделайте тест на чувствительность. Для этого небольшое количество бальзама нанесите на кожу запястья с внутренней его стороны. Если через некоторое время вы почувствуете жжение и зуд, а кожа в месте нанесения мази покраснеет, то срочно все смойте и не используйте больше этот препарат. Скорее всего он вам не подходит.
  • Детский возраст. Также с осторожностью следует пользоваться бальзамом детям и подросткам. Причем для детей до двух лет он запрещен полностью. Да и детям более старшего возраста пользоваться бальзамом можно только под надзором взрослых. Ребенок вполне может захотеть попробовать мазь на вкус, или случайно втереть ее в глаза.
  • Воспаление кожи (ранки,фурункулы). Следует только иметь в виду, что, несмотря на минимум противопоказаний, от бальзама «Звездочка» все-таки следует отказаться тем, кто страдает гнойничковыми заболеваниями кожи. Не спешите использовать бальзам и в том случае, если повредили кожу — это еще больше усугубит проблему.
  • Беременность. Беременные женщины также нередко используют «Звездочку» считая ее абсолютно безопасной для будущего ребенка. Конечно, такого вреда как синтетические препараты бальзам нанести не может. Вредной для малыша химии в составе бальзама нет. Но, все же лучше проявить осторожность.
    Дело в том, что главным противопоказанием к препарату является излишняя чувствительность к компонентам из которых он состоит. Что же касается беременной женщины, то реакцию ее организма предусмотреть порой невозможно. Так что если вы находитесь в положении, то перед тем, как воспользоваться «Звездочкой» просто понюхайте ее, и если запах вам покажется резко неприятным, то лучше не используйте совсем. Скорее всего, на данный момент, это средство вам не подходит.

Также не рекомендуется натираться вьетнамским бальзамом от корней волос до мозольных ороговелостей на ногах. Помните, все, что не в меру — во вред! Да и лечебного эффекта от такого натирания не ждите — бальзамом следует пользоваться более мудро и обязательно знать, — куда и зачем его втирать.
И не забывайте обязательно мыть руки после использования бальзама!

В случае приема мази внутрь необходимо немедленно обратиться к врачу. При случайном приеме препарата внутрь симптомы передозировки включают желудочно-кишечные (тошнота, рвота, диарея, боли в животе) и неврологические расстройства (головная боль, головокружение, ощущение жара/приливы, судороги, угнетение дыхания и кома). Лечение симптоматическое.
При передозировке не следует вызывать рвоту из-за рисков, связанных с последующей ингаляцией камфоры и развитием ларингоспазма у детей младшего возраста, который может привести к летальному исходу.

Как открыть бальзам «Звездочка»

Существует несколько способов, но отмечу сразу, что сила здесь не поможет.

1. Зажмите низ баночки 3 пальцами одной руки, а другой крутите крышечку туда-сюда, при этом тяните вверх.
2. Покатайте бальзам по какой-нибудь поверхности (например, стола). Через какое-то время, крышечка сама откроется.
3. Подденьте вверх баночки ножом с тонким лезвием.

Бальзам «Звездочка» следует хранить в сухом прохладном, защищенном от света месте, при температуре от 15 °С до 25 °С плотно закрытым.

Хранить в местах, недоступных для детей!

Срок годности препарата — 5 лет.

Обязательно при покупке бальзама «Золотая звезда» обращайте внимание на дату изготовления и срок годности. Не использовать по истечении срока, указанного на упаковке.

Различные формы выпуска разработаны исключительно для удобства применения средства при наличии различных симптомов.

  • Карандаш для ингаляций хорошо справляется с симптомами простудного ринита и других заболеваний носоглотки.
  • Жидкий бальзам Звездочка лучше всего использовать для проведения паровых ингаляций.
  • Обычный бальзам универсален, но больше всего подходит для растираний и точечных нанесений на кожные покровы.


***
Бальзам «Звездочка» вполне имеет право на существование. Проверенное десятилетиями средство — пусть и не панацея, однако свои функции выполняет достойно, к тому же не опустошает кошелек, как большинство современных средств.
по материалам eko-jizn.ru, ozvezdochke.narod.ru, takprosto.cc

 

Смотрите также:

Если нос не дышит. Массаж пазух носа

Точечный массаж победит простуду и головную боль

Как остановить начинающуюся простуду

Оригинал записи и комментарии на LiveInternet.ru

Вьетнамский Бальзам Звездочка Кривой Рог — Избранное — Каталог статей

Адрес: г. Кривой Рог, ул. Всебратская, 2/58а

Трансформаторы

Далека страна Вьетнам, в ней — придумали бальзам…

Неприятная такая боль-зараза головная. А какая боль самая распространенная? Конечно же, головная. Охарактеризовать эту «неприятность» можно двумя словами: «Голова болит». В них — и диагноз, и симптом. А вот причины возникновения этого вида болевых ощущений, до того многообразны, что для описания их не хватит места на страницах газеты. Также многообразны и методы избавления от головной боли. Так, например, кировоградцу Анатолию Петровичу Беденко помогает массаж. Причем массаж не простой, а «золотой». Недаром вьетнамский бальзам еще и «золотой звездочкой» называют. Вот что рассказал Анатолий Петрович: «Когда у меня начинается головная боль, то сжимаю пальцами переносицу, и боль очень часто отступает. Только не надо давить долго — достаточно минуты. Если не помогает, массирую виски или пользуюсь методом из арсенала восточной медицины — надавливаю кончиками пальцев на две точки, расположенные в теменной части головы. Найти их нетрудно: во-первых, они расположены в небольших ямочках, во-вторых, при нажатии отзываются болью — биологически активные точки как бы «кричат», недаром на Востоке их «глашатаями» называют. У моего метода и изюминка есть: для большего эффекта нужно слегка смазать активные зоны вьетнамской «звездочкой».

А Мария Сергеевна Маковей из Винницы с определенного времени «звездочку» применять перестала, хотя долгое время от головной боли только этим бальзамом и спасалась. Вот только резкий запах ее всегда донимал. Как она сама пишет: «Если честно, то в последнее время у меня на «звездочку» вообще появилась особая чувствительность (а проще — непереносимость). Но затем посоветовали мне готовить и применять наше средство, исконное, которое более доступно, и что самое главное не имеющее такого специфического запаха, как вышеуказанный бальзам…»

Рецепт, который посоветовали Марии Сергеевне, действительно очень прост как в приготовлении, так и в применении. Для этого вам понадобятся всего три простых компонента, три масла (машинное, лавандовое и мятное), которые необходимо смешать в пропорции 3:3:1. Да и применение смеси нехитрое — втирать ее в виски и затылок по росту волос. «Хороша «звездочка», только наше исконное средство не хуже!» — резюмирует Мария Сергеевна. И я ей верю!

«Я вам быстро помогу», — точка говорит Хэ-Гу. Ну и ничего, что в предыдущем абзаце наши читатели полярно противоположные мнения высказали. Возможно, втирание бальзама в область лица приятностей у многих не вызывает. А вы вот попробуйте и вотрите вьетнамскую «звездочку» в точку «скорой помощи» Хэ-Гу, расположенную между большим и указательным пальцами. Что это дает? Уменьшается головокружение, и несколько снижается давление. Думаю, ни у кого между пальцами нос не находится?

«Звездочка» — простое чудо для лечения простуды. Пожалуй, еще одним из широко известных случаев применения вьетнамского бальзама есть лечение простудных заболеваний. И способов тут не счесть. Вот лишь некоторые из них. Читайте выдержки из писем….

Наталья Никифоровна Юркова (29017, г.Хмельницкий, ул.Заречанская, 22/4, кв. 24): «…Как-то осенью я приехала во Львов в командировку. Ночью выпал снег, а я в туфельках и, естественно, простудилась. Бронхи забились мокротой. Помогла ингаляция из чайника. Варила в чайнике очистки картошки, клала туда питьевой соды и со спичечную головку вьетнамской «звездочки». Процедуру делала перед сном. На носик чайника надевала трубочку из бумаги и через нее вдыхала горячий пар. Дышала этими парами, затем укрывала спину пуховым платком и ложилась спать».

Владимир Янович Крайзель (21001, г.Винница, ул.Привокзальная, 2/1, кв. 1): «Хочу рассказать, как из самых простых подручных средств самому можно ингалятор для лечения простудных заболеваний изготовить. Следует взять верхнюю часть разрезанной пополам полуторалитровой пластмассовой бутылки и вставить в горловину плотно прилегающую трубку. Сверху надеть «загубник» — отрезанную наискось верхнюю часть пластмассовой трехсотграммовой бутылки. Если нет подходящей трубки, то можно соединить две части бутылок, обмотав снаружи крепко липкой лентой. В полуторалитровой бутылке проделать гвоздем или ножницами два отверстия для подсоса воздуха. Ингалятор готов. Для приема ингаляции следует в литровую стеклянную банку налить кипятка, бросить туда кусочек вьетнамской «звездочки» или другого эфирного лекарства (можно ароматных трав — душицы, чабреца, полыни, зверобоя и т.д.), надеть на банку ингалятор и дышать носом при насморке, а ртом при ангинах или кашле».

Вот рецепт! Ему бы дал «золотую» я медаль! И автор этого рецепта — Марина Анатольевна Чапала из Кривого Рога. Догадайтесь с трех раз, что она придумала? Ни за что не угадаете. А придумала она — молоко с… вьетнамским бальзамом:

«…Холодный ветер и инфекции, как всегда, делают свое «черное» (вернее «простудное») дело. В прошлом году вся моя семья переболела гриппом — были и кашель, и насморк, и головная боль. В общем, пережили мы все «прелести» прошлогодней эпидемии. Мама от кашля пила настой мать-и-мачехи с березовыми листьями — и кашель как рукой сняло. А вот мне это лекарство не помогло. Чувствую, совсем кашель замучил. Перешла на таблетки да сиропы — снова результата нет. Тогда от отчаяния взяла вьетнамскую «звездочку» и нос ею помазала — насморк прошел, а кашель все равно мучает. И вот что я придумала. Вскипятила полкружки молока, на кончике ножа (совсем чуть-чуть) добавила вьетнамского бальзама, положила 0,5 ч.л. меда и все выпила. На ночь ту же самую процедуру повторила. После этого легла в постель, хорошенько укуталась, чтобы тело пропотело, и на следующий день была здорова. Вместе с потом вся хворь вышла. Так я свой грипп и вылечила».

ПСОРИАЗ. помогите..как справится с обострением. — Вернуться .

раньше псориаз был только на коже головы. под волосами.не заметно.

нельзя, это как зубы, чем больше тянешь — тем больше лечения потом. с

головы. только вот промывать сложно голову,после масла !

www.tatosha.ru/index.php?topic=6912.0

И хондроз, али артрит пред «звездой» не устоит. Нет, разумеется, этот бальзам, как сказал бы немец на русском: «Не есть лекарство». А все-таки первую помощь — нет, да и окажет! Вот как снимает приступы остеохондроза Николай Маркович Чередник из Одессы: «Массирую медицинской банкой область шеи или позвоночник, а после втираю вьетнамскую «звездочку». После чего лежу на спине 40 минут, и все проходит!»

А Георгию Викторовичу Глушко из Хмельницкого «озарение» во сне пришло (ну, почти как Дмитрию Менделееву его таблица приснилась). Почитайте-ка, что он пишет: «Мне было двадцать пять, когда коленные чашечки болеть начали. Положили в больницу, пролежал там больше месяца, всего искололи до такой степени, что не мог с кровати встать, а результата никакого. Тогда я решил сбежать. Вышел на улицу, поймал такси, приехал домой, попросил у Господа прощения и спать лег. Ночью мне приснился сон, что нужно взять вьетнамскую звездочку, хорошо обмазать колени, покрыть плотной бумагой, сверху целлофаном, обмотать шерстяным платком и бинтом завязать. Делать так на ночь. На следующий день эту процедуру я опробовал. Сделал 2-3 раза и начал бегать. Слава Богу!»

В унисон ему рассказ Галины Николаевны Ляшенко из Смелы, которая для своих компрессов достойную замену целлофану нашла. «Вьетнамская звездочка и наш украинский лопух с успехом лечат ревматоидный артрит! — утверждает автор. И далее. — …Сейчас мне 65 лет, слава Богу, хожу. А в сорок два у меня отнялась левая нога, да так болела, что ночами покоя не было. В постели даже перевернуться сама не могла, это мне муж помогал выполнять. Целый месяц так было, а потом одна бабка подсказала мужу, чтобы тот натирал мне ногу вьетнамской «звездочкой» и обматывал лопухами (белой стороной к телу), а сверху теплым платком укутывал. Минут 40 не меньше, из меня будто нарыв выдергивало, и только потом я засыпала. Вот так я и лечила ревматоидный артрит».

Воспаленье нервов — боль! Ну а мы — по ней «звездой»! Знаете, а к этому письму, пожалуй, комментарии излишни.

«Вот как я у своего мужа воспаление тройничного нерва излечила, — рассказала Зинаида Анатольевна Давыдова. — Лет десять назад у мужа вечерами приступы начинались: с дикой болью он бегал по квартире, и из глаз у него лились невольно слезы. Боль начиналась над правым глазом, затем отдавала в глаз. Спустя три года приступы участились до такой степени, что мой упрямый муж все же согласился «скорую помощь» вызвать. Отвезли его в больницу, где поставили диагноз воспаление тройничного нерва. Поняв, что это заболевание нервного происхождения, я вспомнила, как по телевизору тибетские врачи бальзам-звездочку пропагандировали и рассказывали, как ею при различных заболеваниях пользоваться. Когда наступил очередной приступ, то смазала мужу «звездочкой» лоб, положила его голову себе на колени и ладошкой правой руки стала гладить по направлению вверх. Через 10-15 минут боль отступила. Теперь при каждом приступе мы таким образом и поступали. Лечение длилось примерно год-полтора. Через раз сочетала «звездочку» со сваренным вкрутую и разрезанным яйцом, которое прикладывала к больному месту. Боли прошли полностью и вот уже десять лет не повторяются, несмотря на то, что у мужа очень нервная работа».

Псориазу, как назло, в этот раз не повезло! Строки из письма Александры Владимировны Бурьяновой (93100, Луганская обл. г.Лисичанск, ул.Орловская, 75), которая полностью излечилась от псориаза: «…Взять 250 мл трансформаторного масла, подогреть до 60-700С, положить туда одну баночку мази «звездочка» и влить четверть пузырька цветочного одеколона. Все тщательно перемешать и мазать пораженные участки тела 2 раза в день, моясь через каждые 2-3 дня. Полное выздоровление наступает через 20 дней».

Поверьте, этот случай не единичный. Мария Алексеевна Елистратова из Северодонецка также подтвердила действенность вышеуказанного рецепта. Она написала, что с его помощью вылечились соседка и родной брат. Причем вылечились за неделю.

Лечение псориаза — лечение народными средствами на erecept.ru

Травник. Лечение травами. Лечение псориаза. В эмалированную посуду

поместить 200 г сливочного масла. мелко нарезать 10 г прополиса и варить.

erecept.ru/travnik/travnik.php?id=173

Рецепт этот также в Кривом Роге апробирован, о чем нам сообщила Раиса Павловна Шульгина. Ее муж вылечился от псориаза благодаря именно этой мази. Кстати, мазь пригодилась и позже — для лечения другой болезни. Об этом — из уст Раисы Павловны: «Когда-то у меня начался зуд во влагалище, то соседка посоветовала спринцеваться солевым раствором. Однако времени не всегда хватало, и я просто спринцевалась своей теплой мочой. Но большие половые губы, бывало, так зудели, что иной раз сил выдерживать мучения не было. Так этот зуд я мазью от псориаза вылечила. Помазала раз 7-8 (и то не регулярно) и зуд прошел. Вот тебе и рецепт! И теперь, где бы у меня не зачесалось, даже между пальцами на ногах, тут же этот рецепт применяю. И все налаживается».

Кстати, Раиса Павловна дает очень важное замечание: во время лечения категорически запрещено употреблять спиртное, т.к. болезнь может вернуться снова.

Может — да, а может — нет: неизведанный рецепт… Крымчанин С.И.Сергеенко считает, что его метод мало кому известен. Хотя лично для меня — это не секрет. А впрочем, при чем тут я? Мое мнение может носить чисто субъективный характер, главное — дать читателям информацию.

Итак, что же написал крымчанин?

«Если я посоветую вам при насморке ноздри «звездочкой» смазывать, то, наверное, ничего нового не открою. А вот, если скажу, что зубную боль ею усмиряю, то, возможно, многие из вас удивятся. Так вот, если зубы заболели, то нужно «звездочкой» зуб по десне с двух сторон смазывать, и щеку напротив этого зуба, и даже флюс. Интересно другое! Зуб после этого удалять не нужно».

Подборку из писем читателей подготовил Роман Свиридов

Удивительные свойства эфирных масел, входящих в состав вьетнамской «Звездочки»

Эфирные масла обнаружены в огромном количестве растений. К эфиромасличным видам относятся семейства астровых (сложноцветные) — ромашка ободранная, полынь горькая, тысячелистник обыкновенный, пижма обыкновенная и др. яснот-ковых (губоцветные) — мята перечная, шалфей лекарственный, чабрец, тимьян, душица обыкновенная и др. сельдерейных (зонтичные) — анис обыкновенный, фенхель, укроп огородный и др. розоцветных — различные виды роз миртовых — виды эвкалипта лавровых — камфорный лавр и некоторые др.

В медицинской практике эфирные масла используются в чистом виде (мятное, анисовое) как средства, улучшающие запах лекарств и изменяющие их вкус, а также в виде ароматных вод (мят-нйя, укропная) при метеоризме и кишечных коликах у детей. Для большинства эфирных масел характерно наличие дезинфицирующей, противовоспалительной, антимикробной, противовирусной или противоглистной активности (эфирные масла ромашки, пижмы, тысячелистника, можжевельника, аира и др.).

Бальзамы и смолы образуются в растениях как побочный продукт при обмене веществ и подобно эфирным маслам и часто совместно с ними находятся в особых вместилищах — смоляных ходах. Заполняя раны, нанесенные деревьям, бальзамы и смолы предохраняют их от высыхания и проникновения микроорганизмов.

Для получения бальзамов и смол на растениях делают надрезы. Количество вытекающих из надрезов бальзамов и смол зависит от количества и строения вместилищ. При наличии круглых или овальных вместилищ выступает только несколько капель. Например, канадский бальзам добывают многократным прокалыванием коры на пихте, произрастающей в Канаде. Он бесцветен, прозрачен, имеет густоту меда и приятный ароматный запах.

В медицине применяются комплексные препараты, содержащие эфирные масла из многих лекарственных растений, к ним относится и вьетнамский бальзам Золотая звезда . В состав препарата входят масло эвкалипта, гвоздичное масло, масло мяты перечной, ментоловое масло, масло корицы, свойства которых трудно переоценить.

Нанося Звездочку на кожу, мы тем самым используем эфирные масла, входящие в состав препарата, как действующие лекарственные вещества. Из психологии и физиологии давно известно, что запах воздействует на психическое и физическое состояние человека. Поэтому в древности огромной популярностью пользовалась ароматерапия. И нынче полузабытые методы ароматерапии вновь возвращаются к нам.

Эфирные масла успешно используются в гомеопатии при лечении травами и, к сожалению, слишком редко — в классической фармацевтике. Эфирные масла легко проникают под кожу и проявляют свое действие, связываясь с жирами, входящими в состав клеток. Летучие эфирные масла быстро испаряются и при вдохе попадают внутрь организма, а также раздражают миллионы чувствительных клеток, выстилающих носовые ходы. Эти клетки посылают сигналы непосредственно в мозг и влияют на эмоции и нервную регуляцию функций всех органов. Поэтому следует знать, что, например, при ингаляции бальзамом Звездочка эфирные масла одновременно воздействуют и па физическое, и на психическое самочувствие человека. То же самое происходит, если бальзам втирать в биологически активные точки, находящиеся на теле.

Следует, однако, заметить, что все тяжелые физические и психические заболевания обязательно требуют консультации с профессиональным вра-чом-ароматерапевтом.

Теперь более подробно об ингредиентах, входящих в состав Звездочки .

Эвкалипт (эвкалиптовое масло)

Давно доказано, что масло эвкалипта оказывает стимулирующее влияние на рецепторы слизистых оболочек, а в сочетании с другими эфирными маслами является прекрасным противовоспалительным и антисептическим средством. Эфирное масдо эвкалипта хорошо помогает при ингаляциях — быстро и эффективно прочищает носовые ходы.

Благодаря эвкалиптовому маслу Звездочка стимулирует чувствительные нервные окончания и незаменима при головных болях и простудных заболеваниях. Ее аромат великолепно помогает как средство борьбы с комарами — кровососы на дух не переносят эвкалиптовый запах.

Характерно, что листья этого дерева собирают лишь поздней осенью, зимой и ранней весной — именно в это время они обладают особенной целебной силой.

Об удивительных свойствах эвкалипта написано много. Добавим, что сейчас можно приобрести эвкалиптовое масло Орс . Это средство очень хорошо зарекомендовало себя при головных болях,кашле, воспалительных заболеваниях верхних дыхательных путей, укусах насекомых, при расстройстве пищеварения и болях в животе.

Мята (масло мяты перечной)

Эфирное масло мяты перечной дистиллируется паром из листьев и цветущих верхушек растения mcntha piperita. Имеет ярко выраженный запах ментола с травянистым оттенком. Мята перечная широко используется в Восточной и Западной Европе в составе зубных паст, средств для освежения дыхания и др.

Масло мяты — прекрасный адаптоген, оно способствует нормализации функций организма и его устойчивости к внешним воздействиям. Некоторые биологически активные точки рекомендуется массировать именно с маслом мяты.

Масло мяты перечной в основном используется для полосканий полости рта и освежения дыхания. Для этого всего лишь добавьте одну каплю масла мяты в полстакана воды. При простуде, гриппе, синусите масло мяты перечной хорошо прочищает дыхательные пути. В этих случаях особенно рекомендованы паровая ингаляция, выпаривание в аромалампе, прямая ингаляция или массаж со смесью масел (массаж груди и спины). Масло мяты перечной обладает двойным эффектом — в жару охлаждает, в холод согревает, поэтому его используют для нормализации температуры тела. Применяется при тошноте, недомогании синдроме похмелья.

Масло мяты перечной снимает головную боль применяется при нарушениях пищеварения, метеоризме принимается внутрь (одна капля маслана стакан воды или в мед). Действие: седативное, болеутоляющее, антисептическое, общеукрепляющее, спазмолитическое, желчегонное. Повышает секрецию пищеварительных желез, улучшает аппетит, снижает кислотность желудочного сока, усиливает перистальтику кишечника. Активизирует секреторную деятельность эндокринных желез. Улучшает капиллярное кровообращение.

Показания: головная боль, мигрень, стрессы, психоневрозы, чрезмерное эмоциональное возбуждение, переутомление, бессонница, невралгии, ревматизм диспепсические расстройства (тошнота, изжога, метеоризм, рвота), спазмы желудочно-кишечного тракта, холецистит, холангит, гепатит, повышенная кислотность желудочного сока, плохой аппетит, нарушения пищеварения воспалительные заболевания верхних дыхательных путей (ринит, фарингит, ларингит, трахеит), бронхит, бронхиальная астма стенокардия и болезни, связанные со спазмами сосудов головного мозга, гипертония зудящие дерматозы.

Масло можно добавлять в кремы, лосьоны для ухода за комбинированной кожей лица, в воду для полоскания при зубной боли.

Гвоздика (гвоздичное масло)

Гвоздика — высушенные нераспустившиеся бутоны цветов гвоздичного дерева — относится к самым древним и известным пряностям. Родиной является Индонезия. В Китае и в Индии была известна до нашей эры. Больше всего культивируется гвоздика на Мадагаскаре, в Занзибаре, на Молуккских островах, а также в Индии, Шри-Ланке и Гвинее. Во времена римских императоров ее популярность и использование распространились доСредиземного моря. В те времена высоко гвоздика ценилась и подчас была дороже золота. В Европу она попадала через Цейлон, ее кораблями везли в порты на Красном море, а затем караванами — к Александрию и Царьград.

Гвоздичное дерево достигает в высоту 10-20 м. Цветет два раза в год. Цветки белые с пурпурной чашечкой. Плод — яйцевидная ягода, содержащая одно или два семя. Размножается отростками, но чаще всего саженцами, выращенными из семян.

Гвоздику (flos caryophylli) получают, когда дерево достигает возраста 6-12 лет. Цветочные бутоны собирают, когда они начинают окрашиваться в красный цвет. Сушат па солнце или в сушилках, после чего они приобретают коричневый цвет.

Главной составной частью гвоздики является эфирное масло (15-26%), содержащее до 96% эвгенола. Также оно содержит гумулен, карифиллен, дубильные вещества, олеаноловую кислоту, слизи и жировые вещества.

Гвоздика обладает сильным, своеобразным ароматом и пряным острым вкусом. Употребляется в качестве пряности и лекарства. В зубоврачебном деле гвоздичное масло используется в качестве хорошего антисептика.

Ее применяют для приготовления горьких желудочных ликеров, горячих напитков с вином, популярной словацкой жженки, пуншей, фруктовых соков и компотов, консервирования фруктов. Используется также для блюд из краснокочашюй капусты, свинины, баранины, дичи, мясных подливок, маринования сельди. Вместе с луком и листьями кольраби она улучшает вкус квашеной капусты. Добавляется к грибам и к заливному из мяса. Приятный вкус приобретают зельц и паштеты из дичис гвоздикой. Она очень экономно используется в виде порошка для приготовления рыбы, комбинированных рыбных блюд, спагетти, соусов к ним и знаменитой итальянской пиццы. Эти блюда благодаря гвоздике приобретают особый, неповторимый вкус.

Ментол (ментоловое масло)

Ментол — относительно летучее твердое вещество, обладающее приятным запахом. В добавках в малых количествах к сигаретам, каплям от кашля, жевательной резинке и другим продуктам вызывает ощущение приятной прохлады во рту.

Ментоловое масло (аптечный препарат) применяется при насморке — по 2-3 капли в каждую ноздрю. Маслом нужно смазать уголки крыльев носа. Детям до трех лет применять не рекомендуется. При головной боли простудного характера, при прострелах в голове, при мигрени ментоловым маслом смазывают лоб, виски, темя, затылок сзади, под черепом (где ямка). На ночь очень полезно смазывать дыхательные пути (нос) ментоловым маслом, смешанным с вазелином. Наносить следует тонким слоем. Можно смешать с камфорным маслом. Процедуры те же. Хорошо помогает при начинающемся насморке.

В наше время появился препарат секс-любри-кант с ментолом. Применяется он следующим образом: небольшим количеством водорастворимого, обезжиренного и нетоксичного любриканта без запаха увлажняют половые органы для получения максимального удовольствия от интимной близости. Любрикант совместим с латексными и резиновыми изделиями. Состав препарата: вода, пропиленгликоль, глицерин, гидроксиэтилцеллюлоза, поликватерниум-5, гель алое, экстракт ромашки, экстракт сибирского женьшеня, экстракт гуараны, лецитин, витамины С, А, Е, лимонная кислота, тет-расодиум ЭДТА, бензоат натрия, поташ, метил-парабен, красители желтый № 5, красный № 40 и голубой № 1, конопляное масло.

Корица (коричное масло)

Коричное масло высшего качества получают из молодой коры цейлонского коричного дерева (cinnamonum zeilanicum), дикорастущего и культивируемого в Шри-Ланке, а также на Сейшельских островах и Мадагаскаре.

Косметическое применение масла корицы ограничено вследствие способности вызывать раздражение кожи. В минимальной концентрации оно стимулирует кровообращение и питание клеток увядающей кожи, устраняет бледность. Дает хорошие результаты в борьбе с кожными паразитами (вшами, чесоткой), эффективно при грибковых поражениях кожи. Корица была одним из компонентов знаменитых древнегреческих духов Ме-галейон .

Масло корицы улучшает кровоснабжение волосяных луковиц, применяется для ухода за выпадающими волосами. Целебное действие корицы проявляется в стимуляции кровообращения, что особенно полезно при переохлаждении, простудах, болезнях суставов и позвоночника. Оно позволяет согреться при любой температуре воздуха, устраняет мышечную скованность и дрожь. Используется в противоревматических смесях. Устраняет синдром интоксикации, уменьшает проявлениялихорадки (слабость, головную боль, потливость, сонливость) при гриппе и простуде. Коричное масло является одним из сильнейших антисептиков, применяемых в ароматерапии. Дает прекрасный эффект не только при терапии простуды, гриппа, вирусных заболеваний, но и некоторых кожных инфекций, например бородавок.

Масло корицы — классическое противоядие, облегчающее состояние при отравлениях: пищевом, алкогольном, никотиновом. Корица стимулирует обмен веществ, препятствует накоплению лишнего веса. Оптимизирует процессы переваривания и утилизации пищи, уменьшает газообразование в кишечнике, устраняет его спазмы и спастические запоры, полезна при заболеваниях желудка, застойных явлениях в печени. Дает хорошие результаты в борьбе с паразитами пищеварительного тракта. Многофункциональность масла корицы делает его полезным не только при заболеваниях органов пищеварения, но и другой сопутствующей патологии.

Эфирное масло корицы является хорошим про-тивообморочным средством, помогает при головокружении, тошноте. Противотравматическое средство — рассасывает синяки. Усиливает сексуальность. Коричное масло используется также в стоматологии как средство для укрепления зубов.

Магическое действие корицы находится под планетарным влиянием Марса — самой мужественной планеты. Ее аромат придает силы, делает человека сексуально активным и инициативным. Он закаляет дух, побуждает к новым проектам и предприятиям. Аромат корицы помогает обрести независимость и оригинальность, силу и уверенность. Влияние этого масла на эмоциональное состояние заключается в эффекте согревания и ОЖРШ-ления. Это особенно заметно в период зимней хандры, меланхолии, когда не хватает подвижности, тепла и оптимизма. Аромат корицы несколько возбуждает, приводит к чувственному оживлению, подстегивает к действиям. Он веселит, согревает, устраняет астено-депрессивные состояния и эмоциональный холод. В нем есть что-то от весело потрескивающего в камине огня.

Аромат корицы создает уютную атмосферу доверия и доброжелательности. Если в кабинете вашей фирмы будет витать аромат корицы (начиная с приемной секретаря), то для посетителей создастся по-деловому спокойная атмосфера доверия. Запах корицы сравнивают с теплым покрывалом, которое согревает, расслабляет, умиротворяет, способствует вдохновению.

Как специя корица была упомянута в хрониках еще императором Шен Нунг Кваном (2700 лет до н. э.). В переводе с греческого корица означает безупречная пряность. Во все времена и у всех народов она ценилась очень высоко. Корица входит в состав большинства китайских рецептов. О ней упоминается и в Библии: корица была одной из специй, которые Бог велел Моисею взять с собой из Египта. Древние египтяне использовали ее в борьбе с эпидемиями и для бальзамирования. Греки и римляне покупали ее у арабов. У португальцев (в XVI веке) и голландцев (в XVII веке) корица появилась в результате колонизации Цейлона (Шри-Ланка). Голландцы занялись ее разведением, и она стала более известной на Западе.

Сладкий, пряно-жгучий аромат корицы хорошо знаком всем кулинарам. Корица в виде пластинок или в порошке является одной из старейшихпряностей, используемых в настоящее время главным образом в десертах, сладостях, тесте. Эта пряность великолепно подходит для ароматизации блюд из риса, творога, кофе. В тропических странах дополнительной целью применения этой приправы является антисептическое действие содержащегося в ней эфирного масла, предотвращающего пищевые отравления и несварения.

Некоторые применения: ингаляции — 1-3 капли ножные ванны — 1-3 капли теплые компрессы — 1-3 капли растирания — 1-3 капли на 5 мл масла сладкого миндаля обогащение водки — 1 капля на 0,5 л, хорошо взболтать, дать отстояться.

Муравьиная кислота

Давно известны уникальные свойства знаменитых восточных бальзамов. Восточный бальзам Звездочка создан из комбинации экстрактов целебных трав и эфирных масел (i фименяемых в традиционной восточной медицине) и усилен муравьиной кислотой. Муравьиную кислоту используют с незапамятных времен для избавления от болей различного происхождения и исцеления многих недугов.

Натуральная муравьиная кислота содержит большое количество органических компонентов цинка. А цинк, как известно, является антиокси-дантом и иммуностимулятором. Он защищает организм от свободных радикалов, играющих ключевую роль в развитии атеросклероза и ряда других заболеваний, а также стимулирует иммунитет, способствуя лечению хронических болезней. Получается, что по своему действию натуральная муравьиная кислота аналогична таким широко применяемым в медицине средствам, как витамин С илипрепараты с женьшенем. Муравьиная кислота обладает болеутоляющим, противовоспалительным, согревающим и проникающим тонизирующим свойствами.

Препараты на основе муравьиной кислоты обогащены экстрактами целебных трав и масел, применяемых в народной медицине, и обладают сильным ароматерапевтическим эффектом. Их рекомендуется применять (в сочетании с традиционными методами лечения):

— для снятия суставных болей различного про

исхождения: артрит, артроз, остеохондроз, рев

матизм

— оказания восстанавливающего и тонизирую

щего действия на структуру мышц и суставов

— уменьшения утренней скованности в суста

вах

— укрепления кровеносных сосудов, эффектив

— улучшения циркуляции крови, снятия тяже

сти в ногах

— при варикозном расширении, при болезпи

вен

— снятия мышечного напряжения, усталости

— при отложении солей, подагре

— в косметических целях, для замедления про

цесса старения и омоложения структуры кожи,

улучшения кровообращения и микроциркуляции.

В последние годы врачи все чаще обращаются к так называемым нетрадиционным методам лечения (несмотря на то, что именно это лечение проверено многими поколениями наших предков). В их число входит и инсектотерапия, то есть использование в медицинских целях насекомых.Появились бальзамы, гели, кремы на основе муравьиной кислоты. Это, в частности, бальзам Муравьивит , крем для ног Муравей , Муравьивит массажный с морскими минералами и др.

Шиповник (экстракт плодов)

Экстракт плодов шиповника благодаря наличию в нем биофлавоноидов (витамин Р) и фенольных веществ, обладающих антиоксидантным свойством, усиливает действие аскорбиновой кислоты на организм, способствует поддержанию эластичности стенок кровеносных сосудов, участвует в нормализации проницаемости капилляров, усиливает противосклеротическое действие аскорбиновой кислоты, полезен при сосудистых заболеваниях головного мозга и заболеваниях глаз, сопровождающихся мелкими кровоизлияниями имеет желчегонное действие, способствует уменьшению воспаления в желчных протоках и в желчном пузыре, улучшению оттока желчи, благотворно влияет на функциональное состояние печени при токсическом ее поражении, холецистите, дискинезии желчевыводящих путей, желчекаменной болезни и гепатите. Благодаря легкому мочегонному и слабительному действию уменьшает почечные и сердечные отеки, облегчает затрудненное мочеиспускание и способствует нормализации работы почек и желудочно-кишечного тракта. Обладает свойствами адаптогена и повышает сопротивляемость организма неблагоприятным факторам, простудным респираторным заболеваниям, в частности гриппу благоприятно влияет на течение ряда заболеваний: туберкулеза легких, язвенной болезни, анемии, астении, неврастении, атеросклероза облегчает течение сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний снижает и стабилизирует уровень глюкозы в крови у больных сахарным диабетом. Полезен при железодефицитных и других анемиях благодаря наличию железа, а также больным в предоперационный и послеоперационный периоды, при травмах, хронических и острых пневмониях. Ускоряет восстановление костной ткани при переломах.

Экстракт шиповника входит в состав многих гелей, кремов, спреев, кремов для душа и ванн. Интенсивное средство для ухода за потерявшей тонус кожей — теплая ванна с экстрактом шиповника. Улучшает обменные процессы в коже, насыщает полезными витаминами (С, Р, В1? В2) и минеральными солями, помогает расслабиться и восстановить душевные силы. Средство растворяется в теплой воде, образуя на поверхности тонкий слой пены с роскошным ароматом мускатной розы.

Применение: встряхните флакон, вылейте небольшое количество масла под струю теплой воды. После принятия ванны примите контрастный душ.

В наше время получен сухой экстракт из шрота шиповника путем ультразвуковой водной экстракции. Определен химический состав биологически активных веществ. Найдены витамины (аскорбиновая кислота, тиамин и рибофлавин), углеводы, карбоновые кислоты, аминокислоты, флавоноиды, каротиноиды, пектиновые вещества. Для полученного сухого экстракта изучен тест на острую токсичность. Оказалось, что экстракт нетоксичен и обладает анаболическим и адаптогенным действием. Экстракт плодов шиповника включает практически все водорастворимые биологически активные компоненты, содержащиеся в сухих плодах шиповника: природные витамины С и В, биофлавоноиды (витамин Р), органические кислоты (лимонная и яблочная), пектины и дубильные вещества, а также ряд незаменимых минеральных компонентов пищи (калий, железо, фосфор, магний, кальций) и микроэлементов (марганец, медь, молибден и др.).

Препарат Долматин С , который сейчас можно приобрести в аптеке, обладает отличительным свойством — в одной таблетке препарата сочетаются биологическая активность витамина С, кальция, магния и большого количества природных компонентов плодов шиповника. Препарат применяют как добавку к пище:

— для общего оздоровления организма и обес

печения его витамином С

— снятия утомления глаз при длительной рабо

те с компьютером

— в период предоперационной подготовки и

послеоперационной реабилитации

— при высоких физических и умственных на

грузках, стрессовых состояниях и нарушении

других заболеваниях, приводящих к малокро

вию

— пониженной сопротивляемости организма к

инфекционным заболеваниям, особенно в пе

риод эпидемии гриппа и ОРЗ

— лечении переломов костей и последствий

травм

— лечении атеросклероза, заболеваний сердца,

повышенном давлении крови, головной боли,

заболеваниях печени (холециститы, дискине-зия желчных протоков, интоксикация промышленными ядами) и почек

— парадонтитах, остеопорозе и других заболеваниях, связанных с потерей кальция организмом.

Удивительным полезным действием обладают обыкновенные плоды шиповника, заваренные как чай. Для приготовления целебного чая потребуется 5 столовых ложек измельченных плодов на 1 л воды. Кипятить 10 минут. Укутать на ночь. Пить как чай в любое время суток с чем угодно. Такой чай прекрасно очищает кровеносную систем ‘, улучшает обмен веществ. Настой богат витамином С и применяется при малокровии, цинге, болезнях почек и мочевого пузыря, больной печени как тонизирующее средство.

Камфара

Камфара (камфара) (camphor) представляет собой твердый летучий кетон с характерным приятным запахом. Из камфарного дерева получают L-форму а D.L-форму производят в промышленных масштабах путем синтеза из других природных продуктов. Аромат чистый, свежий, теплый, резкий. На основе камфары готовят раствор для наружного применения. Он обладает свойством снимать различные воспаления и согревать.

Показания к применению камфорных растворов наружно: миозиты, невралгии и др.

Режим дозирования: назначают в виде растираний.

Побочные действия: возможны аллергические реакции.

Противопоказания: повышенная чувствительность к компонентам препарата. Особые указания: препарат можно применять для профилактики пролежней. Камфара при внутривенном введении стимулирует дыхательный и сосудодвигательный центр, усиливает обменные процессы в сердечной мышце, суживает периферические кровеносные сосуды. Камфара способна оказывать отрезвляющее действие и успокаивать сексуальное перевозбуждение.

Кемабен-2

Прозрачная вязкая жидкость бледного или светло-желтого цвета. Запах мягкий, специфический. Антимикробный консервант для косметики. Высокоэффективен, совместим с большинством косметических ингредиентов.

Вазелин

Вазелин — это однородная, тянущаяся короткими нитями вязкопластичная масса без запаха, белого или желтого цвета. При расплавлении вазелин дает однородную прозрачную флуоресцирующую жидкость без запаха.

Источники: http://i-apteka.in.ua/catalog/lekarstvennie-preparati/dlya-lecheniya-bronho-legochnoj-sistemi/balzam-zvezdochka-p-prostudnij-15g/?city=2, http://medbrowse.com.ua/balzam-zvezdochka-cena/krivojj-rog, http://zep-electro.org.ua/daleka-strana-vetnam-v-nej-pridumali-balzam, http://ozvezdochke.narod.ru/1_udivitelnye_svojstva_efirnyh_masel_vhodyaschih_v_sostav_vetnamskoj_zvezdochki.html

состав, применение, польза, вред :: Инфониак

Полезные советы

Вьетнамский бальзам звездочка, просто бальзам звездочка, или вьетнамский бальзам… Уже от одних этих словосочетаний у людей, которые хоть раз пользовались данным средством, свербит в носу от ощущения резкого, навязчивого и въедливого аромата.

Бальзам звездочка не теряет своей популярности еще с советских времен. Чем же она обусловлена? 

Действительно ли эта вьетнамская мазь способна принести пользу здоровью или речь идет об очередной надуманной панацее? Сейчас вы узнаете правду!


Бальзам звездочка – состав


Zinkevych/Getty Images Pro

Если пройтись по рынкам Вьетнама, можно увидеть невероятное количество бальзама звездочки, в различных упаковках. Однако на территории России тот самый бальзам «Золотая звезда» (именно так именуется вариант данной продукции, зарегистрированный для ввоза в нашу страну) реализуется в виде мази, бальзама (маслянистой жидкости) и ингаляционного карандаша.

Если говорить об ингредиентах, входящих в состав бальзама звездочки, то самыми главными являются ароматические масла. Собственно, во многих случаях сам оздоровительный эффект обеспечивается за счет ароматического воздействия этих масел, хотя в некоторых случаях целебный эффект достигается исключительно через непосредственный контакт с кожей. Какие же масла входят в состав бальзама звездочки?

Эвкалиптовое масло

Одним из главных компонентов, обуславливающих не только определенные целебные свойства данного средства во всех трех его видах (мазь, жидкость и карандаш), но и его специфический аромат, является эвкалиптовое масло. Наиболее значительное количество данного масла содержится в жидком бальзаме.

Этот ингредиент известен своим целебным воздействием на слизистые оболочки носоглотки, который выражается в противовоспалительном эффекте. Также масло эвкалипта является превосходным антисептиком. Именно поэтому данное средство используется в составе ингаляционных смесей.

Мятное масло

Масло перечной мяты входит в состав всех трех видов вьетнамского бальзама. Данный ингредиент также оказывает антисептическое воздействие, однако функций у мятного масла в бальзаме «Золотая звезда» больше, чем у эвкалиптового. В частности, масло мяты является неплохим спазмолитическим средством, способным улучшать капиллярный кровоток, регулировать перистальтику кишечника, стимулировать аппетит.

Вышеперечисленные виды воздействия проявляются при использовании бальзама в качестве ароматического средства. Однако есть у масла перечной мяты еще один эффект – седативный. Именно поэтому бальзам «Золотая звезда» используется в качестве своеобразного снотворного.

Гвоздичное масло

Гвоздичное масло также является постоянным ингредиентом бальзама «Золотая звездочка» во всех его видах и оформлениях. Целебные свойства гвоздики были известны еще в древней Индии и Китае. Изначально она использовалась в качестве специй, а также как антисептик – в частности, при лечении зубов.

Ментол

Еще один неизменный компонент вьетнамского бальзама – кристаллический ментол. В медицине данное вещество используется не только в качестве антисептика, но и как местный анестетик. Ментоловое масло в отдельности рекомендуют использовать для лечения насморка, простуды.

Коричное масло

Коричное масло – достаточно противоречивый продукт, который нельзя использовать без меры, так как оно вызывает раздражение кожи при местном нанесении. Однако при минимальной концентрации коричного масла в сочетании с какими-либо другими компонентами, этот ингредиент оказывается весьма полезен для лечения грибковых заболеваний.

Читайте также: Касторовое масло: способы применения, польза и вред

Коричное масло также является компонентом некоторых косметических изделий (в частности, духов). Благодаря своим свойствам, коричное масло стимулирует кровоток, поэтому его эффективно использовать при простудных заболеваниях, переохлаждении, лечении некоторых вирусных и инфекционных болезней.

Камфора

Камфора, как лекарственное средство, является частым компонентом различных лечебных мазей, хотя вполне может находить и самостоятельное применение. Фармакологическое действие данного вещества заключается в воздействии на нервные окончания нашей кожи, что способствует стимуляции кровообращения, улучшении тонуса тканей.

Камфора нередко используется в качестве местного анестетика. Данное вещество также является неплохим антисептиком. Богатый набор свойств камфоры обуславливают ее частое использование при ароматерапевтическом воздействии, поэтому этот компонент нередко можно встретить в различных эфирных маслах.


Kadoic/Getty Images

Вазелин

Применение этого густого вещества, не обладающего каким-либо запахом, в качестве компонента для вьетнамского бальзама понятно – он является отличным загустителем и лубрикантом. Вазелин также оказывает смягчающее действие и даже способствует заживлению кожи, из-за чего его нередко используют при набивании татуировок.

Наибольшую долю в составе бальзама звездочки имеют кристаллический ментол (к примеру, в карандаше «Золотая звезда» – до 50 процентов), камфора, вазелин и мятное масло. Достаточно ощутима и доля эвкалиптового масла. А вот доля масла гвоздичного и коричного весьма незначительна (буквальна пара процентов).

Вот, в принципе, и все компоненты, из которых складывается состав бальзама «Золотая звезда». Отдельные образчики могут включать в себя дополнительные ингредиенты (к примеру, парафин, пчелиный воск, ланонин). Каждый из компонентов доказано имеет положительное фармакологическое воздействие, что и обуславливает полезность бальзама «Золотая звезда», о которой мы и поговорим далее.

Бальзам звездочка – применение

Бальзам звездочка от насекомых

Если у вас под рукой не оказалось фумигатора, а кровососущие просто не дают житья, в борьбе с ними поможет бальзам звездочка. Один из вариантов применения – это нанести вьетнамский бальзам на открытые участки кожи. Резкий аромат отпугнет насекомых, которые очень чувствительны к сильным запахам. Если есть одеколон или туалетная вода, можно растереть мазь и им – это усилит эффект.

Если вы развели костер на природе, смажьте мазью веточку и опустите ее в огонь – это также отпугнет насекомых. «Золотой звездой» можно смазать места укусов – она окажет противовоспалительный эффект и снимет зуд.

Бальзам звездочка для массажа

Для того чтобы правильно использовать вьетнамский бальзам звездочку для массажа, необходимо знать точки, на которые следует наносить мазь. Таких точек на нашем теле очень много. Однако прежде чем начинать подобный массаж, следует убедиться, что на коже нет раздражений – иначе мазь противопоказана.

Бальзам можно наносить также на кожу головы при массаже данной зоны. Подобная стимуляция не только улучшает кровоток, снимая головную боль, но и проводит весь организм в тонус. Конечно, запах может отпугнуть вас от этой затеи. Однако польза от такого массажа неоспорима.

Бальзам применяется также для аккупунктурного массажа и иглоукалывания, хотя для этого, конечно, необходимы специальные знания специалиста в данной области. После обычного же массажа следует одеть что-то теплое, чтобы сохранить тепло. Очень просто с помощью бальзама звездочки делать самостоятельно точечный массаж. При этом мазь можно сразу втирать в кожу, водя пальцем по кругу, а можно смазать место массажа уже после его проведения.

Бальзам звездочка при простуде и гриппе

Один из сопутствующих симптомов простуды – это насморк. Сам бальзам «Золотая звезда» не поможет вылечить простуду, однако он сможет значительно уменьшить интенсивность симптомов. Предлагается нанести малое количество мази на лицо в том месте, где крылья носа соединяются участками, под которыми прощупываются скуловые кости. Бальзам необходимо втирать вращательными движениями от двух до трех минут, иногда увеличивая, а иногда уменьшая давление.

Также имеет смысл сделать массаж верхней части переносицы, практически между бровями. При этом будьте очень аккуратны, чтобы мазь ни в коем случае не попала в глаза, так как ее активные компоненты способны сильно навредить слизистой оболочке глаз.

Можно также особо не заморачиваться поиском точек, а просто втереть небольшое количество мази в область кожи вокруг носа и в области затылка. В любом случае это уменьшит симптомы простуды. Этот способ также хорош в качестве профилактической меры против гриппа.

Отлично облегчает дыхание и настраивает организм на выздоровление при простуде массаж груди. Делается он очень просто – небольшое количество мази втирается в область груди так, чтобы не задеть сосков. Затем стоит укутаться потеплее. Можно обтираться до четырех раз в сутки. Попросите также кого-то из близких, чтобы аналогичным образом мазь нанесли массажными движениями на область спины между лопатками.


Elnur

Человеческое тело – это сложнейший механизм, в котором все взаимосвязано. Учитывая данный факт, при первых признаках сложной простуды или гриппа можно предложить следующее: необходимо нанести бальзам звездочку на пятки. Также смажьте мазью под и над пальцами и полностью смазать большой палец, размазав мазь от большого пальца к пятке. Затем стоит надеть теплые шерстяные носки.

При этом рекомендуется обильное питье. Также против простуды действенен другой метод: нанесите мазь на горло легкими массажными движениями, затем закройте шею теплым шарфом или платком и обеспечьте себе обильное питье. Этот метод считается очень эффективным от простуды.

Также можно использовать бальзам звездочку от боли в горле. Чуть выше кадыка у нас на шее есть место, на которое необходимо нанести некоторое количество мази, а затем легкими массажными движениями растереть его. Массируйте не более минуты.

Бальзам звездочка для ингаляций

Для ингаляций очень удобно использовать бальзам звездочку в виде карандаша. Карандаш буквально вставляется в носовой проход и делается один-два полных вдоха. Такие мини-ингаляции можно проводить до 15-ти раз за один день. Подобное лечение значительным образом облегчает симптомы при рините.

Однако данные ингаляции могут применяться только при рините простудной природы. При аллергическом сезонном рините использование карандаша бальзама звездочки нежелательно. Вообще, аллергикам следует проявлять особую осторожность при использовании бальзама «Золотая звезда». В том числе это касается и людей, страдающих от кожных аллергических заболеваний.

Ингаляции при помощи карандаша оказывают положительное воздействие также и на горло, трахеи и бронхи. Можно использовать бальзам для ингаляций, если добавить небольшое количество мази в кипяток. Затем укройте голову полотенцем и подышите над емкостью эфирными маслами. Однако помните, что при температуре такие ингаляции делать нельзя!

Для того чтобы усилить эффект, можно добавить бальзам не в чистую кипящую воду, а в запаренные листья эвкалипта. Это отличное средство не только от насморка. Подобная ингаляция рекомендуется для очищения бронхов.

Бальзам звездочка от остеохондроза и радикулита

Поскольку многие из нас ведут малоподвижный образ жизни, немудрено, что даже относительно молодые люди страдают от остеохондроза. Как известно, одним из эффективных средств лечения и профилактики этого заболевания является массаж спины. Однако к опытному массажисту мы попадаем не так часто, как это необходимо.

Поэтому стоит использовать несколько точек на нашем теле для того, чтобы нанести на них бальзам звездочку и облегчить тем самым болевые ощущения. Одна из таких точек находится на тыльной стороне ладони, между указательным и средним пальцами. Втирайте туда мазь в течение пары минут.

От шейного остеохондроза очень эффективным является использование вьетнамского бальзама звездочки сразу после посещения парилки. Замечательно, если вы посещаете баню хотя бы раз в неделю. Когда вы хорошенько распаритесь, сделайте самомассаж задней части шеи с втиранием бальзама.

Что касается радикулита, бальзамом звездочкой пользовались, кажется, почти все на территории бывшего Советского Союза. Если что-то пошло не так и вас мучает боль при радикулите, пусть вам вотрут в место локации боли вьетнамскую звездочку. Затем укройте спину теплым шерстяным одеялом, пледом или хотя бы укутайте шарфом.

Бальзам звездочка от герпеса

Это инфекционное заболевание, обычно передающееся путем контакта, доставляет немало неприятностей очень многим людям, включая тех, кто не понаслышке знает о правилах гигиены. Герпес доставляет немало хлопот еще и потому, что это не только высыпание, но и зуд, жжение и даже боль, обычно поражающие окружность ротовой полости.

Бальзам «Золотая звезда» действительно может помочь справиться с данным недугом, однако лучше реагировать на него на ранней стадии развития. Иными словами, лечить необходимо начать до появления уплотнений на губах.


Jupiterimages/Photo Images

Для этого рекомендуется периодически (три-четыре раза в сутки) прикладывать к месту воспаления ватный тампон или стерильный бинт, пропитанные бальзамом. Прикладывайте ненадолго – буквально на полминуты. Обычно развитие герпеса удается остановить за сутки и наступает облегчение.

Бальзам звездочка от головной боли

Мигрень или головные боли – с этими неприятными симптомами также под силу справиться бальзаму звездочке. Конечно, природа головной боли может быть очень разной (к примеру, высокое давление). Однако речь идет о спазматических ощущениях в области висков или затылка.

Один из наиболее простых способов избавления от боли в височной области заключается в том, чтобы, нанеся небольшое количество бальзама на указательный и средний пальцы обеих рук, натирать виски в течение 30 секунд.

Если боль опоясывающая, необходимо повторить данную процедуру, втерев небольшое количество бальзама в области за ушами. Затем повторяем то же самое для переносицы, натерев ее с обеих сторон. Можно также натереть между бровями, немного захватив лобную область. Каждое массажное действие осуществляется примерно в течение 30 секунд.

Не стесняйтесь также натереть зону затылка. Бальзам хорошо смывается водой, не оставляя видимого запаха. Вотрите бальзам в середину затылочной доли, хорошенько помассировав ее. После этого рекомендуется не делать резких движений, а лучше всего прилечь и отдохнуть. Можно также поспать.

Бальзам звездочка от бессонницы

Существует огромное многообразие способов борьбы с бессонницей – от медикаментозных до медитации. Но если у вас нет желания травить организм химией, или тратить годы на изучение методик медитации, попробуйте бальзам «Золотая звезда». К примеру, если причина вашего плохого сна – это жара, имеет смысл нанести небольшое количество бальзама на виски и легонько втереть.

Буквально спустя минуты вы почувствуете расслабление – это эффект эфирных масел, входящих в состав средства. Также можно будет ощутить легкий приятный холодок – вполне обычное явление после нанесения вьетнамского бальзама в малом количестве на кожу.

Аналогичное расслабляющее воздействие оказывает бальзам и при любой другой температуре окружающей среды, так что не стесняйтесь использовать данное средство для нормализации вашего сна.

Бальзам звездочка для похудения

Пусть вам не кажется это невозможным – бальзам «Золотая звезда» действительно способен внести свою посильную лепту в достижение вами хороших результатов при похудении. В частности, речь идет об уменьшении слоя брюшного жира.

Для этого существует следующий рецепт: некоторое количество вьетнамского бальзама (только не ставьте слишком много, количество – буквально с ноготь), ложку пищевой соды и растолченную таблетку камфоры смешивают со спиртом так, чтобы получившееся количество однородной смеси как раз можно было размазать по месту, где вы желаете видеть талию.

Читайте также: Кокосовое масло: свойства, польза и применение

Затем необходимо обвернуть живот пищевой пленкой и отправляться спать. Периодическое повторение данной процедуры с частотой раза два в неделю или даже реже на протяжении месяца способно дать хорошие результаты (особенно в комплексе с другими мероприятиями).

Бальзам звездочка для мягких и нежных пяток

Неудобная обувь, неправильное питание, длительное нахождение на ногах и всяческие грибковые инфекции часто приводят к тому, что на пятках образуются натоптыши и даже появляются трещины, которые бывают весьма и весьма болезненными.

Бальзам «Золотая звезда», если его нанести достаточно тонким слоем на ночь на область пяток, способен решить данную проблему. Необходимо надеть теплые носки, а утром обязательно обработать зону пяток пемзой, чтобы удалить омертвевшие клетки кожи – нежные пятки вам гарантированы.

Бальзам звездочка для дрессировки домашних животных

Речь не идет, конечно, о том, чтобы ваш домашний питомец научился ходить на задних лапах или прыгать через объятые пламенем кольца. Речь идет о том, чтобы, к примеру, ваш песик перестал гадить на ковер. Да и на кошку, желающие подточить коготки об обивку нового дивана, это также действует отрезвляюще – это домашнее животное не переносит резкий аромат бальзама.


slavadubrovin/Getty Images

Как открыть бальзам звездочку

Ответ на этот, казалось бы, тривиальный вопрос не так очевиден, как может показаться на первый взгляд. Бальзам «Золотая звезда» в металлической баночке действительно многим не сразу удается открыть.

Если вам попалась такая вот «непослушная» баночка, не старайтесь демонстрировать чудеса силы, пытаясь буквально оторвать верхнюю крышечку. Рекомендуется действовать следующим образом:

1. Можно покрепче сжать верхнюю крышку и круговыми движениями, по чуть-чуть, оттягивая ее на себя, выкручивать.

2. А можно просто постараться поддеть верхнюю крышечку острием ножа вверх по ее кромке, чтобы она соскочила.

Бальзам звездочка – что нельзя мазать

Бальзам «Золотая звезда», при всей своей полезности, не является панацеей. И иногда вполне может принести вред. Именно поэтому нельзя бездумно наносить это средство (в виде мази или того же бальзама) на любые места на теле. В частности, вьетнамский бальзам может буквально сжечь любую слизистую оболочку, особенно если нанести его на нее в большом количестве.

Именно поэтому при простудах и ринитах бальзам нельзя втирать в нос, а следует наносить его на кожу возле носа и на самом носу. Еще одни места, на которые бальзам звездочку нельзя наносить ни при каких условиях, это места концентрации лимфатических узлов (особенно крупных – к примеру, на шее или в районе подмышек).

Также бальзам «Золотая звезда» не наносится на молочные железы. Можно на просторах Интернета встретить совет, согласно которому таким образом можно снять воспалительные процессы при определенных патологиях. Однако это крайне опасно, чревато усугублением этих самых процессов и даже ожогами, так как соски – зона крайне чувствительная.

Отдельная больная тема (в прямом и переносном смысле) – это шутки про то, как бальзам звездочка наносится на паховую область. Сложно представить, чтобы человек сделал это эксперимента ради, однако некоторые смельчаки или, скорее, глупцы пытались это сделать (в частности, намазывали тестикулы предположительно после укусов комаров или якобы случайно), что заканчивалось обычно длительной жгучей болью и локальным ожогом. И уж конечно не стоит лечить бальзамом «Золотая звезда» геморрой – эффект может быть еще плачевнее!

Вопросы и ответы

Здравствуйте, уважаемые врачи! Моему мужу полтора года назад удаляли субарахноидальную гематому из головного мозга (было кровоизлияние после резкого скачка давления вверх), затем была реконструкционная операция — вставили титановую сетку в месте отсутствия кости в черепе. Этой весной он не стал проходить курс лечения (уколы, таблетки), прошел только осенью (в октябре). В апреле-мае текущего года он резко сбросил около 10 кг., и по сей день не поправляется… Невролог, на приеме у которого он был в мае, сказала, что ничего страшного в этом нет (???). В течение октября он снова похудел примерно на 2 кг. Что делать — к какому врачу обратиться мужу?! Очень переживаю. Заранее спасибо Вам за предоставленный ответ!

Вашему мужу необходимо в данном случае пройти минимальное общее обследование (ЭКГ, флюорография, общие анализы крови, мочи, анализ крови на АЛТ, АСТ, глюкоза, Т 4 свободный, ТТГ, ПСА; УЗИ почек, предстательной железы, органов брюшной полости, щитовидной железы) и пройти осмотр терапевта с результатами.

Начать нужно с анализов. Забор анализов крови проводится натощак, без предварительной записи по будням с 8:00 до 10:00 утра, в субботу с 8:30 до 10:00 в нашем медицинском центре в процедурном кабинете по адресу: ул. Георгия Димитрова, 20. Вы обращаетесь в указанное время в медицинский центр к сотрудникам рецепции, Вам предлагают присесть, через несколько минут медицинская сестра пригласит Вас для сдачи анализов. С собой в контейнере принесите мочу и сдайте медсестре, которая будет проводить забор крови из вены. Если необходимо, контейнер Вы можете получить бесплатно в клинике.

Далее пройдите УЗИ. Для этого запишитесь на исследование по телефонам: 8 846 201-00-11, далее нажмите клавишу 2, или 927-06-97. Обратите внимание, что УЗИ необходимо проводить натощак, так как в список исследований входят органы брюшной полости. Флюрографию Вы можете пройти по месту жительства или по хоз.расчету.

Далее с результатами анализов крови, УЗИ, флюрографией запишитесь на прием к терапевту Любимовой Н.А. по телефонам: 8 846 201-00-11, далее нажмите клавишу 2, или 927-06-97. ЭКГ (электрокардиография) проводится непосредственно на приеме у терапевта. Буду рада помочь Вашему мужу. Жду Вас на приеме вместе.

С Уважением,
Главный врач взрослой поликлиники
«Клиники доктора Кравченко»,
Любимова Н.А.

Направленное разрушение декорина приводит к аномальной морфологии коллагеновых фибрилл и ломкости кожи | Журнал клеточной биологии

Первоначальный анализ мышей Dcn -/- не выявил серьезных анатомических аномалий. Животные выросли до нормального размера, были плодовиты и не проявляли явных поведенческих нарушений. Полный химический состав сыворотки и гематологический профиль двухмесячных гомозиготных и контрольных мышей не выявил каких-либо существенных различий в уровнях альбумина, глобулина, электролитов, натрия и хлорида, в печеночных ферментах, АЛТ и АСТ или в количество лейкоцитов и эритроцитов, гематокрит и гемоглобин.Рентгенологические исследования целых животных не выявили каких-либо явных аномалий костей у животных с дефицитом декорина (не показано). Однако более тщательный анализ мышей Dcn -/- выявил дряблость кожи и значительную хрупкость. Когда мышей 3-го возраста умерщвляли путем смещения шейных позвонков, простое приложение давления к шейной области вызывало резкий разрыв кожи (рис. 3, A , стрелки ). Кроме того, кожа хвоста была полностью отделена от подлежащих мягких тканей (рис.3, А , наконечники ). Световое микроскопическое исследование кожи с хвоста показало резкую отслойку кожи между более глубокими слоями дермы и фасцией, с четкими острыми краями вдоль разреза (рис. 3, B , стрелки ). Случайные образцы кожи живота у нескольких мышей Dcn -/- выявили истончение дермы и рыхлую соединительную ткань в подкожном слое (рис. 3, D ). Таким образом, дряблость кожи, наблюдаемая у животных с дефицитом декорина, может быть обусловлена, по крайней мере частично, накоплением рыхлой соединительной ткани в дермальном и гиподермальном слоях.Напротив, однопометные мыши Dcn +/+ того же возраста (фиг. 3, C ) или животные Dcn +/- (не показаны) не обнаруживали таких структурных изменений. Чтобы подтвердить отсутствие декорина, иммуногистохимический анализ с использованием антидекоринового антитела показал отсутствие обнаруживаемых эпитопов в коже животных Dcn -/- (фиг. 3, D ). Кроме того, все протестированные ткани, включая скелетные мышцы, жировую ткань и матку (рис. 3, D и F ), а также фаллопиевы трубы и яичники (не показаны), не выявили иммунореактивности к декорину.Напротив, животные дикого типа показали ожидаемую иммунореактивность в дерме (рис. 3, C , звездочки ), в миоэпителиальном слое и соединительных тканях, окружающих молочные протоки (рис. 3, E , стрелки). ), так и в адвентиции мелких кровеносных сосудов (рис. 3, Е , наконечники стрел ). У животных Dcn -/- окрашивание антителом против бигликана показало присутствие этого эпитопа в эндометрии и интрамуральных кровеносных сосудах (фиг.3, G ), а также в эпидермальном слое и фолликулярном эпителии (рис. 3 H ).

Разрыв кожи, аналогичный показанному на рис. 3. A имел значительную пенетрантность, поскольку он наблюдался у >50% всех мышей Dcn -/-. Напротив, хрупкость кожи никогда не наблюдалась у гетерозиготных животных дикого типа; он не встречался и у других животных ( n > 300) со схожим генетическим фоном, но несущих аллель дикого типа.Эти данные показали, что для получения фенотипа ломкости кожи необходимо было инактивировать оба аллеля декорина.

НАСЛЕДИЕ ЛИЛЛЕХАММЕРА — The Washington Post

Альберто Томба — крупный мужчина с бедрами, похожими на стволы деревьев. Тем не менее, в последний день зимних Олимпийских игр год назад в Лиллехаммере толпа швыряла его, как тряпичную куклу, у подножия трассы для слалома в Хафьеле, а затем водрузила на плечи поклонников, которые станцевали ему веселый танец на крутом склоне. и холодный угасающий свет норвежской зимы.

Томба вытащил кролика из своей небесно-голубой шапки, пища для серебряной медали в последней лыжной гонке Игр, когда противник выскальзывал, переворачивался или иным образом разбивался и сгорал. Мир настроился на то, чтобы увидеть легендарную итальянскую кепку, грандиозную карьеру и великие Олимпийские игры, и каким-то волшебным образом, несмотря на то, что выступление, как он знал, не оправдалось, Томба дал миру то, чего он жаждал.

В тот вечер царила безудержная радость, когда тени начали свой неумолимый марш по горам и налетела холодная ночь.Это был конец лучших Зимних Игр в истории, как говорил на церемонии закрытия олимпийский вождь Хуан Антонио Самаранч. Он всегда так говорит, и почему-то это всегда кажется правдой.

Итак, самое грандиозное спортивное мероприятие в мире. Триумфы и провалы больше жизни, кажется, возникают, чтобы удовлетворить великую, стонущую, глобальную потребность. Мир увидел лучшие и худшие стороны спорта на Играх в Лиллехаммере, которые открылись год назад в воскресенье, и американцы, как всегда, вызвали большое волнение.

Помните Тоню Хардинг, шатающуюся, как плаксивый тролль, из-за этих занавесок на арене для фигурного катания, с разбитым лицом, сжатым в руке жалким ингалятором от астмы, опоздавшая на встречу с судьбой на полторы минуты после того, как превратила Олимпиаду в омерзительную интермедию в течение двух месяцев? Тоня, Тоня, где ты сейчас?

Лишенный всего и укоренившийся в позоре, вот где.На чемпионате США по фигурному катанию в Провиденсе, штат Род-Айленд, на этой неделе в программе национальный титул по фигурному катанию был отмечен как «вакантный» со звездочкой. Ниже поясняется, что Хардинг была лишена короны после того, как было обнаружено, что ее приспешники ударили соперницу Нэнси Керриган дубинкой по колену незадолго до национального чемпионата и за 50 дней до Олимпийских игр, где обе должны были представлять свою родину.

За причастность к разгрому Хардинг не допустили к соревнованиям по фигурному катанию, но не раньше, чем ее менее чем звездное выступление в Хамаре, где она пропустила свой первый прыжок, а затем, плача, катилась к скамейке запасных, подняла конек на катке стену и убедила судей, что порвала шнурок и заслуживает еще одной попытки, и они дали ей это.

Несмотря на всю свою театральность, Хардинг оказалась глубоко в толпе, прискорбно заняв восьмое место в волнении за золотую медаль между крошечной кукольной украинкой-подростком Оксаной Баюл, ее спина все еще была в синяках от столкновения на тренировке, и высокая, элегантная Керриган с воскресшим коленом и точеным лицом Новой Англии.

Керриган справилась со всеми прыжками, но судьи все равно отдали золото Баюлу. Почему? Кто знает? Но Керриган была совсем не милостива к поражению, когда она скулила за кулисами.Пока организаторы искали кассету с украинским гимном, серебряная медалистка Керриган, ошибочно сообщенная, что задержка вызвана тем, что Баюл перекрашивает лицо, пробормотала что-то вроде того, что ее маленькой сопернице не нужен грим, она только размажет это со слезами на трибуне.

Здорово! Затем Керриган вернулась домой, чтобы заработать свои миллионы, в основном благодаря дурной славе после нападения на Хардинга, и во время одной из первых остановок в Диснейленде услышали жалобы на то, что появление с Микки Маусом было «самой банальной вещью, которую я когда-либо делала.Черт!

Сейчас Керриган участвует в профессиональных шоу с большими деньгами и на телевидении (ее часовой специальный выпуск CBS выходит в среду) и представляет 17 компаний. Говорят, что ее годовой доход составляет несколько миллионов долларов.

Тем временем Хардинг находится на полпути к назначенным судом 500 часам общественных работ и заплатила штраф в размере 110 000 долл. Ее бывший муж находится в тюрьме за нападение на Керриган, а Хардинг в последний раз бесплатно каталась на коньках, играя роль миссис Санта-Клауса в рождественской пародии на Портленд, штат Орегон., каток, где она готовилась к Играм.

Баюл, сирота, которой только исполнилось 17 лет, переехала в Америку, живет и тренируется в Симсбери, штат Коннектикут, где ее агент, Майкл Карлиз из William Morris & Associates, говорит, что она «любит шоппинг, кино и торговые центры. очень горжусь ею». Она будет кататься на коньках на USAir Arena 8 апреля в рамках Campbells Soup Tour.

Если мыльная опера «Тоня-Нэнси» испортила Игры, то замечательное выступление Дэна Янсена в конькобежном спорте превзошло все ожидания.Бык с детским лицом из Уэст-Эллиса, штат Висконсин, приехал в Лиллехаммер, чтобы изгнать демона — того самого, который забрал его сестру Джейн, умершую от лейкемии утром во время олимпийской гонки в 1988 году, которая должна была принести ему первую золотую медаль.

С этого момента олимпийская карьера Янсена стала катастрофической. Лучший спринтер мира дважды падал в Канаде в 1988 году, трижды потерпел неудачу во Франции в 1992 году, а затем поскользнулся и проиграл на долю секунды в своем первом заезде в Норвегии в 1994 году. захватил его, завоевав блестящую золотую медаль за свою первую олимпийскую медаль в своем последнем выступлении на Олимпийских играх — золото, конечно.

Надежды всей страны ложились на широкие плечи Янсена в ту ночь, когда он пробежал 1000 метров на Корабле викингов, затемненной крытой пропасти, где проводились соревнования по конькобежному спорту. Он был почти безупречен, и когда все закончилось, он держал крошечный флаг США в одной руке, а свою годовалую дочь Джейн в другой и проехал круг почета на все времена.

Сегодня Янсен ушел из фигурного катания и накопил небольшое состояние за год публичных выступлений и ряд прибыльных корпоративных связей.Он очень востребован в качестве мотивационного оратора по 15 000 долларов за выступление. «Он говорит около 40 минут, и в конце вы не видите слишком много сухих глаз в доме», — сказал его агент Стив Рознер.

Тем временем подруга по команде Бонни Блэр, самая успешная спортсменка в истории Олимпийских игр, все еще выкладывается в свои 30 лет в свой последний год соревнований. Блэр сделала все, что намеревалась сделать в Лиллехаммере, выиграв на 500 и 1000 метров с метрономической эффективностью, чтобы завершить захватывающее олимпийское десятилетие.Ее пять золотых медалей и шесть медалей в целом — больше, чем у любой женщины. Блэр, возможно, тоже легко уволилась, но хотела продержаться еще один год, чтобы участвовать в чемпионате мира в следующие выходные на своей домашней трассе в родном городе Янсен — ледовом центре Милуоки Петтит.

Итак, две недели назад, когда Янсен был в Лиллехаммере со съемочной группой, получая солидные деньги за воспоминания о своей победе для CBS, Блэр была в Инсбруке, Австрия, борясь с ветром и дождем до своего первого поражения на дистанции 500 метров за весь сезон и разочаровывающее пятое место на дистанции 1000 метров.

Не беспокойтесь. Она находится в отличной форме, когда ветер и дождь не мешают ей, сказал тренер Ник Томец, и она является фаворитом, чтобы закрыть книги чемпионатом мира в Милуоки в следующие выходные и титулом в общем зачете Кубка мира в спринте, когда сезон закроется, и ее богатая карьера заканчивается в марте.

Если неизгладимые впечатления от Олимпийских игр 94-го года были выкованы для американцев на льду, первые намеки на то, что Игры останутся в памяти, появились на снегу. Томми Мо начал дело в день открытия с шокирующего расстройства на спуске.Его безошибочный спуск по ледяному полю в Квитфьелле стал первым золотом в скоростном спуске среди мужчин в США за десятилетие и первой победой Мо на мировой трассе.

Он был горяч, ему не повезло, и если кто-то сомневался в этом, то он развеял сомнения в свой 24-й день рождения шестью днями позже, когда он завоевал серебряную медаль в супергиганте. До этого ни один американский лыжник не выигрывал две медали на Олимпийских играх. Моу оба раза встречал у подножия горы его фотогеничный отец с острым подбородком Том, бывший аляскинским прыгуном с дымом и лесным пожарным, который носил куртку из волчьего меха и оставил телезрителям по всему миру более высокую оценку американский горец.

Они еще раз познакомились с Американой, когда эксцентричная подруга Мо по команде Пикабо Стрит выиграла серебро в женском скоростном спуске. Ее отец, Стабби, стареющий бывший хиппи из Триумфа, штат Айдахо, завернулся в выцветший американский флаг и часами рассказывал всем, кто готов был слушать, о его богатом и разнообразном жизненном опыте. Его философия: «Я не люблю спиртное и не люблю оружие. Я курю травку, чувак».

И Мо, и Стрит вернулись на чемпионат мира в этом году, борясь с неустойчивой европейской погодой, которая вынудила отменить чемпионат мира в начале этого месяца в Испании.Стрит набирает обороты, уже выиграв два спуска и заняв второе место сразу после товарища по команде Хиллари Линд в общем зачете Кубка мира.

У Мо был взлет и падение, а одно второе место стало его лучшим результатом на сегодняшний день. Товарищ по олимпийской команде Кайл Расмуссен тем временем уже имеет на своем счету победу в скоростном спуске, свою первую победу в мировых соревнованиях.

Американцы совершили очередной лыжный переворот в Лиллехаммере, когда Дайанн Роффе-Штайнроттер выиграла свою первую гонку за семь лет, взяв золото в женском супергиганте.Миниатюрная ветеран из северной части штата Нью-Йорк провела свой последний лыжный сезон и закрыла его на ура. В 27 лет она вернулась в колледж Университета Кларксона, где у нее средний балл 3,9, и учится в самолетах по выходным, отправляясь в различные горы для публичных выступлений.

Другим ярким событием мирового уровня в Америке стал конькобежный спорт в стиле преследования, когда 31-летняя Кэти Тернер ростом 5 футов 2 дюйма выиграла одно золото и у нее отобрали еще одно золото в спорном решении судей о том, что она вмешалась. с корейским соперником в беге на 1000 метров.

Тернер, впитавший в себя гнев всего мира как грязный скейтер, до сих пор кипит. «Даже президент Клинтон сказал, что меня ограбили», — сказала она из маленького городка недалеко от Рочестера, штат Нью-Йорк, где она владеет фитнес-центром, а ее муж, ветеринарный хирург, оперирует собак и кошек.

Тернер, ушедший из фигурного катания, имеет массу планов. Она снимает фильм, ведет мотивационные беседы, является певицей и автором песен и участвует в лыжных гонках для развлечения. «В этом мире, — говорит она, — нельзя сидеть сложа руки и ждать, пока что-то произойдет.Вы должны сделать так, чтобы они произошли.»

Может быть и так, но в холодной долине реки Мьоса в 100 милях к северу от Осло, где год назад рухнули надежды и сбылись мечты, маленький городок Лиллехаммер возвращается к нормальной жизни. Лоси борозды бороздят глубокий мягкий снег, золотящий замерзшее озеро, горожане толкают ручные санки по заснеженным улицам, нагруженные продуктами, а ночью звезды ярко горят в бездонном черном небе. «Я не был там в последнее время», — сказал тройной золотой медалист Йоханн Олав Косс, норвежец, который прилетел в Нью-Йорк на прошлой неделе, чтобы получить премию Джесси Оуэнса в Нью-Йорке, «но я уверен, что он вернулся к тому, что всегда было — тихий город.Прошел уже год? — размышлял он. — Кажется, все это только что произошло». ПОДПИСЬ: Одним из самых ярких воспоминаний об Олимпийских играх 94 года был Дэн Янсен и дочь Джейн, проехавшие круг почета после того, как папа выиграл золото.

Человеческий проминин-1 (CD133) обнаружен как при опухолевых, так и при неопухолевых заболеваниях слюнных желез и выделяется в слюну в убиквитинированной форме

Abstract

Проминин-1 (CD133) физиологически экспрессируется на апикальных мембранах секреторных (серозных и слизистых) и протоковых клеток больших слюнных желез.Мы исследовали его экспрессию в различных поражениях слюнных желез человека с использованием двух различных моноклональных антител против проминина-1 (80B258 и AC133), нанесенных на срезы, залитые парафином, и охарактеризовали его появление в слюне. Эпитоп 80B258 экстенсивно экспрессировался при аденоидно-кистозной карциноме, в меньшей степени при ациноклеточной карциноме и плеоморфной аденоме и редко при мукоэпидермоидной карциноме. Иммунореактивность 80B258 была преимущественно обнаружена на апикальной мембране опухолевых клеток, демонстрирующих ацинарную или интеркалированную дифференцировку клеток протоков, которые выстилают протоковые или цистоподобные структуры, а также в просветных выделениях.Он наблюдался на всей клеточной мембране в непросветных структурах, присутствующих вблизи тонкостенных кровеносных сосудов и геморрагических участков при аденоидно-кистозной карциноме. Следует отметить, что AC133 пометил только часть 80B258-позитивных структур. В перитуморальных тканях слюнных желез, а также при обструктивном сиалоадените в клетках вставочных протоков наблюдалась активация проминина-1 (иммунореактивность как 80B258, так и AC133). В большинстве тканей проминин-1 частично коэкспрессируется с двумя маркерами рака: карциноэмбриональным антигеном (СЕА) и муцином-1 (MUC1).Дифференциальное центрифугирование слюны с последующим иммуноблоттингом показало, что все три маркера высвобождаются вместе с небольшими мембранными везикулами. Иммуно-изолированные проминин-1-положительные везикулы содержали CEA и MUC1, а также белки, связанные с экзосомами CD63, флотиллин-1, флотиллин-2 и адапторный белок синтенин-1. Было показано, что последний белок взаимодействует с проминином-1, о чем свидетельствует его коиммуноизоляция. Фракция проминина-1, ассоциированного со слюной, оказалась убиквитинированной. В совокупности наши результаты дают новое представление о биохимии и транспортировке проминина-1, а также о его иммуногистохимическом профиле при определенных типах опухолей слюнных желез и воспалительных заболеваниях.

Образец цитирования: Karbanová J, Laco J, Marzesco A-M, Janich P, Voborníková M, Mokrý J, et al. (2014) Человеческий проминин-1 (CD133) обнаружен как при опухолевых, так и при неопухолевых заболеваниях слюнных желез и высвобождается в слюне в убиквитинированной форме. ПЛОС ОДИН 9(6): е98927. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927

Редактор: Сюэфэн Лю, Джорджтаунский университет, США

Получено: 27 января 2014 г.; Принято: 8 мая 2014 г .; Опубликовано: 9 июня 2014 г.

Copyright: © 2014 Karbanová et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: JK поддержано Грантовым агентством Чешской Республики (GACR 304/07/P307). JL была поддержана программой ПРВОУК P37/11 и проектом LM2010004. JM и MV поддерживались программой ПРВОУК P37/6. WBH поддерживали Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB655 A2; TRR83 TP6) и DC (SFB 655 B3; TRR83 TP6; CO298/5-1).Sächsisches Staatsministerium für Wissenschaft und Kunst поддержал JK, CAF и DC. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Проминин-1 (псевдоним CD133) представляет собой холестерин-связывающий мембранный гликопротеин, избирательно связанный с выпячиваниями плазматической мембраны (например, микроворсинками, первичной ресничкой) [1], [2].Это первый член семейства пентаспановых мембранных гликопротеинов промининов, который экспрессируется во всем царстве животных [3]–[5]. Проминин-1 человека, выявляемый широко используемым моноклональным антителом (мАт) AC133 [6], маркирует многочисленные соматические стволовые клетки и клетки-предшественники, происходящие из различных тканей и органов [4], [7]–[10]. Он также экспрессируется раковыми стволовыми клетками, обладающими способностью к самообновлению и инициированию опухолей. Было показано, что проминин-1-положительные стволовые клетки рака устойчивы как к лучевой терапии [11], так и к химиотерапии [12].Частота метастазирования положительно коррелировала с его выраженностью [13], [14] (обзор в [15]).

В последние годы мы продемонстрировали, что экспрессия проминина-1 человека, как и его мышиного ортолога, не ограничивается исключительно стволовыми клетками [16]. Применяя антисыворотку кролика (названную анти-hE2) или mAb мыши (клон 80B258), созданные против полипептида проминина-1, на ткани человека, мы обнаружили проминин-1 в различных железистых эпителиях, включая поджелудочную железу, печень, предстательную железу и большие слюнные железы [17]. ]–[20].В последних тканях проминин-1 был обнаружен исключительно на апикальной/апиколатеральной клеточной мембране секреторных и протоковых клеток [19]. Следует отметить, что проминин-1 также высвобождается вместе с мембранными везикулами в некоторые биологические жидкости, включая спинномозговую жидкость, мочу и слюну [21]–[24]. Хотя физиологическая функция мембранных везикул, содержащих проминин-1, еще не известна, их повышенное количество, наблюдаемое в спинномозговой жидкости пациентов с заболеваниями головного мозга, может быть информативным в отношении патогенеза [25], [26] (обзор в [27 ]).Подробные исследования природы, происхождения и состава этих мембранных везикул, содержащих проминин-1, могут предоставить не только клиническую информацию о прогрессировании заболевания, но и об альтернативных биомаркерах [15], [28].

Экспрессия мышиного и человеческого проминина-1 в больших слюнных железах и присутствие мембранных везикул, содержащих проминин-1, в слюне человека привлекли наше внимание к его экспрессии при поражениях слюнных желез [19], [21], [29]. . Опухоли слюнных желез встречаются редко, ежегодная заболеваемость колеблется от 0.4–16,5 случаев на 100 000 [30]. Подавляющее большинство из них доброкачественные, а наиболее распространенной опухолью является плеоморфная аденома (ПА), поражающая преимущественно околоушную железу [30]. Злокачественные опухоли слюнных желез затрагивают как большие, так и малые слюнные железы, и наиболее частыми являются мукоэпидермоидный (MEC), аденоидно-кистозный (AdCC) и ацинозно-клеточный рак (AciCC). Рак слюнных желез представляет собой сложную проблему из-за сложности диагностики, низкой успешности лечения и плохой выживаемости в отдаленном периоде.

В настоящей работе мы исследовали экспрессию проминина-1 в неопухолевых и неопластических слюнных железах человека в отношении гистоморфологического аспекта тканей. Параллельно мы определили его возможную коэкспрессию с двумя онкомаркерами; карциноэмбриональный антиген (СЕА) и муцин-1 (MUC1; эпителиальный мембранный антиген, раковый антиген СА 15–3). Последние гликопротеины экспрессируются на низких уровнях в широком диапазоне эпителиальных тканей, включая слюнные железы. Они преимущественно расположены на апикальной мембране клеток, выстилающих просветные структуры [31]–[34].Их экспрессия повышена при различных видах рака [35]–[37], а сверхэкспрессия и/или аберрантная локализация MUC1 рассматриваются как неблагоприятный прогностический фактор [33], [38] (обзор в [39]). Оба белка также высвобождаются в кровь, и повышенные уровни в крови используются в качестве индикатора наличия запущенных форм некоторых карцином или их послеоперационного рецидива. CEA и MUC1 (CA 15–3) используются в качестве биомаркеров колоректального рака и рака молочной железы/яичников соответственно [40]–[42].Их количество в слюне повышено не только при раке слюнных желез [43], [44], но и при раке молочной железы [45]–[47]. Хотя общепризнано, что CEA и MUC1 выделяются в жидкости организма в растворимой форме [48]–[50], недавние исследования показали, что они могут секретироваться в ассоциации с мембранными везикулами, такими как экзосомы [51], [51]. 52].

Здесь мы обнаружили, что проминин-1 экспрессировался в структурах, подобных протокам/кистам, а также в секрете как неопухолевых поражений, так и хорошо или умеренно дифференцированных злокачественных опухолей, тогда как он отсутствовал в низкодифференцированных MEC высокой степени.Интересно, что частичная коэкспрессия с CEA и MUC1 наблюдалась почти во всех образцах тканей, что свидетельствует о том, что проминин-1 может дополнять и в конечном итоге расширять клиническую информацию, полученную с CEA и MUC1. Кроме того, было обнаружено, что CEA и MUC1 связаны с мембранными везикулами, содержащими проминин-1, высвобождаемыми в слюну, что согласуется с иммунореактивностью всех трех белков в секретируемых материалах, наблюдаемых в образцах тканей AdCC и PA. Мы впервые сообщаем, что внутри этих внеклеточных мембранных везикул проминин-1 подвергался убиквитинированию и взаимодействовал с синтенином-1 (также известным как ген 9, ассоциированный с дифференцировкой меланомы (mda-9)).Недавние исследования подчеркнули важность синтенина-1 в метастатическом распространении злокачественных опухолей [53], предполагая, что комплекс проминин-1-синтенин-1 может быть вовлечен в прогрессирование заболевания.

Материалы и методы

Заявление об этике

Все иммуногистологические образцы были получены и обработаны в соответствии с общими этическими критериями, принятыми в университетской клинике Градец Кралове (Чехия). Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией 1975 г. и было одобрено Этическим комитетом университетской клиники Градец Кралове (выдано 1 апреля st , 2010 г.; рег.№ 201004С12П). Образцы тканей представляли собой биооптические материалы, полученные из уже существующего архива отделения патологии Fingerland университетской клиники Градец Кралове. Образцы были собраны у пациентов, перенесших терапевтическую резекцию в период с 1998 по 2009 год, и представляли собой анонимные материалы, которые не использовались для генетического анализа. Целые образцы слюны были собраны у четырех здоровых добровольцев, не получавших медикаментозное лечение, в наших лабораториях, как описано ранее [21]. Они были полностью осведомлены об экспериментальной процедуре, дали устное информированное согласие и принимали непосредственное участие в проекте.Материалы, полученные из слюны, не использовались для генетического анализа и не архивировались. Государственное министерство окружающей среды и сельского хозяйства Саксонии (Sächsisches Staatsministerium für Umwelt und Landwirtschaft, SMUL) дало согласие на проведение этих экспериментов (выдано 27 сентября -го , 2004 г.; рег. № Az. 56-8811.71/160).

Образцы тканей

Для иммуногистохимии обработано 46 фиксированных формалином и залитых парафином патологических образцов слюнных желез, пораженных различными опухолями или обструктивным сиалоаденитом (СА).Гистопатологические характеристики отдельных случаев описаны в таблице S1. Классификация опухолей и система стадирования TNM оценивались в соответствии с критериями ВОЗ [54], тогда как гистологическая классификация, патоморфологическое описание и используемая терминология соответствовали Ellis и Auclair [30].

Иммуногистохимия

Иммуногистохимическое определение проминина-1 проводили с двумя охарактеризованными mAb, т.е. клонами 80B258 и AC133, направленными против белка человека [6], [19], как описано ранее [19].Вкратце, из блоков парафиновой ткани вырезали серийные срезы тканей толщиной пять микрометров, помещали на предметные стекла, предварительно обработанные хромовыми квасцами и желатином, и сушили в течение ночи при комнатной температуре. Срезы, залитые парафином, депарафинизировали обработкой ксилолом (4×10 мин), гидратировали этанолом с уменьшающейся концентрацией (96, 80 и 70%) в течение 10 мин, а затем дважды промывали дистиллированной водой по 10 мин каждый, все при комнатной температуре. . Для иммунодетекции проминина-1 использовали два независимых метода поиска антигена.При использовании клона mAb AC133 срезы подвергали воздействию микроволн (700 Вт) в растворе цитрата натрия (pH = 6,0) в течение 2×5 мин, тогда как срезы клона mAb 80B258 обрабатывали 0,005% SDS в PBS в течение 30 мин. После тщательной промывки PBS образцы инкубировали с 5% H 2 O 2 (3×10 мин) для подавления активности эндогенной пероксидазы. Затем срезы инкубировали в 5% нормальной козьей сыворотке (Sigma, Дармштадт, Германия) в PBS (блокирующий буфер) в течение 20 минут при комнатной температуре.После этого срезы инкубировали с мышиными mAb, распознающими проминин-1, CEA или MUC1, разведенными в разбавителе антител с компонентами, уменьшающими фон (DAKO Cytomation, Glostrup, Дания), в течение ночи при 4°C. Антитела против CEA или MUC1 охарактеризованы и широко используются в тестах на рак [35], [55]–[57] (таблица S2). После промывания PBS срезы инкубировали с набором против мышиной пероксидазы EnVision (DAKO Cytomation) в течение 30 мин при комнатной температуре. После промывки в PBS проводили цветные реакции с хромогеном DAB (3,3′-диаминобензидинтетрагидрохлорид; 2 мкг/мл; Fluka, Дармштадт, Германия) в соответствии с инструкциями производителя.Осадок ДАБ интенсифицируют 3% раствором CuSO 4 в течение 5 мин. Затем срезы докрашивали гематоксилином Майера, обезвоживали и заключали в среду для заливки DPX (Fluka). В качестве отрицательного контроля соседние срезы обрабатывали параллельно либо без первичного антитела, либо с контролем изотипа IgG1 (MOPC-21; 10 мкг/мл, Sigma). Слайды исследовали с помощью микроскопа Olympus BX61, а изображения готовили с использованием программ Adobe Photoshop и Illustrator. Образцы оценивали полуколичественно по площади опухоли, покрытой иммунореактивными структурами: – 0%; +, <10%; ++, 10–25%; +++, 25–50%; ++++, >50%.

Двойное иммунофлуоресцентное окрашивание проводили следующим образом. Для окрашивания проминина-1 (эпитоп AC133) и маркера пролиферации Ki67 поиск антигена проводили с использованием микроволнового нагрева в цитратном буфере. Для окрашивания проминина-1 (эпитоп 80B258) и окрашивания CEA или MUC1 срезы обрабатывали 0,005% SDS в PBS в течение 30 мин. Срезы инкубировали в блокирующем буфере в течение 20 мин, затем подвергали воздействию первичных антител в течение ночи при 4°С. После промывания в PBS срезы инкубировали с комбинацией либо конъюгированного с Alexa Fluor 546 козьего антимышиного IgG1/конъюгированного с Alexa Fluor 488 козьего антимышиного IgG2b (Molecular Probes, Invitrogen Corp., Карлсбад, Калифорния) или Cy3-конъюгированные козьи антимышиные/Cy2-конъюгированные козьи антикроличьи (1∶400; ​​Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) вторичные антитела. Ядра контрастировали 4′-6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI; Sigma). Срезы помещали в Mowiol 4.88 (Merck, Дармштадт, Германия) и исследовали под микроскопом Olympus BX61.

Дифференциальное центрифугирование слюны

Образцы слюны, полученные от четырех индивидуальных доноров между 9:00 и 11:00 утра путем сплевывания в стерильные пробирки объемом 50 мл, разводили в равном объеме охлажденного льдом PBS, фильтровали через марлю и подвергали дифференциальному центрифугированию следующим образом: 5 мин. при 300 г ; супернатант, 20 мин при 1200 г ; супернатант, 30 мин при 10000 г ; супернатант, 1 час при 200000 г ; супернатант, 1 час при 400000 г .Белки в супернатанте 400000 г концентрировали осаждением метанолом/хлороформом (4∶1). Полученные осадки ресуспендировали в буфере для образцов Лэммли и анализировали с помощью иммуноблоттинга.

Иммуноизоляция мембранных везикул

Иммуноизоляцию мембранных везикул из слюны проводили при 4°C с использованием иммуномагнитных шариков (Miltenyi Biotec, Bergish Gladbach, Германия), как описано ранее [28]. Вкратце, мембранные везикулы, присутствующие в супернатанте, полученном после центрифугирования (30 мин, 10 000 g , 4°C) слюны, предварительно инкубировали с козьими антимышиными IgG-магнитными шариками (25 мкл/мл слюны) в течение 1.5 часов при 4°С. Образцы наносили на охлажденную льдом колонку LS, кондиционированную PBS (Miltenyi Biotec), помещенную в магнитное поле, и собирали поток, содержащий предварительно очищенные материалы. Половину фракции инкубировали с мышиными mAb AC133-магнитными шариками (40 мкл/мл слюны) в течение 2 часов при 4°С. Другую половину фракции инкубировали с козьими антимышиными IgG-магнитными шариками в качестве отрицательного контроля. Затем образцы подвергали магнитной сепарации с использованием колонок LS. Материалы, оставшиеся в колонках, промывали 3×3 мл ледяного PBS, а затем промывали PBS, содержащим 2 мМ EDTA, вне магнитного поля.Были собраны проточные материалы. Как элюированные, так и проточные фракции центрифугировали в течение 1 часа при 200 000 g для получения связанных и несвязанных материалов соответственно. Супернатанты несвязанных фракций собирали осаждением метанолом/хлороформом. Белки ресуспендировали в буфере для образцов Лэммли и анализировали с помощью иммуноблоттинга.

Иммуновыделение проминина-1 и расщепление гликозидазой

Материалы, извлеченные после центрифугирования (1 час, 200 000 г , 4°C) 10 000 г супернатанта слюны, солюбилизировали в течение 30 минут на льду либо в лизирующем буфере А (50 мМ Трис/HCl, pH 8.0, 150 мМ NaCl, 1 % Triton X-100, 0,01 % SDS, 0,05 % дезоксихолата натрия) или B (50 мМ Tris/HCl pH 8,0, 150 мМ NaCl, 0,2 % Triton X-100; для экспериментов по совместному выделению с синтенин-1/эзрин), содержащий 1 мМ фенилметилсульфонилфторида и полный коктейль ингибиторов протеазы (Roche, Базель, Швейцария), тогда как 200 000 г супернатанта сохраняли для дальнейшего анализа. После центрифугирования (10 мин, 16000 g , 4°C) лизат детергента разделяли на две фракции, которые инкубировали либо с mAb AC133-магнитными гранулами (45 мкл/мл слюны), либо с козьими антимышиными IgG-магнитными гранулами. (45 мкл/мл слюны) в качестве отрицательного контроля в течение 2 часов (4°C) перед магнитным разделением с использованием колонок MS.Материалы, оставшиеся в колонках, промывали 6×1 мл охлажденного льдом PBS, содержащего 2 мМ EDTA и 0,1% Triton X-100, а затем промывали тем же буфером. Были собраны проточные материалы. Связанные и несвязанные (проточные) фракции и 200000 г надосадочной жидкости (см. выше) подвергали осаждению метанолом/хлороформом. Белки ресуспендировали в буфере для образцов Лэммли и анализировали с помощью иммуноблоттинга. Альтернативно, перед анализом осадок иммуно-магнитно-изолированного проминина-1 инкубировали 5 часов при комнатной температуре в отсутствие или в присутствии 1 ЕД пептид-N-гликозидазы F (PNGase F) в соответствии с протоколами производителя (Roche Diagnostics). GmbH, Мангейм, Германия).

Иммуноблоттинг

Белки разделяли электрофорезом в SDS-полиакриламидном геле (SDS-PAGE; 6% для MUC1, 10% для CD63 и синтенина-1, 7,5% для других) и переносили на мембрану из поливинилидендифторида (PVDF) (Millipore , Бедфорд, Массачусетс: размер пор 0,45 мкм) с использованием системы полусухого переноса (Cti, Идштейн, Германия), как описано ранее [58]. После переноса мембраны инкубировали в блокирующем буфере (PBS, содержащем 5% сухого молока с низким содержанием жира и 0,3% Tween 20) в течение ночи при 4°C, а затем исследовали с первичными антителами (см. Таблицу S2) в течение 1 часа при комнатной температуре.Комплексы антиген-антитело выявляли с использованием соответствующих вторичных антител, конъюгированных с пероксидазой хрена (HRP) (AffiniPure кроличьи антимышиные IgG, козьи антимышиные IgG2b, козьи антимышиные IgG, специфичные к легкой цепи, или козьи антикроличьи IgG; Jackson Immunoresearch) и визуализировали с помощью реагентов с усиленной хемилюминесценцией (система ECL; Amersham Corp., Arlington Heights, IL). Мембраны подвергали воздействию пленок (Hyperfilm ECL; Amersham-Pharmacia) и количественно определяли после сканирования с использованием программного обеспечения ImageJ.

Результаты

Экспрессия PROMININ-1 в опухолях слюнных желез

Залитые парафином срезы различных поражений слюнных желез человека, включая PA, AciCC, MEC и AdCC и обструктивную SA, исследовали на экспрессию проминина-1 с использованием двух охарактеризованных mAb: 80B258 и AC133 [6], [19].Наша оценка была сосредоточена на наличии иммунореактивности проминина-1 в отношении цитоархитектоники, включая характер роста и цитоморфологию, ее локализацию по всей опухоли и совпадение с воспалительными и геморрагическими участками (данные обобщены в таблице 1).

Плеоморфная аденома.

При ПА околоушных желез иммунореактивность 80В258 наблюдалась на апикальной плазматической мембране эпителиальных клеток редких протокообразных структур (рис. 1А, В, Д-Ж, черная стрелка) и в их секрете (рис.1С, звездочка). Только часть из них проявляла слабую иммунореактивность AC133 (рис. 1B, D). 80B258-положительные структуры наблюдались по всей опухоли, при этом общая встречаемость составляла менее 10% площади (таблица 1). Хондроидные, миксохондроидные и гиалинизированные участки, составляющие мезенхимоподобный компонент, были отрицательными (рис. S1A-C). При изотипическом контроле иммунореактивности не наблюдалось (рис. 1B’, C’, G’, контрол).

Рис. 1. Иммунодетекция проминина-1 при плеоморфной аденоме.

Соседние срезы отдельных отдельных случаев ПА были иммуномечены либо 80B258 ( A , C , E–G ), либо AC133 ( B , D ) mAb1, направленными против проминоконтроля или изотипа ( B ‘, C ‘, G , контроль) до контрастного окрашивания гематоксилином. Области в рамках ( A1–D1 ) отображаются с большим увеличением на соответствующей вставке. Закрашенные черные и полые стрелки указывают на наличие (A G) или отсутствие (B′, C′, G′) проминина-1 на апикальной мембране клеток редких протоковых структур соответственно.Звездочки указывают на иммуноположительную секрецию. Гистопатологические характеристики отдельных случаев: № 1 (A, B), № 2 (C, D) и № 5 (E G) обобщены в таблице S1. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g001

Ациноклеточная карцинома.

В AciCC иммунореактивность 80B258 наблюдалась в участках с микрокистозным (МК; рис. 2А, Б) и папиллярно-кистозным (ПК; рис. 2В-Д) характером роста, где она составляла менее 10% и более 25% общей площади соответственно (табл. 1).В характере роста СК 80B258-позитивные клетки преимущественно обнаруживались в периферических отделах (6 из 11 случаев (6/11)) либо лобулярно-растущей опухоли (рис. 2В), либо в отдельных узлах (рис. 2А, S2А, В). и/или в геморрагических (рис. S2C, красная звездочка; 4/11) или воспалительных участках (рис. 2B, желтая звездочка; 3/11). В целом, иммунореактивность 80B258 была обнаружена на апикальной плазматической мембране опухолевых клеток с ацинарной (рис. 2A1, наконечник стрелки) или интеркалированной протоковой (рис. 2B1, наконечник стрелки) морфологией. В характере роста ПК иммунореактивность 80B258 наблюдалась во вставочных протокоподобных клетках, распределенных по всей опухоли (рис.2C1, D, E, наконечник стрелки). Напротив, иммунореактивность AC133 была обнаружена только спорадически на апикальной мембране некоторых опухолевых клеток с типом роста PC (рис. 2F, наконечник стрелки). Секрет, присутствующий в просвете, обычно не обладал иммунореактивностью проминина-1 (рис. 2C, D, F, звездочка).

Рис. 2. Иммунодетекция проминина-1 при ациноклеточной карциноме.

Соседние срезы отдельных отдельных случаев AciCC были иммуномечены моноклональными антителами 80B258 ( A–E ) или AC133 ( F ), направленными против проминина-1, или изотипическим контролем ( A1 ‘, B1

‘, C ‘, Ctrl) до контрастного окрашивания гематоксилином.Области в рамках ( A1–C1 , F1 ) отображаются с большим увеличением. Черные стрелки указывают на проминин-1 на апикальной мембране ацинарных (A1) и вставочных протокоподобных (B1, C1-F1) клеток в опухолях с микрокистозным (A, B) или папиллярно-кистозным (C-F) характером роста. Черные и желтые звездочки показывают отрицательность секреции и лейкоцитарной инфильтрации соответственно. CT , соединительная ткань, окружающая опухоль. Гистопатологические характеристики отдельных случаев: № 1 (A), № 2 (B), № 4 (C), № 5 (D, F) и № 8 (E) приведены в таблице S1.Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g002

Ацинарные (рис. S1D1, E1, черная стрелка) или неспецифические железистые (рис. S1E2, белая стрелка) клетки, обнаруженные в областях с солидными динамика роста была отрицательной. При использовании изотипического контроля иммунореактивности выявлено не было (рис. 2А1′, В1′ С’, контрол).

Мукоэпидермоидная карцинома.

В MEC иммунореактивность 80B258 наблюдалась только в двух из пятнадцати случаев, демонстрируя низкую/промежуточную степень и кистозное или папиллярно-кистозное расположение клеток (таблица 1).При этом иммуномечение было обнаружено в некоторых цистоподобных структурах и ограничивалось апикальной плазматической мембраной либо нехарактерных столбчатых клеток (рис. 3А-С, С2, черная стрелка), либо клеток с выраженной дифференцировкой слизистых клеток, т.е. с уплощенной ядро расположено в базальной части, а цитоплазма заполнена гранулами муцина (рис. 3С, С1, синяя стрелка). Кроме того, реснички редких дифференцированных опухолевых клеток были положительными (рис. 3B1, красная стрелка). В одном случае наблюдалось совпадение с кровоизлиянием в окрестности 80B258-позитивных структур (рис.3С, красная звездочка). Иммунореактивные структуры покрывали менее 10% площади опухоли (табл. 1). Секреция (рис. 3А, С, черная звездочка), а также промежуточные (рис. S1F, белая стрелка), плоскоклеточные (рис. S1G, H, синяя стрелка), прозрачные (рис. S1I-K, черная стрелка) и анапластические клетки (рис. 3E, F, красная стрелка) были отрицательными. При использовании mAb AC133 иммунореактивность не была обнаружена (таблица 1). Интересно, что иммунореактивность проминина-1 не была обнаружена в карциномах высокой степени злокачественности (таблица 1). У пациентов с явным инфильтративным ростом мы тем не менее могли наблюдать 80B258/AC133-иммунореактивные остатки вставочных протоков исходной ткани слюнных желез (рис.3D–F, зеленый наконечник стрелки; 1), нередко с обильной лейкоцитарной инфильтрацией, вкрапленной среди опухолевых тканей (рис. 3Д, желтая звездочка). Во всех ситуациях иммунореактивность не была обнаружена с использованием изотипического контроля (рис. 3C’, белая стрелка, Ctrl).

Рисунок 3. Иммунодетекция проминина-1 при мукоэпидермоидной карциноме.

Срезы отдельных отдельных случаев MEC были иммуномечены либо mAb 80B258 ( A–F ), направленными против проминина-1, либо изотипическим контролем ( C ′, контроль) перед контрастным окрашиванием гематоксилином.Области в рамках ( B1 , C1 , C2 ) отображаются с большим увеличением. Черные, синие и красные стрелки указывают на иммунореактивность 80B258 на апикальной мембране некоторых столбчатых (A, B, C, C2), слизистых (C, C1) и реснитчатых (B1) клеток, выстилающих кистозные опухолевые структуры, соответственно. Красные стрелки указывают на негативность анапластических клеток (E, F). Пунктирная линия отделяет опухоль ( T ) от окружающей нормальной ткани (синяя звездочка, D). Черная звездочка, иммунонегативный секрет; красная звездочка, геморрагические участки; желтая звездочка, лейкоцитарная инфильтрация; зеленая стрелка, нераковые вставочные протоки.Гистопатологические характеристики отдельных случаев: № 8 (A), № 5 (B, C) и № 13 (D – F) обобщены в таблице S1. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g003

Аденоидно-кистозная карцинома.

При AdCC 80B258-положительные структуры наблюдались по всей опухоли и покрывали 10–75% от общей площади (рис. 4; таблица 1), что разительно контрастирует с другими исследованными типами карцином. Интересно, что большинство протокообразных структур, характерных для крибриформного паттерна роста, который преимущественно присутствовал в наших образцах, проявляли иммунореактивность 80B258 (рис.4А, Д). В частности, иммунореактивность 80B258 была ограничена апикальной плазматической мембраной вставочных протокоподобных клеток, присутствующих в опухоли (рис. 4B, C, черная стрелка) и ее неопухолевых окрестностей (рис. 4A, B, белая стрелка). Базалоидные миоэпителиальные клетки и псевдокисты, состоящие из богатой мукополисахаридами стромы опухоли, были отрицательными (рис. 4С, черные стрелки и зеленая звездочка соответственно). Примечательно, что интенсивная иммунореактивность 80B258 была обнаружена в секрете, присутствующем в просвете протокоподобных структур (рис.4С, белая звездочка). Хотя в целом маркировка AC133 была слабее, она давала аналогичный результат как в протоковых структурах, так и в секреции (Fig. 4E). Следует отметить, что в 3 из 7 случаев мы наблюдали иммунореактивность 80B258 в цитоплазме и/или всей плазматической мембране клеток либо в солидно растущих структурах, содержащих непросветные клетки (рис. S3B-D, синяя стрелка). , или протоковые структуры, состоящие из обычно расслоившихся клеток, окруженных обильным секретом (рис. 4F1, черная стрелка и белая звездочка соответственно).Часто структуры, содержащие клетки с неполяризованным распределением иммунореактивности проминина-1, обнаруживались вблизи многочисленных интактных или поврежденных тонкостенных кровеносных сосудов (рис. 4F–H, красная звездочка), что свидетельствует о потенциальной связи эритроцитов с опухолевыми клетками и /или секретируемых материалов (рис. 4G-I, S3C, красные и синие стрелки). При использовании изотипического контроля иммунореактивности обнаружено не было (рис. 4D’, S3A-F, контрольная группа).

Рис. 4. Иммунодетекция проминина-1 при аденоидно-кистозной карциноме.

Смежные участки AdCC с крибриформным характером роста были иммуномечены либо 80B258 ( A-D , F-I ), либо AC133 ( E ) mAb, направленными против проминина-1, или изотипическим контролем ( D ‘ , контроль) перед контрастным окрашиванием гематоксилином. В качестве альтернативы срезы подвергали двойному иммунофлуоресцентному мечению моноклональными антителами AC133 (красный) и антисывороткой Ki67 (зеленый). Ядра визуализировали с помощью DAPI ( J-M ). Области в рамках ( F1 , G1 ) отображаются с большим увеличением.Зеленые пунктирные линии указывают на соответствующие структуры на последовательных участках. Незлокачественная окружающая ткань (А, В, синяя звездочка) отграничена от опухоли черной пунктирной линией; красная пунктирная линия указывает на серозный ацинус. Закрашенные черные и белые стрелки указывают на проминин-1 на апикальной мембране, выстилающей эпителий опухолевых протокоподобных структур (C, J, L) или незлокачественных вставочных протоков (A, B). Черные стрелки указывают на проминин-1 в цитоплазме и/или всей клеточной мембране раковых клеток (F1) или в секретируемых материалах, смешанных с эритроцитами (G, I), присутствующих в геморрагических областях (F-I, красная звездочка).Красные стрелки обозначают свободные (т.е. неприкрепленные) опухолевые клетки между эритроцитами (G1, I). Белая звездочка указывает на иммунореактивную секрецию проминина-1 в истинном просвете (C, F1, L), тогда как зеленая звездочка и черная стрелка показывают псевдокисты и базальные миоэпителиальные клетки (C), в которых отсутствует проминин-1, соответственно. Синие стрелки и оранжевые стрелки (J-M) указывают на Ki67-положительные клетки, которые коэкспрессируют или не экспрессируют AC133 соответственно. Гистопатологические характеристики показанного случая № 2 (AM) обобщены в таблице S1.Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g004

Чтобы выяснить, приурочены ли проминин-1-положительные клетки к активно пролиферирующим, мы провели двойное иммунофлуоресцентное мечение маркером пролиферирующих клеток Ki67. Интересно, что Ki67-положительные циклирующие клетки преобладали в областях с AC133-иммунонегативными опухолевыми клетками (рис. 4J, оранжевая стрелка) или присутствовали во вновь образованных и узких протокообразных структурах, положительных по AC133 (рис.4J, K, M, синяя стрелка). Напротив, более крупные просветы с обильными иммунореактивными выделениями AC133 (рис. 4J, L, белая звездочка) были окружены непролиферирующими AC133-позитивными клетками (рис. 4L, черная стрелка).

Увеличение экспрессии PROMININ-1 в перитуморальных областях и при сиалоадените

В неопухолевых тканях слюнных желез, окружающих опухоли (рис. 5A–F; T ), и в случаях обструктивного СА (рис. 5G–J) мы наблюдали повышенную экспрессию проминина-1 во вставочных протоках. с использованием моноклональных антител 80B258 и AC133 (фиг.5C–F, I, J, черная стрелка). AC133 проявлял более слабую реакционную способность по сравнению с 80B258, но, тем не менее, регулярно обнаруживался. В обоих состояниях мы обнаружили различные степени воспаления с перидуктальной лейкоцитарной инфильтрацией (рис. 5А, Б, Н-Ю, черная звездочка) и атрофию функциональных секреторных тканей (рис. 5Б, Ж, оранжевая стрелка), приводящую к их замещению интеркалированными. протокоподобные клетки (рис. 5В, Н) и/или жировая ткань (рис. 5А, В, Ad ) или соединительная ткань (рис. 5А, В, Н, CT ).Вариации иммунореактивности проминина-1 в ацинусах были связаны с их сложными изменениями. Во-первых, дегенерация ацинарных клеток, где в норме проминин-1 экспрессируется слабо (рис. 5А, G, зеленая пунктирная линия и наконечник стрелки), привела к его полному отсутствию в них (рис. 5G, серая пунктирная линия и наконечник стрелки). Во-вторых, застой слюны вызывал расширение межклеточных канальцев между серозными ацинарными клетками (рис. 5G, красная стрелка), что провоцировало их атрофию (рис. 5B, G, оранжевая стрелка) и/или их замещение пролиферирующими клетками вставочных протоков (т.е. клетки без базофильных секреторных гранул). Это привело к интенсивному мечению проминина-1 либо на апикальной (рис. 5B, черная стрелка), либо на апико-латеральной (рис. 5B, H, синяя стрелка) мембране вновь образованных протокоподобных клеток. В-третьих, нормальные вставочные протоки с маленьким и правильным просветом (рис. 5А, G, фиолетовая линия) стали расширенными с нерегулярным просветом или без него (рис. 5В, G, H, черная линия) и привели к сильной экспрессии проминина-1. в просветных клетках (рис. 5G, H, черная стрелка).

Рисунок 5.Иммуноопределение проминина-1 в окружающих опухоль тканях и при сиалоадените.

Срезы неопухолевых перитуморальных тканей ПА ( А , В , С , D ), МЭК ( Е , F , F 9013 ) и СА от ранней (обструктивной) причины , I , J ) и более поздние ( H ) стадии, соответственно, были иммуномечены моноклональными антителами 80B258 (A–C, E, G–I) или AC133 (D, F, J), направленными против проминина-1. до окрашивания гематоксилином.Наборы изображений C/D, E/F и I/J показывают соответствующие области в последовательных разделах. Области в рамках ( C1–F1 , I1 , J1 ) отображаются с большим увеличением. Неопухолевая ткань отделена от опухоли ( T ; A-F) пунктирной линией. Черные звездочки обозначают области воспаления (A, B, H–J). Зеленые, красные и серые пунктирные линии обозначают нормальные (A, G), дегенерирующие (G) или атрофированные (G) ацинусы, содержащие узкие, расширенные или нераспознаваемые межклеточные канальцы (G, помеченные стрелкой соответствующего цвета), демонстрирующие слабые, сильные или отсутствие иммунореактивности 80B258 соответственно.Оранжевые стрелки показывают атрофические секреторные наконечники (B, G). Фиолетовые, черные и синие линии обозначают нормальные (A, G), расширенные (B, G, H) и новообразованные (H) вставочные протоки, соответственно, с гладким или, в последнем случае, неравномерным просветом. Черные и синие стрелки указывают на иммунореактивность апикальной (B, C1–F1, G, H, I1, J1) и апиколатеральной (B, H) клеточной мембраны с 80B258 (B, C1, E1, G, H, I1) или AC133 (D1 , F1, J1) mAb. Ad , адипоциты, CT , соединительная ткань. Гистопатологические характеристики отдельных случаев ПА: № 9 (А) и № 5 (Б, В, Г), МЭК: № 4 (Д, Е) и СА: № 2 (Ж, И, К) и № 1 ( H) представлены в таблице S1.Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g005

Частичная коэкспрессия PROMININ-1 с CEA и MUC1

Чтобы выяснить, существует ли связь между экспрессией проминина-1 и другими маркерами рака, такими как CEA и MUC1, мы повторно исследовали наши образцы со специфическими и охарактеризованными антителами. мАт Parlam 4 специфически метят СЕА без перекрестной иммунореактивности с другими родственными СЕА белками [55], тогда как мАт 115D8 [57] и DF3 [35] направлены против углеводного и корового пептидного эпитопов MUC1 соответственно [59].Последние антитела используются в качестве ловушек и трассеров в коммерчески доступных иммуноанализах рака для CA15-3 [60].

При AdCC, где была обнаружена сильная экспрессия проминина-1, мы наблюдали коэкспрессию с CEA либо на апикальной плазматической мембране клеток, формирующих большинство протокоподобных структур (рис. 6A, B, наконечник стрелки), либо в секрете (рис. 6В, звездочка). В случае MUC1 некоторые структуры коэкспрессировали оба маркера (рис. 6C, D, черная стрелка), в то время как другие экспрессировали только один или другой (рис.6С, красная и зеленая стрелки). Дополнительные случаи AdCC подтвердили, что паттерн экспрессии проминина-1 соответствует паттерну экспрессии как CEA, так и MUC1 с точки зрения структур (структуры протоков, секреция, рис. 6E, S3A, наконечник стрелки), субклеточной локализации (апикальная мембрана, рис. 6F, S3B, черная стрелка, иммунореактивность всей мембраны, рис. S3B-D, синяя стрелка) и локализация участка (кровоизлияния, рис. 6F, S3B-D, красная звездочка). Однако не все антитела давали полностью перекрывающиеся сигналы (рис.S3B-D, см. более слабую иммунореактивность DF3 по сравнению с 115D8; Рис. S3E, F, см. чередующиеся иммунореакции CEA или MUC1, черная стрелка). Аналогичная картина коэкспрессии наблюдалась для образцов PA (рис. 6G, S4A, B) и AciCC (рис. S2A-D). При этом иммунореактивность присутствовала на апикальной мембране просветных клеток, обнаруженных в кистозных/протоковых структурах (рис. 6G, S4A, B, S2B1, C1, черная стрелка), а также в геморрагических (рис. S2C, красная звездочка) или периферических неопластических регионы (рис.S2A–C). Однако протяженность СЕА- и MUC1-иммунореактивных областей была больше, чем у проминина-1 (таблица 1). Иногда мы наблюдали проминин-1-позитивные структуры, коэкспрессирующие либо CEA, либо MUC1 (рис. S2A, D, черная стрелка).

Рис. 6. Частичная коэкспрессия проминина-1 с CEA и MUC1 в различных опухолях слюнных желез.

Образцы AdCC ( A–D ) были дважды иммуномечены моноклональными антителами против проминина-1 80B258 (PROM-1; A D) и либо антисывороткой против CEA (CEA, A, B), либо анти-MUC1 mAb 115D8 (MUC1, C, D), а затем соответствующее вторичное антитело, конъюгированное с флуорохромом.Ядра визуализировали с помощью DAPI. Указаны коэкспрессия проминина-1 с CEA или MUC1 на апикальной мембране (B, D, черная стрелка) и секреция (звездочка). Стрелки (C) указывают на неперекрывающиеся и перекрывающиеся (черные) иммунореактивности проминина-1 (красный) или MUC1 (зеленый) в структурах, подобных протокам. Альтернативно, последовательные срезы AdCC ( E , F ), PA ( G ) и MEC ( H ) были иммуномечены пероксидазой с использованием mAb 80B258, Parlam 4 и 115D8/DF3, направленных против проминина-1, CEA. и MUC1, соответственно (E-H) или контроль изотипа (E-H, контроль) до контрастного окрашивания гематоксилином.Обратите внимание на сходный паттерн экспрессии в соответствующих структурах (черные стрелки) в AdCC и PA, но не в MEC. Красная звездочка, геморрагическая область. Гистопатологические характеристики отдельных случаев AdCC: № 2 (A – F), PA: № 5 (G) и MEC: № 5 (H) обобщены в таблице S1. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g006

В MEC наблюдались существенные различия. В отличие от сильной экспрессии MUC1, иммунореактивность проминина-1 и СЕА присутствовала лишь изредка (рис.S5A, F, оранжевые и зеленые стрелки соответственно) или даже отсутствуют (рис. 6H, S5B–E). Экспрессия MUC1 появилась на плазматической мембране и в цитоплазме большинства типов опухолевых клеток (рис. 6H, S5A–F, табл. 1).

Наконец, перитуморальные неопухолевые ткани и случаи СА показали коэкспрессию проминина-1, СЕА и MUC1 (115D8) на апикальной мембране секреторного эпителия и эпителия протоков (рис. S4C, D и E, F, черная стрелка). . Обнаружение MUC1 с помощью mAb DF3 обычно было слабее (рис.S4D) и/или присутствует редко (рис. S4D–F). При использовании изотипических контролей иммунореактивности обнаружено не было (рис. 6, S2–S5, контрольная группа).

PROMININ-1, CEA и MUC1 связаны с мембранными везикулами

Коэкспрессия prominin-1 с CEA и MUC1 в исследованных тканях привела нас к исследованию того, связаны ли последние два белка с мембранными везикулами, содержащими prominin-1, обнаруженными в слюне [21]. Такие частицы могут быть выделены либо ультрацентрифугированием при 200 000 90 003 g 90 004 [21], [29], либо выделены с помощью моноклональных антител AC133, конъюгированных с магнитными шариками [28].

Дифференциальное центрифугирование слюны человека с последующим иммуноблоттингом показало, что CEA и MUC1 осаждались во фракции осадка 200 000 г в виде проминина-1 (рис. 7А). CEA и MUC1 также были обнаружены в других фракциях, что указывает либо на их связь с другими мембранными компонентами (10 000 90 003 г 90 004 и 400 000 90 003 г 90 004 гранул), либо на присутствие растворимых форм (400 000 90 003 г 90 004 супернатанта). Другие мембранные (например, CD63, флотиллин-1 и флотиллин-2) и цитоплазматические (например,g., syntenin-1) белки, о которых ранее сообщалось, что они связаны с экзосомами (т. е. небольшими мембранными везикулами, высвобождаемыми из мультивезикулярных телец) [61], также были обнаружены во фракции гранул 200 000 г (рис. 7A). В этой фракции и в супернатанте также были обнаружены адапторные белки семейства эзрин/радиксин/моэзин (ERM) (рис. 7А). Затем мы иммуноизолировали мембранные везикулы, содержащие проминин-1, с использованием технологии магнитных шариков с mAb AC133 и исследовали их с помощью иммуноблоттинга.Интересно, что мы наблюдали, что CEA и MUC1 были частично связаны с этими везикулами (рис. 7B, связанная (B) фракция), которые также содержали CD63, флотиллин-1, флотиллин-2 и синтенин-1. Белки ERM в них не обнаружены (рис. 7Б). Количественный анализ показал, что соотношение отдельных молекул, ассоциированных с проминин-1-позитивными везикулами, составляет 9,6±6,7% (СЕА; среднее значение ± стандартное отклонение, n = 3–4), 38±5,4% (MUC1), 27,5±13,6% (CD63). ), 6,7 ± 2,8% (флотиллин-1), 8,4 ± 3,5% (флотиллин-2) и 78 ± 3,5% (синтенин-1) от общего количества иммунореактивных белков, присутствующих в материалах, извлеченных после 200 000 g центрифугирования (рис.7B, связанный (B) + несвязанный проточный (PU)).

Рисунок 7. Ассоциация CEA, MUC1, CD63, флотиллина-1/2 и синтенина-1 с мембранными везикулами, содержащими проминин-1 слюны.

(А) Слюну человека подвергали дифференциальному центрифугированию в течение 5 мин при 300 g , 20 мин при 1200 g , 3 мин при 10000 g , 1 ч при 200000 30 g и 1 ч при 200000 30 g 9000 г . Белки в супернатанте 400000 г выделяли осаждением.Осадки анализировали иммуноблоттингом с использованием антител против различных маркеров, как указано. (B) Мембранные везикулы, обнаруженные в 10000 г супернатанта, подвергали иммуноизоляции с использованием моноклонального антитела AC133 (AC133) или козьего антимышиного антитела в качестве контроля (Ctrl). Связанные (B) и несвязанные (PU) фракции центрифугировали при 200000 g и оба осадка вместе с супернатантом несвязанной фракции (SU), извлеченной осаждением, анализировали с использованием специфических антител. проминин-1 выявляли с помощью mAb 80B258 (A) или C24B9 (B).Стрелки указывают на соответствующие белки, присутствующие в проминин-1-позитивных везикулах. Загружали аликвоты, соответствующие 500 мкл слюны. Указаны маркеры молекулярной массы (кДа).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g007

ПРОМИНИН-1 подвергается убиквитинированию

Чтобы получить больше информации о материалах, извлеченных при сильном центрифугировании, мы провели иммуноблотинг на убиквитин каждой фракции, полученной после дифференциального центрифугирования слюны.Интересно, что 200000 г фракции гранул содержали набор убиквитинированных белков с тремя неидентифицированными основными (рис. 8А, верхняя панель, точки). Чтобы оценить их связь с мембранными везикулами, содержащими проминин-1, мы провели иммуноизоляцию этих везикул с использованием магнитных шариков mAb AC133, как указано выше (рис. 8B, верхняя панель). Иммуноблотинг связанных (В) и несвязанных (осадок (PU) и супернатант (SU)) фракций показал, что действительно часть убиквитинированных белков была связана с проминин-1-позитивными везикулами (рис.8В, нижняя панель, белые точки). Неожиданно один из двух основных убиквитинированных белков показал такую ​​же электрофоретическую подвижность, как и иммунореактивные виды верхнего проминина-1, что позволяет предположить, что сам проминин-1 может быть убиквитинирован (рис. 8В, верхняя панель, наконечник стрелки). Солюбилизация мембранных материалов, извлеченных из осадка 200 000 г перед иммуновыделением проминина-1 и зондированием анти-убиквитином, показала, что верхняя мазкоподобная фракция видов проминина-1 действительно была убиквитинирована (рис.8C, открытый наконечник стрелки). Дегликозилирование проминина-1 с использованием PNGase F выявило наличие множественных иммунореактивных полос как для проминина-1, так и для убиквитина, что свидетельствует о том, что проминин-1 является моно- и мультиубиквитинированным (рис. 8D, звездочки). Не весь проминин-1, присутствующий в мембранных везикулах, убиквитинирован, учитывая, что высокомолекулярные виды гликозилированного/дегликозилированного проминина-1 представляют собой лишь незначительную часть иммунореактивности проминина-1 (рис. 8D, квадратные скобки и звездочки соответственно).

Рисунок 8.проминин-1 убиквитинирован и взаимодействует с синтенином-1.

( A ) Слюну человека подвергали дифференциальному центрифугированию, а полученные фракции анализировали с помощью иммуноблоттинга с использованием антител к убиквитину (Ubi). Основные убиквитинированные белки, обнаруженные в осадке 200 000 90 003 г 90 004, указаны (точки). Более длительное время экспозиции выявило многочисленные убиквитинированные белки. ( B ) Мембранные везикулы, обнаруженные в супернатанте 10000 г , подвергали иммуноизоляции с использованием моноклональных антител AC133 (AC133) или козьих антимышиных антител в качестве контроля (Ctrl).Связанные (B) и несвязанные (PU) фракции осаждали центрифугированием, тогда как супернатант несвязанной (SU) фракции осаждали. Осадки анализировали с использованием антител к проминину-1 (C24B9) или убиквитину (Ubi). Обозначены основные убиквитинированные белки, обнаруженные в связанной фракции (AC133) (белые точки). ( C–F ) Слюну подвергали центрифугированию и осадок 200 000 г солюбилизировали в буфере A (C, D) или B (E), тогда как белки в надосадочной жидкости (S) выделяли путем преципитации (C, E ).проминин-1 в детергентных лизатах подвергали иммуноизоляции. Связанные (B) и несвязанные (U) материалы анализировали на наличие проминина-1, убиквитина, синтенина-1 (Synt-1) и эзрина. Альтернативно, AC133-связанные материалы подвергали обработке PNGase F (D). Стрелка и черный наконечник стрелки указывают на основные полосы проминина-1, а незакрашенная стрелка указывает на убиквитинированный проминин-1 (C, E). Скобки и звездочки указывают на верхний гликозилированный/дегликозилированный убиквитинированный проминин-1 (D). Незакрашенная стрелка показывает синтенин-1, ко-иммунопреципитированный с проминином-1 (Е).Количественно определяли количество синтенина-1 и эзрина, связанных с проминином-1 (F). Были загружены аликвоты, соответствующие 500 (A–C, E) и 1250 (D) мкл слюны. Указаны маркеры молекулярной массы (кДа).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.g008

ПРОМИНИН-1 взаимодействует с синтенином-1

Высокое соотношение syntenin-1 в мембранных везикулах, содержащих prominin-1, побудило нас оценить, взаимодействует ли этот адапторный белок с prominin-1.Мы наблюдали, что при солюбилизации мембранных материалов, извлеченных из 200 000 г гранул , с использованием 0,2% Triton X-100 (или 0,5%, данные не представлены), часть синтенина-1 (7,76±0,74%, n = 3) оставалась. связан с иммуноизолированным проминином-1, в то время как эзрин — нет (фиг. 8E, незаштрихованная стрелка, фиг. 8F).

Обсуждение

Настоящее исследование выделяет три основных свойства проминина-1. Во-первых, это раскрывает новое понимание гистологической экспрессии проминина-1 в поражениях слюнных желез человека.Во-вторых, это свидетельствует о вездесущности этой молекулы. В-третьих, он идентифицирует нового взаимодействующего партнера prominin-1, а именно syntenin-1.

Общий интерес к проминину-1 вырос в геометрической прогрессии, поскольку эта молекула клеточной поверхности, и особенно ее эпитоп AC133, маркирует клетки, обладающие свойствами стволовых и раковых стволовых клеток. Другие, и мы, тем не менее, выразили обеспокоенность по поводу данных, полученных исключительно с помощью mAb AC133, поскольку соответствующий эпитоп может быть либо подавлен, либо замаскирован при определенных обстоятельствах [17], [19], [62] (рассмотрено в [63], [64] ).В результате общая экспрессия белка prominin-1 per se , по-видимому, более распространена, чем антиген AC133 в здоровых и раковых тканях, как ранее было продемонстрировано в нормальных слюнных железах [19]. Аналогичное явление наблюдалось для опухолевых тканей и воспалительных областей слюнных желез в настоящем исследовании с использованием двух антител против проминина-1 (AC133 и 80B258) на последовательных срезах (таблица 1). Независимо от тканевого состояния иммунореактивность AC133 всегда была слабее и/или присутствовала только в субпопуляции 80B258-позитивных клеток, обнаруживаемых во вставочных протокообразных структурах, и отсутствовала в секреторных (слизистых и серозно-ацинарных) клетках, т.е. соответствует предполагаемому расположению стволовых и прогениторных клеток во вставочных протоках [65].Устойчивая экспрессия антигена AC133, отмеченная в клетках AdCC, а также в секрете, может затем отражать аберрантную пролиферацию/дифференцировку стволовых клеток и клеток-предшественников. По совпадению все мембранные везикулы, содержащие проминин-1, полученные из слюны здоровых доноров, были выделены с использованием mAb AC133. Аналогичное явление также наблюдается для мембранных везикул, содержащих проминин-1, обнаруженных в моче (J.K. and D.C., неопубликованные данные). Таким образом, если эпитоп AC133 не станет более доступным в сильно изогнутой мембране небольших везикул, это позволяет предположить, что такие везикулы могут происходить из клеток вставочных протоков, а не из ацинарных серозных и слизистых клеток, где проминин-1 обнаруживается исключительно с помощью mAb 80B258.

Что касается опухолевых тканей, мы обнаружили, что проминин-1 экстенсивно экспрессируется в AdCC, в меньшей степени в AciCC и PA и только в рассеянных клетках в MEC. Как правило, его присутствие выявляли в протоко- и кистоподобных структурах, которые в основном характерны для аденом и карцином низкой степени злокачественности, т.е. опухолей, сохраняющих определенную дифференцированную морфологию ткани. Менее дифференцированные раковые ткани были отрицательными по проминину-1, что наблюдалось, в частности, при MEC высокой степени злокачественности. Эти результаты согласуются с экспрессией проминина-1 в других эпителиальных раковых тканях, включая аденокарциному поджелудочной железы, холангиокарциному и колоректальную карциному [62], [66], [67].Хотя случаи опухолей, упомянутые в этих исследованиях, имели общую хорошо/умеренно дифференцированную морфологию, некоторые из них неожиданно были связаны с худшим прогнозом, чем случаи плохо дифференцированных с проминин-1-отрицательным фенотипом, что указывает на то, что обнаружение проминина-1 может быть полезный инструмент для диагностики и, в конечном счете, для выбора адекватного лечения [66].

Субклеточная локализация проминина-1 также может быть информативной в отношении происхождения и прогрессирования рака.Независимо от типа опухоли проминин-1 часто выявляли на апикальной мембране поляризованных опухолевых клеток, напоминающих секреторные серозные и слизистые клетки, а также клетки вставочного протока нормальных слюнных желез [19]. Таким образом, его экспрессия, по-видимому, сохраняется в опухолевых клетках, происходящих из проминин-1-позитивных клеток. Мы также, хотя и редко, наблюдали, что проминин-1 распределяется по всей плазматической мембране и/или цитоплазме клеток в AdCC, что указывает на потерю клеточной поляризации и межклеточного контакта.Такие опухолевые клетки чаще встречались вблизи тонкостенных кровеносных сосудов, что указывает на возможную связь между ними. Присутствие проминина-1 во внеклеточных мембранных везикулах, которые используются в качестве устройства связи (см. ниже), согласуется с такой гипотезой. Остается выяснить, существует ли какая-либо связь между неполяризованной экспрессией проминина-1 раковыми клетками и патологической неоваскуляризацией [16]. Отсутствие поляризации проминина-1 может также отражать эпителиально-мезенхимальный переход [68], который в конечном итоге приводит к метастазированию [69], [70].В этом контексте будет интересно определить, увеличивается ли количество проминин-1-позитивных клеток в кровотоке, как ранее было продемонстрировано у пациентов с карциномой молочной железы и немелкоклеточным раком легкого [71]–[73].

Интересно, что мы наблюдали повышенную экспрессию проминина-1 во вставочных протоках в воспалительных областях, обнаруженных в СА и перитуморальных неопухолевых тканях слюнных желез. Аналогичные наблюдения были сделаны при раке почки, экзокринной части поджелудочной железы и простате [17], [20], [62].В предстательной железе проминин-1-положительные клетки демонстрировали сморщенную морфологию, характерную для пролиферативной воспалительной атрофии [20]. В тканях слюнных желез клеточные изменения были представлены атрофией секреторных компонентов и разрастанием проминин-1-позитивных клеток вставочного протока. Эти гистопатологические изменения в перитуморальных тканях могут быть следствием хронического раздражения, спровоцированного разрастанием опухолевой ткани, приводящим к возможной компрессии, стазу кровообращения и гипоксии.Воспаление может предрасполагать ткани к развитию рака. Действительно, экстенсивная экспрессия проминина-1 в эпителиальных раковых клетках была продемонстрирована на мышиной модели хронического воспаления кишечника, которое спонтанно развивается в аденокарциному [74]. Другой показатель, иллюстрирующий определенную связь проминина-1 и воспаления, связан с наблюдением, что лечение рака толстой кишки in vivo или клеток нейробластомы in vitro нестероидным противовоспалительным препаратом целекоксибом или индометацином снижает количество проминин-1-позитивных опухолевых клеток. 75]–[77].Кстати, повышенное количество фермента циклооксигеназы-2 наблюдалось в проминин-1-позитивных клетках по сравнению с негативными [76], [77]. Следовательно, связь между этими двумя молекулами следует изучить более внимательно с помощью биохимических исследований.

Интересно, что анализ коэкспрессии раковых тканей показал, что проминин-1 может дополнять и в конечном итоге расширять клиническую информацию, полученную с помощью CEA и MUC1. Например, все три маркера показали сходные паттерны экспрессии в PA, AciCC, AdCC и SA.Ситуация значительно отличается в MEC, где только MUC1 показывает четкий иммунологический сигнал. Предыдущие исследования показали взаимосвязь между экспрессией MUC1 в MEC и клиническими исходами [78]. Точно так же экспрессия MUC1 является независимым фактором риска для прогнозирования рецидива ПА [79]. Действительно, Saores и его коллеги заметили, что MUC1 более сильно экспрессируется при карциноме ex-PA по сравнению с рецидивирующим PA и PA [80]. Такое наблюдение предполагает, что MUC1 ценен не только как маркер для прогнозирования рецидива, но и для мониторинга злокачественной трансформации.Аналогичное исследование следует провести с проминином-1.

Мы наблюдали в настоящих гистологических образцах, что секретируемые материалы, обнаруженные в AdCC и PA, были положительными в отношении CEA, MUC1, а также проминина-1, что позволяет предположить, что эти мембранные белки секретируются. Частичная ассоциация CEA и MUC1 с проминин-1-содержащими мембранными везикулами слюны согласуется с таким высвобождением. Учитывая присутствие всех трех белков (prominin-1, CEA и MUC1) в секретируемых материалах, смешанных с системой кровообращения, заманчиво предположить, что мембранные везикулы, содержащие проминин-1, могут стать биомаркерами AdCC и PA.Действительно, повышенный уровень РЭА и MUC1 в крови может быть использован как индикатор запущенных форм некоторых видов рака [40]-[42], а анализ мембранных везикул, содержащих проминин-1, в спинномозговой жидкости для диагностических целей находится в стадии разработки. исследование с учетом их дифференциального уровня в связи с неврологическими заболеваниями [25], [26]. Физиологическая функция мембранных везикул, содержащих проминин-1, в настоящее время неизвестна, но присутствие микроРНК в происходящих от меланомы экзосомах, содержащих проминин-1 [81], предполагает, что они могут играть роль в межклеточной коммуникации и/или прогрессировании рака. как было предложено ранее [28].

Высвобождение мембранных везикул, содержащих проминин-1, может происходить двумя независимыми путями. Они могут происходить из кончиков микроворсинок и первичных ресничек путем почкования и высвобождения в виде эктосом, как описано у нейральных предшественников [21], [22] и кишечных клеток [82]. Наличие микроворсинок в апикальном домене клеток вставочного протока согласуется с такой гипотезой. Однако следует иметь в виду, что не все мембраны микроворсинок содержат проминин-1, о чем свидетельствует его отсутствие в поперечнополосатых протоках [19].Такой же механизм был предложен и для микровезикул, содержащих РЭА [83]. Альтернативно, мембранные везикулы, содержащие prominin-1, могут происходить из эндоцитарно-экзоцитарного пути в виде экзосом, как недавно описано в гемопоэтических стволовых клетках [28]. Высвобождение MUC1 в клетках карциномы молочной железы и клетках трахеобронхиального эпителия, по-видимому, использует этот путь [52], [84]. Тем не менее, нельзя исключать, что оба механизма реализуются одновременно [28], [81]. Присутствие проминин-1-негативных мембранных везикул, несущих белки ERM, указывает на то, что в слюне обнаруживаются несколько видов мембранных везикул.Действительно, недавний протеом двух различных типов мембранных везикул, которые классифицируются в соответствии с их размером и активностью DPPIV (CD26), показал, что проминин-1 может быть связан с обоими [23].

Внутри этих внеклеточных мембранных везикул мы обнаружили, что проминин-1 коиммунопреципитирует синтенин-1, каркасный белок, содержащий домен PDZ (PSD95/Dlg1/ZO-1). Синтенин-1 взаимодействует и контролирует внутриклеточный транспорт широкого спектра белков плазматической мембраны [85], в том числе связанных с обогащенным тетраспанином микродоменом [86], и, следовательно, прямо или косвенно участвует во многих физиологических и патологических клеточных процессах.Вместе с синдеканом и ALIX синтенин-1 также регулирует биогенез экзосом [87], что согласуется с высвобождением проминина-1 в связи с этими везикулами. Убиквитинирование многочисленных белков, обнаруженных в мембранных пузырьках слюны, содержащих проминин-1, и самом проминине-1 (рис. 8B, C), также соответствует присутствию убиквитинированных белков в экзосомах, как сообщалось ранее для белков, обнаруженных в моче человека. [88]. Природа, местонахождение по отношению к клеточному переносу и значение взаимодействия проминина-1 с синтенином-1 нуждаются в дальнейшем определении, но существование различных вариантов сплайсинга проминина-1, несущих различные цитоплазматические С-концевые домены с альтернативными классами PDZ-связывающего мотива представляет интерес в контексте модульного и гибкого распознавания белковых партнеров, содержащих домен PDZ [89].Тем не менее, в свете недавних публикаций, демонстрирующих взаимодействие синтенина-1 с убиквитином [90], [91], мы не могли исключить, что синтенин-1 может каким-то образом связываться с молекулами убиквитина, связанными с проминином-1. Такое взаимодействие может регулировать сортировку убиквитинированного проминина-1 в мультивезикулярные тельца на пути к экзосомам. Необходимо также рассмотреть выделение больших белковых комплексов, содержащих проминин-1, включая синтенин-1 и CD63 [24], [92], и протеом иммунопреципитата даст дополнительные сведения.Учитывая растущее количество публикаций, предполагающих роль проминина-1 и синтенина-1 в прогрессировании рака и метастазировании, их взаимодействие в норме и при патологии заслуживает особого внимания в ближайшем будущем. Стоит упомянуть в поддержку настоящего открытия, что обе молекулы были обнаружены в протеомном профиле субпопуляции EpCAM-ассоциированных экзосом, которые высвобождаются из органоидов, происходящих из клеток карциномы толстой кишки LIM1863 [93].

В заключение, иммуногистохимический профиль проминина-1 в слюнных железах человека показывает его общую экспрессию на апикальной плазматической мембране эпителиальных клеток вставочных протоков в нормальных железах, опухолях и при воспалительных заболеваниях, таких как SA.Биохимически убиквитинирование prominin-1 и его взаимодействие с syntenin-1 подчеркивают новые особенности его внутри- и межклеточного переноса. Учитывая связь между дифференцировкой стволовых клеток и потерей проминина-1 в результате асимметричного клеточного деления и/или его высвобождения в ассоциации с мембранными везикулами [16], [21], [28], [94], новые перспективы в биологии могут появиться стволовые и раковые стволовые клетки.

Дополнительная информация

Рисунок S1.

Отсутствие проминина-1 в определенных областях плеоморфной аденомы, ациноклеточной и мукоэпидермоидной карцином.Образцы PA ( A–C ), AciCC ( D , E ) и MEC ( F–K ) были помечены mAb 80B258, направленными против проминина-1, до контрастного окрашивания гематоксилином. Области в рамках (A1, B1, C1, D1, E1, E2) отображаются с большим увеличением. При ПА мезенхимоподобные компоненты (т.е. хондроидные, миксохондроидные и гиалинизированные участки) являются отрицательными (А-С соответственно). В AciCC со сплошным рисунком роста черные и белые стрелки указывают на отсутствие проминина-1 в ацинарных (D1, E1) и неспецифических железистых (E2) клетках соответственно. CT , соединительная ткань. В МЭК белые, синие и черные стрелки указывают на промежуточные (F), плоскоклеточные (G, H) и прозрачные (I–K) клетки соответственно. Гистопатологические характеристики отдельных случаев ПА: № 5 (А), № 3 (В) и № 4 (В), AciCC: № 2 (Г) и № 9 (Д), МЭК: № 14 (F), № 6 (G, H), № 9 (I–K) обобщены в таблице S1. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.s001

(TIF)

Рисунок S2.

проминин-1 частично коэкспрессируется с CEA и MUC1 при ациноклеточной карциноме. Последовательные срезы трех отдельных случаев AciCC ( A–D , гистопатологические характеристики см. в Таблице S1) были иммуномечены на проминин-1 (80B258 mAb), CEA (Parlam 4) и MUC1 (115D8 или DF3) или изотипом контроль (ctrl) до контрастного окрашивания гематоксилином. Области в рамках ( B1 , C1 ) отображаются с большим увеличением. Черные стрелки указывают на частичную (А, Г) или полную (В1, С1) коэкспрессию анализируемых антигенов на апикальной мембране клеток в цистоподобных структурах, присутствующих на периферии опухоли (В, С1) или ее отдельных узелках ( А, Б) и/или вблизи очагов геморрагии (С, С1, красная звездочка). CT , соединительная ткань. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.s002

(TIF)

Рисунок S3.

проминин-1 коэкспрессируется либо с CEA, либо с MUC1, либо с обоими при аденоидно-кистозной карциноме. Последовательные срезы трех отдельных случаев AdCC ( A–F , гистопатологические характеристики см. в Таблице S1) были иммуномечены на проминин-1 (80B258 mAb), CEA (Parlam 4) и MUC1 (115D8 или DF3) или с контролем изотипа (ctrl) до контрастного окрашивания гематоксилином.Области в рамках ( C1 ) отображаются с большим увеличением. Черные стрелки указывают на полную или частичную коэкспрессию анализируемых антигенов в протокоподобных структурах, включающих секрет (А) и апикальную мембрану клеток, выстилающих протоки (В, Е, F). Синие стрелки указывают на иммунореактивность в цитоплазме и/или всей плазматической мембране клеток в солидных опухолевых структурах (B-D), присутствующих вблизи геморрагических областей (красная звездочка). Красными стрелками показаны отдельные опухолевые клетки, близкие к эритроцитам (С1).Обратите внимание, что обнаружение MUC1 с помощью mAb DF3 часто бывает более слабым (C, D) или отрицательным (E). Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.s003

(TIF)

Рисунок S4.

проминин-1 частично коэкспрессируется с CEA и MUC1 в плеоморфной аденоме, неопухолевых перитуморальных областях слюнных желез и железах, пораженных сиалоаденитом. Последовательные срезы отдельных случаев PA ( A–C ), MEC ( D ) и SA ( E , F ) (см. Таблицу S1 для гистопатологических характеристик) были иммуномечены с использованием 80B258, Parlam 4 и 115D8/ мАт DF3, направленные против проминина-1, СЕА и MUC1, соответственно, или с изотипическим контролем (A F, контроль) до контрастного окрашивания гематоксилином.Изображены две отдельные области PA (A, B), перитуморальные области (C, D) и SA (E, F). Пунктирные линии отделяют опухоль ( T ) от окружающих неопухолевых областей (синяя звездочка). Черные стрелки указывают на иммунореактивность на апикальной мембране клеток, выстилающих либо протоковые структуры PA, либо вставочные протоки как в неопухолевых перитуморальных тканях (C, D), так и в SA (E, F). Обратите внимание, что антитело DF3 дает более слабый или отрицательный сигнал в нераковых тканях. Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.s004

(TIF)

Рисунок S5.

MUC1, но не проминин-1 и СЕА, часто экспрессируется при мукоэпидермоидной карциноме. Последовательные срезы отдельных случаев MEC, как указано ( A–F , гистопатологические характеристики см. в Таблице S1), были иммуномечены на проминин-1 (80B258 mAb), CEA (Parlam 4) и MUC1 (115D8 или DF3) или изотипом контроль (ctrl) до контрастного окрашивания гематоксилином.Оранжевая стрелка (А) указывает на проминин-1 в хорошо дифференцированных опухолевых слизистых клетках, присутствующих в геморрагической области (красная звездочка). MUC1 появляется в плоскоклеточных (C, D, синяя стрелка), промежуточных (C, белая стрелка), чистых (E, черная стрелка) и анапластических (F, красная стрелка) опухолевых клетках. MUC1 находится на всей клеточной мембране или в цитоплазме (белая и черная стрелки соответственно). Зеленая стрелка указывает на CEA (F). Шкала баров 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0098927.s005

(TIF)

Авторские взносы

Задумал и разработал эксперименты: JK AMM PJ WBH DC.Выполняли эксперименты: JK JL MV. Проанализированы данные: JK JL AMM PJ CAF DC. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: JK JL JM DC. Написал статью: JK CAF DC.

Каталожные номера

  1. 1. Weigmann A, Corbeil D, Hellwig A, Huttner WB (1997) Проминин, новый специфичный для микроворсинок политопный мембранный белок апикальной поверхности эпителиальных клеток, нацелен на выпячивания плазмалеммы неэпителиальных клеток. Proc Natl Acad Sci U S A 94: 12425–12430.
  2. 2.Röper K, Corbeil D, Huttner WB (2000)Удержание проминина в микроворсинках выявляет отдельные липидные микродомены на основе холестерина в апикальной плазматической мембране. Nat Cell Biol 2: 582–592.
  3. 3. Fargeas CA, Florek M, Huttner WB, Corbeil D (2003) Характеристика проминина-2, нового члена семейства промининов гликопротеинов пентаспановой мембраны. J Biol Chem 278: 8586–8596.
  4. 4. Corbeil D, Karbanová J, Fargeas CA, Jászai J (2013) Проминин-1 (CD133): молекулярные и клеточные особенности у разных видов.Adv Exp Med Biol 777: 3–24.
  5. 5. Fargeas CA (2013) Проминин-2 и другие родственники CD133. Adv Exp Med Biol 777: 25–40.
  6. 6. Инь А.Х., Миралья С., Занджани Э.Д., Алмейда-Порада Г., Огава М. и др. (1997) AC133, новый маркер человеческих гемопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников. Кровь 90: 5002–5012.
  7. 7. Учида Н., Бак Д.В., Хе Д., Рейтсма М.Дж., Масек М. и др. (2000) Прямая изоляция стволовых клеток центральной нервной системы человека. Proc Natl Acad Sci U S A 97: 14720–14725.
  8. 8. Корбейл Д., Рёпер К., Хеллвиг А., Тавиан М., Миралья С. и др. (2000) Антиген гемопоэтических стволовых клеток человека AC133 также экспрессируется в эпителиальных клетках и нацелен на выпячивания плазматической мембраны. J Biol Chem 275: 5512–5520.
  9. 9. Ричардсон Г.Д., Робсон К.Н., Ланг С.Х., Нил Д.Е., Мейтленд Н.Дж. и др. (2004) CD133, новый маркер эпителиальных стволовых клеток простаты человека. J Cell Sci 117: 3539–3545.
  10. 10. Corbeil D, Fargeas CA, Jászai J (2014) CD133 может быть общим маркером эпителиальных клеток со способностью к дедифференцировке.Proc Natl Acad Sci USA 111: E1451–1452.
  11. 11. Bao S, Wu Q, McLendon RE, Hao Y, Shi Q, et al. (2006)Стволовые клетки глиомы способствуют радиорезистентности за счет преимущественной активации реакции на повреждение ДНК. Природа 444: 756–760.
  12. 12. Liu G, Yuan X, Zeng Z, Tunici P, Ng H и др. (2006) Анализ экспрессии генов и химиорезистентности CD133+ раковых стволовых клеток при глиобластоме. Мол Рак 5: 67.
  13. 13. Horst D, Scheel SK, Liebmann S, Neumann J, Maatz S, et al.(2009) Маркер раковых стволовых клеток CD133 имеет большое прогностическое значение, но неизвестную функциональную значимость для метастазирования рака толстой кишки человека. Дж. Патол 219: 427–434.
  14. 14. Аль Дайби Р., Сартелет Х., Пауэлл Дж., Кокта В. (2010)Экспрессия раковых стволовых клеток CD133+ при злокачественной меланоме у детей и ее корреляция с метастазами. Мод Патол 23: 376–380.
  15. 15. Grosse-Gehling P, Fargeas CA, Dittfeld C, Garbe Y, Alison MR, et al. (2013) CD133 как биомаркер предполагаемых раковых стволовых клеток в солидных опухолях: ограничения, проблемы и задачи.Дж. Патол 229: 355–378.
  16. 16. Fargeas CA, Fonseca AV, Huttner WB, Corbeil D (2006) Проминин-1 (CD133): от клеток-предшественников до болезней человека. Липидология будущего 1: 213–225.
  17. 17. Florek M, Haase M, Marzesco AM, Freund D, Ehninger G, et al. (2005) Prominin-1/CD133, маркер нервных и гемопоэтических стволовых клеток, экспрессируется в дифференцированных клетках взрослого человека и при некоторых типах рака почки. Резюме клеточной ткани 319: 15–26.
  18. 18. Lardon J, Corbeil D, Huttner WB, Ling Z, Bouwens L (2008)Маркер стволовых клеток prominin-1/AC133 экспрессируется в протоковых клетках поджелудочной железы взрослого человека.Поджелудочная железа 36: e1–6.
  19. 19. Karbanová J, Missol-Kolka E, Fonseca AV, Lorra C, Janich P, et al. (2008) Маркер стволовых клеток CD133 (Prominin-1) экспрессируется в различных железистых эпителиях человека. J Histochem Cytochem 56: 977–993.
  20. 20. Миссол-Колка Э., Карбанова Дж., Янич П., Хаазе М., Фаргеас К.А. и соавт. (2011) Проминин-1 (CD133) не ограничивается стволовыми клетками, расположенными в базальном отделе предстательной железы мыши и человека. Простата 71: 254–267.
  21. 21.Marzesco AM, Janich P, Wilsch-Bräuninger M, Dubreuil V, Langenfeld K, et al. (2005) Высвобождение внеклеточных мембранных частиц, несущих маркер стволовых клеток проминин-1 (CD133), из нервных предшественников и других эпителиальных клеток. J Cell Sci 118: 2849–2858.
  22. 22. Dubreuil V, Marzesco AM, Corbeil D, Huttner WB, Wilsch-Bräuninger M (2007)Среднее тело и первичная ресничка нервных предшественников высвобождают внеклеточные мембранные частицы, обогащенные маркером стволовых клеток проминином-1.J Cell Biol 176: 483–495.
  23. 23. Огава Ю., Миура Ю., Харазоно А., Канай-Адзума М., Акимото Ю. и др. (2011)Протеомный анализ двух типов экзосом в цельной слюне человека. Биол Фарм Булл 34: 13–23.
  24. 24. Berckmans RJ, Sturk A, van Tienen LM, Schaap MC, Nieuwland R (2011)Везикулы клеточного происхождения, подвергающие воздействию коагулянтного тканевого фактора в слюне. Кровь 117: 3172–3180.
  25. 25. Huttner HB, Janich P, Kohrmann M, Jászai J, Siebzehnrubl F, et al.(2008)Маркер стволовых клеток prominin-1/CD133 на мембранных частицах в спинномозговой жидкости человека предлагает новые подходы к изучению заболеваний центральной нервной системы. Стволовые клетки 26: 698–705.
  26. 26. Huttner HB, Corbeil D, Thirmeyer C, Coras R, Kohrmann M, et al. (2012)Увеличение выделения мембран, на которое указывает повышение количества мембранных частиц, обогащенных CD133, в ЦСЖ при парциальной эпилепсии. Эпилепсия Рез. 99: 101–106.
  27. 27. Marzesco AM (2013)Мембранные везикулы, содержащие проминин-1: происхождение, формирование и полезность.Adv Exp Med Biol 777: 41–54.
  28. 28. Бауэр Н., Вильш-Бройнингер М., Карбанова Дж., Фонсека А.В., Штраус Д. и соавт. (2011) Дифференцировка гемопоэтических стволовых клеток способствует высвобождению мембранных везикул, содержащих проминин-1/CD133, — роль эндоцитарно-экзоцитарного пути. EMBO Mol Med 3: 398–409.
  29. 29. Jászai J, Janich P, Farkas LM, Fargeas CA, Huttner WB, et al. (2007)Дифференциальная экспрессия проминина-1 (CD133) и проминина-2 в крупных экзокринных железах головного мозга взрослых мышей.Histochem Cell Biol 128: 409–419.
  30. 30. Эллис Г.Л., Оклер П.Л. (2008)Опухоли слюнных желез. Silver Spring MD: ARP Press. 524 стр.
  31. 31. Caselitz J, Seifert G, Jaup T (1981)Присутствие карциноэмбрионального антигена (СЕА) в нормальной и воспаленной околоушной железе человека. Иммуногистохимическое исследование 31 случая. J Cancer Res Clin Oncol 100: 205–211.
  32. 32. Liu B, Lague JR, Nunes DP, Toselli P, Oppenheim FG и соавт. (2002)Экспрессия ассоциированных с мембраной муцинов MUC1 и MUC4 в крупных слюнных железах человека.J Histochem Cytochem 50: 811–820.
  33. 33. Алос Л., Лухан Б., Кастильо М., Надаль А., Каррерас М. и др. (2005)Экспрессия мембраносвязанных муцинов (MUC1 и MUC4) и секретируемых муцинов (MUC2, MUC5AC, MUC5B, MUC6 и MUC7) в мукоэпидермоидных карциномах слюнных желез. Ам Дж. Сург Патол 29: 806–813.
  34. 34. Handra-Luca A, Lamas G, Bertrand JC, Fouret P (2005) Экспрессия MUC1, MUC2, MUC4 и MUC5AC при мукоэпидермоидной карциноме слюнных желез: диагностические и прогностические последствия.Ам Дж. Сург Патол 29: 881–889.
  35. 35. Куфе Д., Ингирами Г., Абэ М., Хейс Д., Юсти-Уилер Х. и др. (1984)Дифференциальная реактивность нового моноклонального антитела (DF3) со злокачественными и доброкачественными опухолями молочной железы человека. Гибридома 3: 223–232.
  36. 36. Бенчимол С., Фукс А., Джоти С., Бошемин Н., Широта К. и др. (1989) Карциноэмбриональный антиген, онкомаркер человека, действует как молекула межклеточной адгезии. Ячейка 57: 327–334.
  37. 37. Hammarstrom S (1999)Семейство карциноэмбриональных антигенов (СЕА): структуры, предполагаемые функции и экспрессия в нормальных и злокачественных тканях.Семин Рак Биол 9: 67–81.
  38. 38. Ракха Э.А., Бойс Р.В., Абд Эль-Рехим Д., Куриен Т., Грин А.Р. и др. (2005) Экспрессия муцинов (MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC и MUC6) и их прогностическое значение при раке молочной железы человека. Мод Патол 18: 1295–1304.
  39. 39. Mall AS (2008)Анализ муцинов: роль в лабораторной диагностике. Дж. Клин Патол 61: 1018–1024.
  40. 40. Goldstein MJ, Mitchell EP (2005)Раково-эмбриональный антиген в постановке и последующем наблюдении за пациентами с колоректальным раком.Рак Инвест 23: 338–351.
  41. 41. Hayes DF, Sekine H, Ohno T, Abe M, Keefe K, et al. (1985) Использование мышиного моноклонального антитела для определения уровней антигена DF3 в циркулирующей плазме у пациентов с раком молочной железы. Дж. Клин Инвест 75: 1671–1678.
  42. 42. Sekine H, Hayes DF, Ohno T, Keefe KA, Schaetzl E, et al. (1985)Уровни циркулирующих антигенов DF3 и CA125 в сыворотке пациентов с эпителиальной карциномой яичников. Дж. Клин Онкол 3: 1355–1363.
  43. 43. Ангелов А., Клисарова А., Дикранян К. (1996) Радиоиммунологическое и иммуногистохимическое исследование карциноэмбрионального антигена при плеоморфной аденоме и мукоэпидермоидном раке слюнных желез.Ген Диагн Патол 141: 229–234.
  44. 44. He H, Chen GF, Zhou L, Liu YM (2009)Совместное определение уровней CEA и CA-50 в слюне и сыворотке пациентов с опухолями в области рта и слюнных желез. J Cancer Res и Clin Oncol 135: 1315–1321.
  45. 45. Streckfus C, Bigler L, Tucci M, Thigpen JT (2000)Предварительное исследование CA15-3, c-erbB-2, рецептора эпидермального фактора роста, катепсина-D и p53 в слюне женщин с карциномой молочной железы. Рак Инвест 18: 101–109.
  46. 46. Брукс М.Н., Ван Дж., Ли И, Чжан Р., Элашофф Д. и соавт. (2008) Белковые факторы слюны повышены у больных раком молочной железы. Отчет Мол Мед 1: 375–378.
  47. 47. Agha-Hosseini F, Mirzaii-Dizgah I, Rahimi A (2009)Корреляция уровней CA15-3 в сыворотке и слюне у пациентов с раком молочной железы. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 14: e521–524.
  48. 48. Бошелл М., Лалани Э.Н., Пембертон Л., Берчелл Дж., Гендлер С. и соавт. (1992) Продукт гена MUC1 человека, секретируемый клетками мыши, трансфицированными полноразмерной кДНК, лишен цитоплазматического хвоста.Biochem Biophys Res Commun 185: 1–8.
  49. 49. Zhang K, Baeckstrom D, Brevinge H, Hansson GC (1996)Секретируемые муцины MUC1, лишенные цитоплазматической части и несущие эпитопы сиалил-Льюиса a и x из линии опухолевых клеток и сыворотки пациентов с карциномой толстой кишки, могут ингибировать адгезию лейкоцитов HL-60 к E -экспрессирующие селектин эндотелиальные клетки. J Cell Biochem 60: 538–549.
  50. 50. Джулиан Дж., Карсон Д.Д. (2002) Формирование метаболического комплекса MUC1 сохраняется в опухолевых и нормальных эпителиальных клетках.Biochem Biophys Res Commun 293: 1183–1190.
  51. 51. Дай С., Ван Т., Ван Б., Чжоу С., Сю Ф. и др. (2005)Более эффективная индукция HLA-A*0201-рестриктированного и карциноэмбрионального антигена (CEA)-специфического ответа CTL путем иммунизации экзосомами, полученными из подвергнутых тепловому стрессу CEA-позитивных опухолевых клеток. Clin Cancer Res 11: 7554–7563.
  52. 52. Кесимер М., Скалл М., Брайтон Б., ДеМария Г., Бернс К. и др. (2009) Характеристика экзосомоподобных везикул, высвобождаемых из мерцательного эпителия трахеобронхов человека: возможная роль во врожденной защите.Фасеб Дж. 23: 1858–1868.
  53. 53. Дас С.К., Бхутиа С.К., Кегельман Т.П., Пичи Л., Ойесанья Р.А. и соавт. (2012) MDA-9/синтенин: положительный привратник метастазирования меланомы. Front Biosci 17: 1–15.
  54. 54. Barnes L, Evenson JW, Reichart P, Sidransky D (2005) Классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения. Патология и генетика опухолей головы и шеи. Лион: IARC Press. 430 стр.
  55. 55. Verstijnen CP, Arends JW, Moerkerk PT, Warnaar S, Hilgers J, et al.(1986) СЕА-специфичность СЕА-реактивных моноклональных антител. Иммунохимические и иммуноцитохимические исследования. Противораковые рез. 6: 97–104.
  56. 56. Caselitz J, Jaup T, Seifert G (1981) Иммуногистохимическое обнаружение карциноэмбрионального антигена (СЕА) в карциномах околоушной железы. Анализ 52 случаев. Арка Вирхова А Патол Анат Хистол 394: 49–60.
  57. 57. Хилкенс Дж., Буйс Ф., Хильгерс Дж., Хагеман П., Калафат Дж. и др. (1984)Моноклональные антитела против мембран молочно-жировых шариков человека, выявляющие антигены дифференцировки молочной железы и ее опухолей.Int J Рак 34: 197–206.
  58. 58. Corbeil D, Fargeas CA, Huttner WB (2001) Крысиный проминин, как и его мышиные и человеческие ортологи, представляет собой гликопротеин пентаспановой мембраны. Biochem Biophys Res Commun 285: 939–944.
  59. 59. Прайс М.Р., Рай П.Д., Петраку Э., Мюррей А., Брэди К. и др. (1998) Краткий отчет о семинаре ISOBM TD-4: анализ 56 моноклональных антител против муцина MUC1. Сан-Диего, Калифорния, 17–23 ноября 1996 г. Tumor Biol 19 Suppl 1: 1–20.
  60. 60.Бон Г.Г., фон Менсдорф-Пуйи С., Кенеманс П., ван Камп Г.Дж., Верстратен Р.А. и соавт. (1997)Клиническая и техническая оценка анализа сыворотки ACS BR на гликопротеин, полученный из гена MUC1, при раке молочной железы и сравнение с анализами CA 15-3. Clin Chem 43: 585–593.
  61. 61. Thery C, Boussac M, Veron P, Ricciardi-Castagnoli P, Raposo G, et al. (2001)Протеомный анализ экзосом, происходящих из дендритных клеток: секретируемый субклеточный компартмент, отличный от апоптотических пузырьков. Дж. Иммунол 166: 7309–7318.
  62. 62. Immervoll H, Hoem D, Sakariassen PO, Steffensen OJ, Molven A (2008)Экспрессия «маркера стволовых клеток» CD133 в аденокарциномах поджелудочной железы и протоков поджелудочной железы. BMC Рак 8: 48.
  63. 63. Bidlingmaier S, Zhu X, Liu B (2008)Полезность и ограничения гликозилированных эпитопов CD133 человека при определении раковых стволовых клеток. J Mol Med (Берл) 86: 1025–1032.
  64. 64. Fargeas CA, Karbanová J, Jászai J, Corbeil D (2011) CD133 и мембранные микродомены: старые грани для будущих гипотез.World J Gastroenterol 17: 4149–4152.
  65. 65. Pringle S, Van Os R, Coppes RP (2013) Краткий обзор: стволовые клетки слюнных желез взрослых и потенциальная терапия ксеростомии. Стволовые клетки 31: 613–619.
  66. 66. Кодзима М., Исии Г., Ацуми Н., Фуджи С., Сайто Н. и др. (2008) Иммуногистохимическое обнаружение экспрессии CD133 при колоректальном раке: клинико-патологическое исследование. Наука о раке 99: 1578–1583.
  67. 67. Fan L, He F, Liu H, Zhu J, Liu Y и др.(2011) CD133: потенциальный индикатор дифференциации и прогноза холангиокарциномы человека. BMC Рак 11: 320.
  68. 68. Лестер Р.Д., Джо М., Монтель В., Такимото С., Гониас С.Л. (2007) uPAR индуцирует эпителиально-мезенхимальный переход в гипоксических клетках рака молочной железы. J Cell Biol 178: 425–436.
  69. 69. Thiery JP (2002)Эпителиально-мезенхимальные переходы при опухолевой прогрессии. Nat Rev Рак 2: 442–454.
  70. 70. Имаи Т., Хориучи А., Ван С., Ока К., Охира С. и др.(2003) Гипоксия ослабляет экспрессию E-кадгерина за счет повышающей регуляции SNAIL в клетках карциномы яичников. Ам Дж. Патол 163: 1437–1447.
  71. 71. Sussman LK, Upalakalin JN, Roberts MJ, Kocher O, Benjamin LE (2003)Маркеры крови для васкулогенеза увеличиваются по мере прогрессирования опухоли у пациентов с карциномой молочной железы. Cancer Biol Ther 2: 255–256.
  72. 72. Hilbe W, Dirnhofer S, Oberwasserlechner F, Schmid T, Gunsilius E, et al. (2004) CD133-положительные эндотелиальные клетки-предшественники вносят вклад в сосудистую сеть опухоли при немелкоклеточном раке легкого.Дж. Клин Патол 57: 965–969.
  73. 73. Армстронг А.Дж., Маренго М.С., Олтин С., Кемени Г., Биттинг Р.Л. и др. (2011) Циркулирующие опухолевые клетки от пациентов с распространенным раком предстательной железы и молочной железы обнаруживают как эпителиальные, так и мезенхимальные маркеры. Мол Рак Рез. 9: 997–1007.
  74. 74. Шмельков С.В., Батлер Дж.М., Хупер А.Т., Хормиго А., Кушнер Дж. и соавт. (2008) Экспрессия CD133 не ограничивается стволовыми клетками, и как CD133+, так и CD133- метастатические раковые клетки толстой кишки инициируют опухоли.Дж. Клин Инвест 118: 2111–2120.
  75. 75. Лоннрот С., Андерссон М., Нордгрен С., Лундхольм К. (2012)Подавление экспрессии проминина 1/CD133 при колоректальном раке с помощью НПВП после краткосрочного предоперационного лечения. Int J Oncol 41: 15–23.
  76. 76. Chen KH, Hsu CC, Song WS, Huang CS, Tsai CC, et al. (2010) Целекоксиб повышает радиочувствительность CD133-позитивных клеток, происходящих из медуллобластомы. Чайлдс Нерв Сист 26: 1605–1612.
  77. 77. Ma HI, Chiou SH, Hueng DY, Tai LK, Huang PI и др.(2011) Целекоксиб и радиорезистентные клетки CD133+, полученные из глиобластомы: улучшение радиотерапевтических эффектов. Лабораторное исследование. Дж. Нейросург 114: 651–662.
  78. 78. Магомед Ф (2011)Последние достижения в иммуногистохимии муцина при опухолях слюнных желез и плоскоклеточном раке головы и шеи. Оральный онкол 47: 797–803.
  79. 79. Хамада Т., Мацукита С., Гото М., Китадзима С., Батра С.К. и др. (2004)Экспрессия муцина при плеоморфной аденоме слюнной железы: потенциальная роль MUC1 в качестве маркера для прогнозирования рецидива.Дж. Клин Патол 57: 813–821.
  80. 80. Soares AB, Demasi AP, Altemani A, de Araujo VC (2011)Повышение экспрессии муцина 1 при рецидиве и злокачественной трансформации плеоморфной аденомы слюнной железы. Гистопатология 58: 377–382.
  81. 81. Rappa G, Mercapide J, Anzanello F, Pope RM, Lorico A (2013)Биохимическая и биологическая характеристика экзосом, содержащих проминин-1/CD133. Мол Рак 12: 62.
  82. 82. Marzesco AM, Wilsch-Bräuninger M, Dubreuil V, Janich P, Langenfeld K, et al.(2009) Высвобождение внеклеточных мембранных везикул из микроворсинок эпителиальных клеток усиливается за счет истощения мембранного холестерина. FEBS Lett 583: 897–902.
  83. 83. Баранов В., Юнг М.М., Хаммарстром С. (1994) Экспрессия карциноэмбрионального антигена и неспецифического перекрестно реагирующего антигена 50 кДа в нормальной и раковой слизистой толстой кишки человека: сравнительное ультраструктурное исследование с моноклональными антителами. Рак Рез. 54: 3305–3314.
  84. 84. Штаубах С., Разави Х., Ханиш Ф.Г. (2009)Протеомика липидных рафтов, содержащих MUC1, из плазматических мембран и экзосом клеток карциномы молочной железы человека MCF-7.Протеомика 9: 2820–2835.
  85. 85. Beekman JM, Coffer PJ (2008)Все плюсы и минусы синтенина, многофункционального внутриклеточного адапторного белка. J Cell Sci 121: 1349–1355.
  86. 86. Латышева Н., Муратов Г., Раджеш С., Паджетт М., Хотчин Н.А. и соавт. (2006) Синтенин-1 — новый компонент обогащенных тетраспанином микродоменов: механизмы и последствия взаимодействия синтенина-1 с CD63. Мол Селл Биол 26: 7707–7718.
  87. 87. Байетти М.Ф., Чжан З., Мортье Э., Мельхиор А., Дегест Г. и др.(2012) Syndecan-syntenin-ALIX регулирует биогенез экзосом. Nat Cell Biol 14: 677–685.
  88. 88. Писиткун Т., Шен Р.Ф., Кнеппер М.А. (2004)Идентификация и протеомное профилирование экзосом в моче человека. Proc Natl Acad Sci U S A 101: 13368–13373.
  89. 89. Fargeas CA, Huttner WB, Corbeil D (2007) Номенклатура вариантов сплайсинга проминина-1 (CD133) — обновление. Тканевые антигены 69: 602–606.
  90. 90. Раджеш С., Баго Р., Одинцова Э., Муратов Г., Болдуин Г. и др.(2011) Связывание с белком syntenin-1 определяет новый способ основанных на ubiquitin взаимодействий, регулируемых фосфорилированием. J Biol Chem 286: 39606–39614.
  91. 91. Okumura F, Yoshida K, Liang F, Hatakeyama S (2011) MDA-9/синтенин взаимодействует с убиквитином через новый убиквитин-связывающий мотив. Mol Cell Biochem 352: 163–172.
  92. 92. Мак А.Б., Никсон А.М., Киттанаком С., Стюарт Дж.М., Чен Г.И. и др. (2012) Регуляция CD133 с помощью HDAC6 способствует передаче сигналов бета-катенина для подавления дифференцировки раковых клеток.Ячейка Rep 2: 951–963.
  93. 93. Тауро Б.Дж., Грининг Д.В., Матиас Р.А., Мативанан С., Джи Х. и др. (2013) Две различные популяции экзосом высвобождаются из органоидов, происходящих из клеток карциномы толстой кишки LIM1863. Мол клеточная протеомика 12: 587–598.
  94. 94. Косодо Ю., Рёпер К., Хаубенсак В., Марцеско А.М., Корбейл Д. и др. (2004)Асимметричное распределение апикальной плазматической мембраны во время нейрогенных делений нейроэпителиальных клеток млекопитающих. EMBO J 23: 2314–2324.
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.